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澤瀉梗的營養成分及對α-葡萄糖苷酶活性的影響

2014-01-09 05:07:46盧艷梅譚瀟嘯肖小年
天然產物研究與開發 2014年11期

易 醒,盧艷梅,譚瀟嘯,肖小年

1南昌大學中德食品工程中心;2 南昌大學中德聯合研究院,南昌 330047

澤瀉是常用的中藥材之一,歷代醫學書籍均有收載,是五苓散、豬苓湯、消渴方和六味地黃丸等的主藥。澤瀉主產于福建、江西和四川等地,以福建建甌、建陽及江西廣昌等地產的“建澤瀉”為道地產品[1,2]。其藥用部位通常為塊莖,如2010 版中國藥典收藏的澤瀉即為澤瀉科植物澤瀉Alisma orientale(Sam.)Juzep.的干燥塊莖,而古籍中將澤瀉葉、果實和塊莖都列為藥用部位。目前的研究大多針對澤瀉的塊莖,有關澤瀉其它部位的研究報道比較少見,這就會造成澤瀉其它部位的應用缺乏依據,全植株不能得到合理地充分利用[3]。此外,澤瀉的藥理研究目前主要集中在其利尿、降血脂和預防脂肪肝功效等方面,而在其治療糖尿病功能方面則不夠深入[4]。

澤瀉梗是澤瀉的總花梗,綠色,長條狀,長度一般為15~25 cm 左右。在澤瀉產區,當地居民有食用澤瀉梗的習慣,并且將其作為一種高檔菜肴。對于澤瀉梗的營養價值情況及藥用活性未見有文獻報道。本著充分利用植物資源的目的,筆者對澤瀉梗中所含營養素情況進行測定和分析,并就其粗提取物對α-葡萄糖苷酶活性的影響進行了考察。

1 材料與儀器

澤瀉梗,采自江西撫州,經江西中醫藥大學劉慶華老師鑒定為Alisma orientale (Sam.)Juzep 的總花梗,長度為15~25 cm,直徑為1.5~2 cm。采摘后曬干,實驗時用研缽碾碎,過65 目篩。

α-葡萄糖苷酶,取自小鼠小腸(實驗室制備);維生素C 標準品,購自中國食品藥品檢定研究院(批號:100425-200702);石油醚、丙酮、冰乙酸、鹽酸、硫酸、蒽酮、氫氧化鈉、氫氧化鉀、硫酸銅、乙酸鋅、硫脲、草酸、亞硝酸鈉、亞鐵氰化鉀、2,4-二硝基苯肼、亞甲基藍等均為國產分析純試劑。

MA4SC-000230V1 型水分測定儀(德國Sartorius公司);SX-4-10 型箱式節能電阻爐(湖北英山國營實驗設備廠);KDY-9820 型凱氏定氮儀(北京瑞邦興業科技有限公司);T6 新世紀紫外可見光分光光度計(北京普析公司);L-8800 系列氨基酸自動分析儀(日本日立公司);DNM-9602 型酶標儀(北京普朗新技術有限公司);EYELA N-1001D 旋轉蒸發儀(上海愛朗儀器有限公司);SHB-Ⅲ型循環水試多用真空泵(鄭州長城科工貿有限公司);DGG-9240A1 電熱恒溫鼓風干燥箱(上海森信實驗儀器有限公司);DK-S24 型電熱恒溫水浴鍋(上海森信實驗儀器有限公司);索氏提取器。

2 實驗方法

2.1 營養成分的測定

2.2 蛋白質的營養價值評價

為綜合評價澤瀉梗蛋白質的營養,采用下述兩種方法對其所含必需氨基酸(EAA)進行分析。

2.2.1 基于限制必需氨基酸的化學評分法[7]計算樣品蛋白質的必需氨基酸與WHO/FAO模式中對應氨基酸的比值,樣品中比值最低的氨基酸為第一限制氨基酸,該比值即為該樣品蛋白質的化學評分。分值越高,說明樣品的蛋白質價值越高。計算公式如下:

式中:試樣中氨基酸含量與WHO/FAO 模式中相應必需氨基酸含量均以每克蛋白質中的含量計,單位為mg。

2.2.2 氨基酸比值系數法

食物蛋白質的氨基酸組成越接近人體必需氨基酸的組成,其營養價值越高。因此,世界衛生組織(WHO)和聯合國糧農組織(FAO)提出了評價蛋白質營養價值的必需氨基酸模式氨基酸比值系數法[8,9]。根據氨基酸平衡理論,利用WHO/FAO 的必需氨基酸模式,按照公式(2)、(3)和(4)計算樣品的必需氨基酸比值RAA(Ratio of Amino Acid)、氨基酸比值系數RC(Ratio Coefficient of Amino Acid)和氨基酸比值系數分SRC(Score of RC),據此來評價蛋白質的營養價值。SRC值越接近100,其蛋白質的營養價值越高。

