涼州區規模養殖場豬偽狂犬病血清學調查

摘要：為了掌握近年來甘肅省武威市涼州區規模養殖場豬偽狂犬病感染情況，2010-2012年，在全區46個養豬場（點/次）共采集1 899份血清，用ELISA檢測試劑盒進行了豬偽狂犬病抗體檢測。結果顯示，抗體陽性數148份， 抗體陽性率7.79%，其中2010-2012年抗體陽性率分別為9.12%、8.70%、4.38%。結果表明，涼州區規模養殖場不同程度地受到豬偽狂犬病的野毒感染。

關鍵詞：豬偽狂犬病；酶聯免疫吸附試驗；調查

中圖分類號：S858.28 文獻標識碼：B 文章編號：1007-273X（2013）10-0043-02

豬偽狂犬病是由偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus，PRV）引起的多種家畜和野生動物的一種急性傳染病[1，2]。PRV感染豬主要通過母豬胎盤和公豬精液垂直傳播，同時也可水平傳播。該病可引起種公豬的不育、妊娠母豬的流產、產死胎和木乃伊胎，可引起新生仔豬的大量死亡而造成養豬業的較大經濟損。20世紀90年代以來分子生物學和基因工程技術取得了重大進展，研制出了豬偽狂犬病病毒基因缺失疫苗，應用ELISA方法檢測gE抗體，可以區分疫苗抗體和野毒抗體，在近20年來有效阻止和控制了豬偽狂犬病的發生[3]。

武威市涼州區是全國生豬調出大縣，2012年底，生豬飼養量達73.9萬頭，規模養豬場達到1.9萬戶，養豬近55萬頭，占豬飼養量的75%。因此，做好規模豬場豬偽狂犬病血清學檢測，能夠及時清除隱性帶毒豬，不斷提高豬場的養殖效益。為了解甘肅省武威市涼州區規模養豬場偽狂犬病的流行情況，在2010-2012年期間共采集規模豬產場血清1 899份，進行豬偽狂犬病血清學調查，現將調查結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 待檢血清

2010-2012年在涼州區養豬場46個場點次，共采集1 899份血清。

1.2 試劑

豬偽狂犬gE-ELISA抗體檢測試劑盒購自美國IDEXX公司。

1.3 方法

ELISA方法[4]：①取出抗原包被板，在每孔中加入50 μL稀釋液、50 μL陰陽性對照和待檢血清，陰性對照設3 孔，陽性對照設2孔。②輕輕混勻，用封條封閉微量反應板，置室溫孵育1 h。③用洗滌液洗板3次，300 μL/孔，最后一次將板中殘留洗滌液扣拍到吸水材料上。④每孔加100 μL 辣根過氧化物酶標記抗PRV gE抗體，室溫孵育20 min。⑤洗滌3次，方法同③。⑥每孔加入100 μLTMB底物溶液，避光且室溫孵育15 min。⑦每孔加入50 μL終止液，酶標儀上測各孔OD650 nm值。⑧試驗成立條件是陰性對照0D650 nm平均值減去陽性對照0D650 nm平均值必須≥0.3。

1.4 判斷標準

通過計算樣品與陰性對照的比例（S/N）來確定豬偽狂犬病病毒抗體的有無。如果S/N值≤0.6，樣品判為PRV gE抗體陽性；如果S/N值>0.6但≤0.7，樣品應重新測定；如果S/N值>0.7，樣品判為PRV gE抗體陰性。

2 結果

2010-2012年共檢測本地養豬場46個場次，1 899份樣品， 抗體陽性數148份， 抗體陽性率7.79%，其中2010-2012年抗體陽性率分別為9.12%、8.70%、4.38%（表1）。

3 討論

（1）通過此次調查，結果表明涼州區養豬場不同程度的受到豬偽狂犬病毒的感染，涼州區的豬偽狂犬病gE抗體陽性率為7.79%。據調查，涼州區只有部分規模養豬場和種豬場使用豬偽狂犬病毒gE缺失疫苗，但是還有部分豬場豬偽狂犬病毒感染率比較高，建議豬偽狂犬病毒陽性豬場要進行定期監測普查，及時清除野毒感染豬，使豬群逐步得到凈化。

（2）豬免疫偽狂犬病毒gE基因缺失疫苗后，配合使用豬偽狂犬病ELISA gE抗體試劑盒，進行抗體檢測，能夠區分免疫抗體和野毒感染，清除野毒感染的豬，使豬群得到凈化，該方法操作簡單、特異、敏感、快速、準確，在凈化豬偽狂犬病中起到了很重要的作用。

（3）豬感染偽狂犬病后主要表現為母豬繁殖障礙和呼吸系統疾病綜合征（PRDC），給豬場造成很大的損失，凈化該病以后母豬繁殖障礙和呼吸系統疾病綜合征能夠得到很好的改善，顯著提高生產效益。

參考文獻：

[1] 費恩閣，李德昌，丁 壯，等.動物疫病學[M].北京：中國農業出版社，2004.205-209.

[2] 殷 震，劉景華.動物病毒學，[M].第2版.北京： 北京科學出版社，1997.998-1009.

[3] 王金花，丁秀丹，武 彤.豬偽狂犬病的新特點及免疫凈化措施[J].養殖技術顧問，2009，10：124-124.

[4] 王科文，楊漢春.我國重點養豬區域偽狂犬病野毒感染血清學調查報告[J]，養豬，2010（02）：45-47.