梵凈山3種茶葉茶多糖的含量比較分析

摘 要：采用乙醇提取法分別對(duì)梵凈山綠茶、石阡苔茶和梵凈山翠峰中的茶多糖進(jìn)行提取，用蒽酮-硫酸比色法測(cè)定茶多糖的含量。結(jié)果表明：3種茶葉的多糖含量依次為：梵凈山綠茶為4.99%，石阡苔茶為5.40%，梵凈山翠峰為9.03%。由此可知，茶多糖的含量與其品種及產(chǎn)地有密切關(guān)系。

關(guān)鍵詞：茶多糖；含量；比較分析；蒽酮-硫酸法

中圖分類號(hào) S571.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2013）20-23-02

茶葉作為世界三大傳統(tǒng)飲料之一，因具有多種營(yíng)養(yǎng)、保健功能而倍受消費(fèi)者歡迎[1]。茶葉中含有多種藥理成分，如生物堿、蛋白質(zhì)、芳香物質(zhì)、果膠質(zhì)、糖類和多酚類等化合物。茶多糖（Tea Polysaccharide，TPS）是一種類似靈芝多糖和人參多糖的高分子化合物，具有很多功能，是重要的生理活性物質(zhì)。其杰出功效是降血糖、降血脂，從而達(dá)到防治糖尿病的作用，除此之外，還具有抗凝血、降血栓、防輻射等作用[2-7]。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)茶多糖的提取、分離、純化工藝進(jìn)行了較為深入的研究[8]，而對(duì)梵凈山茶葉中的茶多糖研究則未見(jiàn)報(bào)道。因此，筆者對(duì)梵凈山3種茶葉的茶多糖含量進(jìn)行分析，以期對(duì)開(kāi)展茶葉的綜合利用提供參考，為進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用本地茶葉及后續(xù)研究提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 梵凈山綠茶、石阡苔茶、梵凈山翠峰，專賣店購(gòu)買，預(yù)處理保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試劑 95%乙醇，天津市富宇精細(xì)化工有限公司；無(wú)水乙醇，天津市富宇精細(xì)化工有限公司；氫氧化鈉固體，天津市大茂化學(xué)試劑廠；蒽酮，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；葡萄糖，天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司；鹽酸，遵義師范學(xué)院化學(xué)試劑廠；濃硫酸，遵義師范學(xué)院化工試劑廠。以上試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。水為二重蒸餾水。

1.3 儀器 101-3型電熱鼓風(fēng)干燥箱，北京科偉永興儀器有限公司；SHZ-D（Ⅲ）型循環(huán)水式真空泵，鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司；T6新世紀(jì)型紫外分光光度計(jì)，北京普析通用儀器有限責(zé)任公司；MM823EC8-PS（X）型美的微波爐，佛山市順德區(qū)美的微波電器制造有限公司；80-2型離心沉淀機(jī)，江蘇金壇市中大儀器廠；AR124CN型電子天平，奧豪斯儀器上海有限公司。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法[9-12]

1.4.1 材料預(yù)處理 用乙酸乙酯浸泡茶葉3.5h后，再用無(wú)水乙醇清洗2次，烘干至恒重。乙酸乙酯（mL）：茶葉（g）=6：1。

1.4.2 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線制作[13] 準(zhǔn)確稱取0.1g葡萄糖（分析純），溶解并用蒸餾水定容至1 000mL后，分別吸0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2配制成濃度為0.02、0.04、0.06、0.08、0.10、0.12mg/mL，各取2mL于試管中，再加入4mL的蒽酮試劑，迅速浸入冰水中冷卻，待幾支試管均勻加完后一起浸入沸水浴中，準(zhǔn)確保溫10min后取出冷卻，以空白管作對(duì)照，在波長(zhǎng)620nm處測(cè)定吸光度。

1.4.3 配制蒽酮-硫酸試液 精密稱取0.165g蒽酮，加50mL濃硫酸，置于棕色瓶中，混合搖勻置于冰箱中（現(xiàn)配現(xiàn)用）。

1.5 測(cè)定樣品中茶多糖含量[14]

1.5.1 茶多糖的提取 預(yù)處理后的茶葉→粉碎→過(guò)60目篩→加入浸提劑→微波輔助提取→離心取上清液→Sevage法脫蛋白→離心→活性炭脫色→濃縮→加乙醇沉淀24h→離心取沉淀→乙醇洗滌→定容顯色→測(cè)吸光值→計(jì)算多糖提取率。

1.5.2 茶多糖的含量測(cè)定 精密吸取所得樣品溶液1mL于具塞試管中，按繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法測(cè)定吸光度（A），由回歸方程計(jì)算出樣品中茶多糖的含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線 以吸光度（A）為縱坐標(biāo)，葡萄糖濃度（C）為橫坐標(biāo)，得標(biāo)準(zhǔn)曲線（圖1）。

由此可以得出多糖提取率的計(jì)算公式：提取率（%）=[（A-0.004）∕8.178×V∕M∕1 000]×100。式中：A為吸光度；M為稱取茶的質(zhì)量（g）；V為浸提液體積（mL）。

2.2 3種茶葉中茶多糖的含量 梵凈山中的茶葉多糖含量在4.99%～9.03%，3種茶葉中梵凈山翠峰茶多糖含量最高（9.03%），其次是石阡苔茶（5.40%），再次是梵凈山綠茶（4.99%），由于它們的生境不同，因此茶多糖含量有一定差異。

3 結(jié)果與討論

采用乙醇提取法對(duì)梵凈山3種茶葉茶多糖在微波作用下進(jìn)行提取，蒽酮-硫酸比色法進(jìn)行比色，通過(guò)葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算茶多糖含量，此法操作簡(jiǎn)便。研究結(jié)果表明：茶多糖含量最高為梵凈山翠峰（9.03%），其次為石阡苔茶（5.40%），再次為梵凈山綠茶（4.99%）。

茶葉中茶多糖的含量與許多因素有關(guān)，一般認(rèn)為，不同種類和產(chǎn)地茶葉中的茶多糖含量有所不同。余正文等[15]對(duì)貴州十大名茶遵義毛峰、湄江翠片、都勻毛尖、雀舌報(bào)春、湄潭翠芽、東坡毛尖、貴定雪芽、富硒綠茶、瀑布毛峰、羊艾毛峰的多糖含量進(jìn)行了研究，結(jié)果表明：茶多糖的含量與其品種及產(chǎn)地有密切關(guān)系。此外，加工方法對(duì)茶葉中多糖含量也產(chǎn)生較大影響。

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（責(zé)編：徐世紅）