液相色譜法分析茶葉中咖啡因的含量

摘 要：文章采用高效液相色譜法分別測定云霧綠茶、碧螺春、黃山毛峰、六安瓜片、信陽毛尖、鐵觀音茶葉中咖啡因含量的方法，根據咖啡因易溶于二氯甲烷的性質，用二氯甲烷作為提取劑，方法采用ZORBAX Eclipse pius C18柱，以CH3OH-H2O（50：50）溶液做流動相，紫外檢測波長為230nm該條件下咖啡因保留時間為1.252min，經過實驗得出線性回歸方程為：y=5335.57746x+9.7548534，相關系數r=0.99955。方法線性良好。結果表明，不同茶葉中咖啡因的含量也不同，本方法簡便、準確，適合茶葉提取物中咖啡因含量的分析。

關鍵詞：液相色譜法；咖啡因；茶葉

引言

咖啡因屬于甲基黃嘌呤的生物堿，純的咖啡因因無臭，是白色的，強烈苦味的針狀或粉狀物[1]。化學名是1，3，7-三甲基黃嘌呤。咖啡因是茶葉、咖啡豆、可可、可拉果等植物體中的主要生物堿，具有較強的興奮中樞系統作用而廣泛用于醫藥、食品、化妝品等領域。茶葉是一個咖啡因的重要來源，每杯茶的咖啡因含量與制茶工藝有關，特定品種的茶，例如紅茶和烏龍茶，比其它茶的咖啡因含量高。茶含有少量的可可堿以及比咖啡因略高的茶堿。茶的制作對于茶有很大的影響，但是茶的顏色幾乎不可能指示咖啡因的含量。日本綠茶的咖啡因含量就遠遠低于紅茶（例如正山小種茶），幾乎不含咖啡因。

提取咖啡因的方法：包括索氏提取法、超臨界提取法，升華法等。升華法只能用于純化在不太高的溫度下，有足夠的蒸汽壓的固態物質，因此，有一定的局限性。在超臨界狀態下，超臨界流體具有很好的流動性和滲透性，但是實驗儀器太昂貴。索氏提取是利用回來和虹吸原理，使固體物質連續不斷地為純溶劑所萃取的儀器溶劑沸騰時，其蒸氣通過側管上升，被冷凝管冷凝成液體，滴入套筒中，浸潤固體物質，使之溶于溶劑中，當套筒內溶劑液面超過虹吸管的最高處時，既發生虹吸流入燒瓶，通過反復的回流和虹吸從而達到多次萃取，達到了減少溶劑用量降低成本的目的。該方法操作簡便、易掌握， 成本低廉、容易推廣。所以本文采用索氏提取法來提取咖啡因。

檢測咖啡常見監測方法有，液相色譜法，氣相色譜法，薄層層析法等。液相色譜法分離效率高，選擇性好，檢測靈敏度高，操作自動化，應用范圍廣。與氣相色譜法相比具有，不受試樣的揮發性和熱穩定性限制，應用范圍廣等優點，因此本文采用高效液相色譜法。

3 討論

實驗發現咖啡因在230nm處有最大吸收，故選擇230nm為檢測波長，通過實驗測得不同茶葉中咖啡因的含量不相同，有較大的差異。只要索氏提取器的操作方法正確，就可以準確的提取茶葉中咖啡因用。高效液相色譜法提取茶葉咖啡因的含量，色譜分離和線性關系良好，可推廣應用。

4 結束語

綜合實驗結果，采用安捷倫1260高效液相色譜儀配合ZORBAX Eclipse pius C18色譜柱測定茶葉中的咖啡因，分離效果好、出峰速度快，且方法操作簡便、靈敏度高、精密度和準確度良好，能夠滿足產品中咖啡因含量分析的要求，該方法值得作為各類實驗室、檢測部門推廣應用。從實際檢測的結果來看，不同種類茶葉中咖啡因含量差異較大，希望茶葉生產商能將茶葉咖啡因含量標注于包裝外，以便顧客根據自己身體情況進行選擇。

參考文獻

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