摘 要:作為生物醫藥研究的重要技術之一,細胞融合技術能夠創建出具有親本優良性狀的生物制品,對于醫藥效益水平的提高,具有很大的促進作用,同時也是生物醫藥產業化的技術動力之一。本章將在對細胞融合技術進行闡述的基礎上,對細胞融合技術在生物醫藥中的應用,展開深入的分析和探討。
關鍵詞:細胞融合;生物醫藥;技術應用
1 細胞融合技術
細胞融合技術,也稱之為原生質體融合技術,這種技術能夠讓兩個以上的細胞互相融合,并形成雙核細胞或者多核細胞,使得細胞的DNA和核外基因等融入到另外一個細胞當中,屬于遺傳物質轉化的重要手段。這種技術具有以下方面的技術特征:
(1)遺傳標記的篩選。這是細胞融合技術的關鍵所在,通常有三種篩選方法,第一種是營養缺陷型標記,能夠有效互補細胞之間的營養缺陷,使得融合后的細胞能夠恢復生長,主要被應用于選擇性分離雜種細胞當中,不利于降低菌體的活力,而且不具備較高的再生率。第二種是抗藥性標記,結不同菌種對藥物抗性的差異性特征,掌握好藥物的濃度,主要用于林可霉素產生菌的定向改造篩選工作當中。第三種是綜合型的方法,譬如將營養缺陷型與抗藥性方法結合起來。
(2)原生體制的制備和再生。不同結構的細胞壁,菌體的處理方式是不一樣的,關于細菌和放線菌等原生質體的制備,可以采用溶菌酶進行處理,對于酵母、大型真菌等細胞壁更加復雜的菌體,需要采用蝸牛酶和纖維素酶等復合酶進行處理,而不同的培養方法、酶濃度、酶處理溫度、PH值等,對原生質體的再生條件具有差別性的影響。……