式中:樣品中必需氨基酸含量與模式中對應必需氨基酸含量均以每克蛋白質中的含量計,單位為mg。

式中:Rci表示樣品中各氨基酸的氨基酸比值系數,表示樣品中各氨基酸的氨基酸比值系數的均數。

2.3 澤瀉梗粗提物對α-葡萄糖苷酶的抑制活性測定

2.3.1 水提醇沉物的制備

在借鑒Jackson E L、Crawford D W和Godbey G等休閑制約理論模型基礎上,學者Walker GJ和Virden R J針對戶外游憩活動提出了戶外游憩制約因素模型 (圖5)。整個模型是一個循環反饋的過程。尤其是該模型新增加了先行宏觀因素 (包括種族、性別、文化等)和先行微觀因素 (包括個性、需求、態度和信仰等)[2]240-243和環境條件3個變量。模型中有利于休閑行為實現的環境條件受到微觀因素和宏觀因素的共同影響。休閑制約協商則受到微觀因素和環境條件的共同影響。而環境條件影響休閑偏好、休閑參與決策和實際參與行為。

取澤瀉梗粉末,加5 倍水于60 ℃提取三次,每次30 min,收集提取液,濃縮,加95%乙醇至乙醇終濃度為70%,低溫靜置24 h,4000 r/min 離心10 min,取上清液,過濾并收集濾液,濃縮至干,得到水提醇沉物。取部分上述水提醇沉物,用蒸餾水配成500 μg/mL 的供試溶液,備用。

2.3.2 醇提物的制備

取澤瀉梗粉末,加5 倍70%乙醇于60 ℃提取三次,每次30 min,收集提取液,過濾,濃縮至干,得到醇提物。取部分上述醇提物,用蒸餾水配成500 μg/mL 的供試溶液,備用。

2.3.3 α-葡萄糖苷酶抑制活性的測定方法

[10]的方法,分空白組、樣品組和背景組??瞻捉M加130 μL 磷酸鹽緩沖液(0.067 mol/L)、20 μL α-葡萄糖苷酶、10 μL 還原型谷胱甘肽溶液(1 mg/mL);樣品組加110 μL 磷酸鹽緩沖液(0.067 mol/L)、20 μL α-葡萄糖苷酶、20 μL 樣品溶液(500 μg/mL)、10 μL 還原型谷胱甘肽溶液(1 mg/mL);背景組加130 μL 磷酸鹽緩沖液(0.067 mol/L)、20 μL 樣品溶液(500 μg/mL)、10 μL 還原型谷胱甘肽溶液(1 mg/mol);以上三組37 ℃溫育15 min 后,分別加20 μL 底物pNPG 溶液(2.5 mmol/L),反應10 min 后,分別加80 μL Na2CO3溶液,終止反應,并用酶標儀分別測定其在405 nm 處的吸光值,計算抑制率。阿卡波糖作為陽性對照物。

A空白為空白組的吸光值,A樣品為樣品組的吸光值,A背景為背景組的吸光值。

3 結果與討論

3.1 澤瀉梗的一般營養成分

澤瀉梗所含營養成分情況見表1。從表1 可以看出,澤瀉梗的粗蛋白含量為26.1%,大于總質量的四分之一;澤瀉梗的灰分含量為8.7%,說明澤瀉梗中礦物質元素含量較高;維生素C 含量為406.3 mg(每100 g 澤瀉梗),中國營養學會推薦的成人膳食維生素C 攝入量為100 mg/d,每日食用約25 g 的澤瀉梗即可滿足人體需要;胡蘿卜素含量為380 μg,相當于約1267 IU,大于中國營養協會推薦的成年男子每日攝入量;澤瀉梗中膳食纖維的含量高達27.56%,每天攝入200 g 即可達到《中國居民膳食指南(2007)》的推薦量下限(50~100 g);能量物質中,糖類(還原糖和多糖)含量為9.09%,脂肪含量只有2.21%,說明澤瀉梗是一種低熱量物質。

表1 澤瀉梗的一般營養成分(以每100 g 干樣計)Table 1 Common nutritional components of the peduncle of A.orientale (per 100 g of dry sample)

