HPLC法測定糖液中5—羥甲基糠醛含量

摘要：采用高效液相色譜法對糖液中5-羥甲基糠醛含量進行了檢測，色譜柱為Agilent XDB C18 150×4.6mm，流動相：乙腈-水（20∶80），流速：1.0ml/min，檢測波長：230nm，在0.01mg/ml～0.20mg/ml范圍內，5-羥甲基糠醛峰呈良好的線性關系，相關系數r=0.9986。

關鍵詞：糖液；5-羥甲基糖醛；HPLC

5-羥甲基糠醛是葡萄糖或果糖在高溫條件下經脫水反應生成的有害物質，《中國藥典》（2010年版）葡萄糖注射液質量標準中，將其做為雜質項進行監控，采用分光光度法測定葡萄糖注射液中5-羥甲基糠醛的含量。馮紅偉也用紫外分光光度法測定了5-羥甲基糠醛[1]，本文在吳黎明等[2，3，4]的研究基礎上，摸索了以乙腈-水溶液作為流動相，測定了糖液中5-羥甲基糠醛，方法更為簡便、快速。

1 儀器與試藥

Agilent 1200 高效液相色譜儀；乙腈為色譜純；5-羥甲基糠醛對照（99.5%， Aladdin 工業公司）

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent XDB C18 150×4.6mm；流動相：乙腈-水（20∶80），流速：1.0ml/min；柱溫：室溫；檢測波長：230nm，進樣量：20ul。圖譜見圖1。

圖1 5-羥甲基糠醛對照圖譜

2.2 線性與范圍

精密稱取5-羥甲基糠醛對照0.0405g，置200.0ml容量瓶中，加純化水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為標準溶液。分別精密移取該溶液0.5、1、2、4、8ml置10.0ml容量瓶中，加純化水稀釋至刻度，搖勻。取20μl注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積為縱坐標，以濃度為橫坐標，進行線性回歸，結果顯示濃度在0.01mg/ml～0.20mg/ml范圍內呈良好的線性關系。回歸方法為：y=2359x-8.8，相關系數為0.9986。

2.3 精密度試驗

精密稱取5-羥甲基糠醛對照0.0405g，置200.0ml容量瓶中，加純化水溶解并稀釋至刻度，搖勻。用微孔濾膜過濾，取濾液20μl進樣6次，峰面積RSD為0.37%。

2.4 回收率試驗

分別精密移取自制糖液（批號：130315）2ml、4ml、6ml，置10ml容量瓶中，每個濃度3份。分別加入標準溶液1.0ml，用純化水稀釋至刻度。取20μl注入液相色譜儀進行測定，計算回收率。結果見表1：

2.5 樣品測定

精密移取自制糖液（批號：130315、130316、130317）2.0ml，置10.0ml容量瓶中，搖勻，微孔濾膜過濾，取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算5-羥甲基糠醛含量。測定結果見表2：

表2 樣品測定結果

3 結束語

采用分光光度法測定糖液中5-羥甲基糠醛，會受到有紫外吸收物質的干擾。本法采用高效液相色譜法對糖液中5-羥甲基糠醛含量進行檢測，采用C18柱，乙腈水溶液做流動相，操作簡單、快速，是一種有效測定糖液中5-羥甲基糠醛的方法。

參考文獻

[1]馮紅偉.紫外分光光度法測定糖密中5-羥甲基糠醛含量[J].食品工業科技，2010年第03期，365-367.

[2]吳黎明.高效液相色譜法測定蜂王漿中羥甲基糠醛含量[J].食品科學，2008，Vol.29，No.03.

[3]孔祥紅.高效液相色譜法測定濃縮果汁及水果果糖中5-羥甲基糠醛[J].食品工業科技，2012年第23期，314-315.

[4]陳磊.高效液相色譜法測定黃酒中的5-羥甲基糠醛[J].食品科學，2009，Vol.30，No.24.369-371.

作者簡介：靳艷仿（1974-），女，漢族，執業藥師，主要從事藥業研發和質量管理工作。