乳腺癌組織中Trop—2蛋白的表達及意義

摘要：目的 探討Trop-2在乳腺癌組織中的表達水平及臨床意義。方法 選擇125例乳腺癌組織、30例正常乳腺組織和30例乳腺良性增生組織，應用免疫組織化學SABC法檢測Trop-2的表達水平。結果 125例乳腺癌中Trop-2陽性者84例（67.2%）；30例乳腺良性增生組織Trop-2陽性者11例（36.7%）；30例正常乳腺組織Trop-2陽性者8例（26.7%）；Trop-2陽性表達率與乳腺癌的分化程度、淋巴結轉移、臨床分期有關，而與患者年齡、腫瘤大小無顯著相關性。結論 乳腺癌高表達Trop-2。Trop-2的異常表達可能參與了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展過程，Trop-2有望成為乳腺癌治療的分子靶點。

關鍵詞：乳腺癌；Trop-2

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤之一，它的發(fā)生和發(fā)展是一個復雜的多基因調控異常的過程。腫瘤相關鈣信號轉導蛋白（tumor-associated calcium signal transducer 2 ， Trop-2）是一種高表達于多種上皮性腫瘤的細胞表面蛋白，參與了腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和侵襲轉移過程[1]。我們采用免疫組織化學方法檢測了125例乳腺癌患者Trop-2的表達情況，探討Trop-2在乳腺癌臨床和病理診斷中的作用及意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集本院2009年6月～2010年9月我院外科住院手術治療的乳腺癌患者125例手術切除標本，均病理證實為浸潤性導管癌，年齡39～77歲；伴淋巴結轉移74例，無淋巴結轉移51例；腫物<2 cm 37例，2～5cm 77例，≥5 cm 11例；高分化癌48例，低分化癌77例；臨床分期采用1997年國際抗癌聯(lián)合會（Union International Cantrell Cancer， UICC）TNM分類分期標準，臨床Ⅰ期12例，Ⅱ期35例，Ⅲ期64例，Ⅳ期14例。另選擇30例乳腺良性增生組織，及同期手術切除的30例正常乳腺組織作為對照組。

1.2方法 病理診斷與分類依據(jù)2003年《WHO乳腺及女性生殖器官腫瘤病理學和遺傳學》中乳腺癌的診斷標準，由包括兩位高級病理醫(yī)生在內(nèi)的三位醫(yī)師進行診斷及分級。所有組織學診斷均基于經(jīng)常規(guī)處理后，蘇木精和伊紅染色的形態(tài)學檢查。冰凍標本常規(guī)4μm連續(xù)切片，一抗工作濃度（TROP-2鼠抗人單克隆抗體）為1∶400。采用免疫組化SABC法，DAB液顯色，蘇木素復染。實驗設PBS代替一抗為陰性對照，作為質量控制標準。分乳腺癌組織組、乳腺良性增生組織組和正常乳腺組織組。

1.3結果判定 光鏡下，隨機選擇5個視野，采用雙評分，陽性細胞百分率評分：≤25%為0分，26%～50%為1分，51%～75%為2分，>75%為3分；染色強度評分：無顯色為0分，淺棕黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。將以上2項得分相加：1～2分判為\"+\"，3～4分判為\"++\"，5～6分判為\"+++\"。\"+\"為弱陽性表達；\"++\"和\"+++\"為陽性表達。癌組織染色強度≥3或癌組織染色強度=2，但陽性細胞百分率≥10%皆為有表達，癌組織染色強度≤1，不論陽性率多大，皆歸為無表達。TROP-2陽性定位于細胞膜。

1.4統(tǒng)計學方法 采用SPSS 11.5統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 乳腺癌組織Trop-2的表達水平 免疫組化檢測發(fā)現(xiàn)Trop-2蛋白的表達以細胞膜為主。正常乳腺組織及乳腺良性增生組織中很少見到淺棕色顆粒，呈弱陽性或陰性表達水平（見圖1～2），而乳腺癌組織中可以出現(xiàn)較多的棕色或深棕色顆粒，呈高表達水平（見圖3）。125例乳腺癌癌組織中Trop-2陽性表達共有84例，陽性率為67.2%，顯著高于正常乳腺組織（26.7%）和乳腺良性增生組織（36.7%），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。