3.2 澤瀉梗的氨基酸組成及含量

根據氨基酸檢測結果(表2),可發現澤瀉梗含17 種氨基酸,種類齊全。澤瀉梗的氨基酸占總質量的17.75%,必需氨基酸占總質量的1.42%,氨基酸含量豐富。澤瀉梗含8 種必需氨基酸,1 種半必需氨基酸,共占氨基酸總含量的41.09%;其中亮氨酸的含量最高,為氨基酸總含量的10.80%;其次是賴氨酸和纈氨酸,分別占氨基酸總含量的7.49%和5.78%。我國居民的膳食以谷類食物為主,容易缺乏賴氨酸,而澤瀉梗中的含量很高,因此,在膳食中與谷類食物搭配食用具有蛋白質互補的效果,可以提高食物的總氨基酸利用率。澤瀉梗的蛋白質組成中必需氨基酸/總氨基酸(EAA/TAA)接近40%、必需氨基酸/非必需氨基酸(EAA/NTAA)大于60%,按照FAO/WHO 的標準,屬于質量好的蛋白質。此外,澤瀉梗中天門冬氨基酸含量最高,占氨基酸總量的23.81%,谷氨酸的含量占總氨基酸含量的10.80%,甘氨酸和丙氨酸的含量分別占總氨基酸含量的5.21%和5.79%。天門冬氨酸和谷氨酸使食物增鮮,甘氨酸和丙氨酸使食物呈現自然的甜味,而這些氨基酸在澤瀉梗中的含量很高,這或許是澤瀉梗味道鮮美,甘甜可口的原因。

3.3 澤瀉梗蛋白的化學評分

澤瀉梗蛋白基于第一限制人體必需氨基酸的化學評分值的比較見表3。

表2 澤瀉梗中氨基酸的組成及含量Table 2 Composition and content of amino acids from the peduncle of A.orientale

表3 各種蛋白基于第一限制人體必需氨基酸需要量的化學評分值的比較Table 3 Comparison between chemical score of the proteins from the peduncleof A.orientale and other common food materials

澤瀉梗蛋白的第一限制氨基酸為含硫氨基酸(蛋氨酸+胱氨酸),其化學評分為7,低于油菜、蘆筍、大豆和粳米這些常見食物,但澤瀉梗的蛋白質含量高于油菜和蘆筍中蛋白質的含量。澤瀉梗、油菜和大豆的限制氨基酸均為含硫氨基酸,而粳米中的含硫氨基酸則高于氨基酸的理想含量;澤瀉梗、油菜和大豆中的賴氨酸含量較高,而粳米蛋白的第一限制氨基酸為賴氨酸;因此,澤瀉梗與粳米等谷類食物搭配食用,可通過互補作用提高蛋白質的營養價值。

3.4 澤瀉梗蛋白的平衡性分析

澤瀉梗蛋白質在WHO/FAO 的氨基酸模式下的氨基酸比值、氨基酸比值系數和比值系數分如表4 所示。澤瀉梗、油菜、蘆筍、大豆和粳米的氨基酸比值均數分別為0.67、0.79、0.64、1.14 和1.16,這說明澤瀉梗的必需氨基酸總含量是模式氨基酸的0.67倍,略高于蘆筍,低于油菜、大豆和粳米。澤瀉梗、油菜、蘆筍、粳米和大豆的氨基酸比值系數分分別為53、65、63、66 和80,說明澤瀉梗的蛋白質的氨基酸平衡性低于油菜、蘆筍、粳米和大豆這些常見的植物性食物。

表4 澤瀉梗及一些常見食物的蛋白質中氨基酸比值系數分比較Table 4 Comparison of the amino acid ratio coefficients of the proteins from the peduncle of A.orientale and other common food materials

3.5 澤瀉梗粗提物對α-葡萄糖苷酶的抑制活性

從表5 可以看出,澤瀉梗水提醇沉物的α-葡萄糖苷酶抑制率為43.75%,高于澤瀉梗醇提物的39.90%,低于阿卡波糖陽性對照組的49.35%,表現出一定的抑制α-葡萄糖苷酶活性。

表5 澤瀉梗粗提物的α-葡萄糖苷酶抑制活性Table 5 The α-glucosidase inhibition of different extracts of the peduncle of A.orientale

4 結論

澤瀉梗(每100 g 干樣)含粗蛋白26.10 g、粗脂肪2.20 g、總膳食纖維27.56 g、灰分8.70 g、多糖4.22 g、還原糖4.87 g、維生素C 406.30 mg、胡蘿卜素380.00 μg,其營養素種類齊全,并且比例合理,是一種營養豐富的食物。澤瀉梗的必需氨基酸種類齊全,組成比例不均衡,含硫氨基酸是其限制氨基酸,但其賴氨酸含量較高,與谷類食物搭配食用可起到蛋白質互補的作用;澤瀉梗含有豐富的天門冬氨酸、谷氨酸和甘氨酸等鮮味氨基酸,口感鮮美。澤瀉梗水提醇沉物的α-葡萄糖苷酶抑制活性略低于對照組阿卡波糖。

參考文獻

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