2.2 Trop-2的表達水平與臨床病理特征的相關性 77例低分化乳腺癌組織中Trop-2陽性表達有61例，陽性率為79.2%；而48例高分化乳腺癌組織中Trop-2陽性表達有23例，陽性率為47.9%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。在伴有淋巴結轉移的74例乳腺癌組織中Trop-2陽性表達為57例，陽性率77.0%；而在無淋巴結轉移的51例乳腺癌組織中Trop-2陽性表達為31例，陽性率為60.8%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。47例Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌組織中TROP-2陽性表達有23例，陽性率為48.9%；而78例Ⅲ、Ⅳ乳腺癌組織中Trop-2陽性表達有60例，陽性率為76.9%，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。Trop-2的陽性表達率與患者年齡、性別、腫瘤大小無顯著相關性（見表1）。

3 討論

Trop-2亦稱為M1S1，是GA733基因家族中的一員，定位在1號染色體短臂上 ，所編碼的產(chǎn)物為含有323個氨基酸、35.7kDa的蛋白質，被認為是一種腫瘤相關抗原，表達于上皮性腫瘤細胞表面的糖蛋白，其包含一個上皮生長因子樣的重復區(qū)，一個甲狀腺球蛋白樣重復區(qū)，其分子羥基端含有絲氨酸和酪氨酸位點及PIP-2結合區(qū)域，其絲氨酸殘端為激酶c所磷酸化。Trop-2蛋白的生理功能不是十分清楚，目前認為它是一種細胞膜鈣離子通道相關蛋白，與細胞內(nèi)鈣離子濃度的調控有關，具有調節(jié)腫瘤細胞的生長、促進腫瘤細胞的侵襲和轉移的作用[2-4]。近年的研究表明，Trop-2在許多實體瘤如大腸癌、乳腺癌食管癌等腫瘤中均有過表達[5-6]。Trop-2在腫瘤組織的高表達和在正常組織的低表達使得特異性Trop-2的單克隆抗體成為一種治療手段[7]。我們的研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌組織Trop-2呈強陽性表達，正常乳腺組織不僅表達強度下降，而且陽性表達率也明顯下降。Wang等研究發(fā)現(xiàn)Trop-2的高表達與腫瘤的侵襲轉移有關，用RNA干擾技術下調Trop-2表達，大腸癌細胞侵襲轉移能力明顯下調[8]。由此我們推測，Trop-2有望成為乳腺癌的一種新的治療靶點。

研究發(fā)現(xiàn)[9]，腫瘤的不同TNM分期中Trop-2的陽性表達率隨著分期的升高而升高，提示Trop-2有可能與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關，可以作為腫瘤轉移的標志物之一。我們發(fā)現(xiàn)，在低分化乳腺組織及伴有淋巴結轉移的乳腺癌組織中，Trop-2陽性表達率較高，而在高分化乳腺癌組織及無淋巴結轉移的乳腺癌組織中Trop-2陽性表達率明顯下降，Ⅲ、Ⅳ乳腺癌組織中Trop-2表達水平明顯高于Ⅰ、Ⅱ期乳腺癌組織，提示Trop-2的高表達可能參與了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展和侵襲轉移過程。但其具體機制目前尚不清楚。

總之，乳腺癌組織高表達Trop-2，Trop-2的異常表達可能參與了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展和侵襲轉移過程，Trop-2有望成為乳腺癌臨床診治及預后判斷的分子靶點。

參考文獻：

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[8 Wang J. Identification of Trop-2 as an on cogene and an attractive therapeutic target in colon caIlcer8[J].Mol Cancer Tber2008，7（2）：280-285.

[9]Eliana B. Trop-2 protein over expression is an independent marker for predicting disease recurrence in endometrioid endometrial carcinoma[J].BMC Clinical Pathology， 2012， 12（22）：1472-1481.編輯/王敏