初均速法預測巖白菜醇提液的穩定性研究

摘要：目的：用化學動力學方法預測巖白菜醇提液的穩定性，為其質量評價提供依據。方法：選擇9個溫度進行恒溫加速實驗，用紫外-可見分光光度法測定巖白菜素類的含量，計算巖白菜醇提液的室溫貯存期和降解反應的活化能。結果：進行回歸分析得出室溫下巖白菜醇提液的貯存期是20d，降解反應的活化能是8715kJ·mol-1。結論：巖白菜醇提液是巖白菜類藥物的中間產物，不可久貯且貯放溫度不宜高，以保證藥物質量。

關鍵詞：初均速法；巖白菜；巖白菜素；穩定性

中圖分類號：R284文獻標識碼：A

文章編號：1007-2349（2013）02-0047-02

巖白菜為虎耳草科巖白菜屬植物巖白菜Bergenia purpurascens（Hookfet Thoms）Engl的干燥根莖，又名滇巖白菜、巖七等，主要分布于滇西北、滇中，四川西部、西藏東南部也有分布。巖白菜有鎮咳祛痰功效，主要用于慢性支氣管炎的治療，此外，還具有良好的抗炎、抗心律失常、抗病毒、護肝作用等[1]，已制成多種劑型上市。

巖白菜主要有效成分巖白菜素屬于異香豆精類化合物[2]，分子結構中含有二個酚羥基和一個內酯結構，易氧化變質或開環水解，給制劑生產過程帶來一定的難度，甚至影響產品的質量和療效。本文采用初均速法，研究不同溫度下巖白菜醇提液中巖白菜素類的含量變化，并根據回歸方程計算了巖白菜醇提液的室溫貯存期和降解反應的活化能。

1材料與儀器

巖白菜藥材購于昆明菊花村藥材市場，經云南中醫學院楊樹德教授鑒定為虎耳草科巖白菜屬植物巖白菜Bergenia purpurascens（Hookfet Thoms）Engl的干燥根莖。巖白菜素對照品購于中國藥品生物制品檢定所。

所用試劑均為分析純。

UV-2450紫外-可見分光光度計（日本島津），D-101大孔吸附樹脂（天津農藥股份有限公司樹脂分公司），SYP型玻璃恒溫水浴（南京桑力電子設備廠），BUCHI-R-200旋轉蒸發儀（瑞士）。

2方法與結果

21對照品溶液的制備精密稱取巖白菜素對照品31 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇溶解，并定容至刻度，即得6200 μg/mL的巖白菜素對照品溶液。

22供試品溶液的制備[3]待測液用大孔吸附樹脂吸附30 min，分別用去離子水和20%乙醇洗脫，精密吸取乙醇洗脫液適量置10 mL量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，即得。

23線性范圍考察精密吸取巖白菜素對照品溶液（6200μg/mL）13、22、31、40、49mL置10mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，以甲醇為空白對照，在274nm處測定吸光度[4]，以吸光度A為縱坐標，濃度c為橫坐標進行線性回歸分析，得出標準曲線方程為A=002347c+000534，相關系數r=099992，表明巖白菜素對照品在806～3038 μg/mL濃度范圍內線性關系良好。

24精密度試驗取同一濃度巖白菜素對照品溶液連續測定5次，結果RSD=020%，表明儀器精密度良好。

25穩定性試驗取同一供試品溶液在0、30 min、1、2、4 h時測定，結果RSD為117%，表明供試品溶液在4h內穩定。

26樣品含量測定

261巖白菜醇提液的制備取巖白菜粗粉適量，精密稱定，加10倍50%乙醇回流提取3次，每次30 min，合并濾液，減壓濃縮至乙醇回收完全，定容后即得。

262恒溫加速實驗及含量測定精密吸取巖白菜醇提液適量，分別置于不同溫度的恒溫水浴中密閉加熱，按表1進行實驗。定時取樣，取出后迅速冷卻，按22項下方法制備供試品溶液并在（275±1）nm的波長處測定吸光度，計算含量，結果見表1。實驗設置3個平行組。

表1恒溫加速實驗

27數據處理反應初均速是反應開始時的平均速度，即反應開始時單位時間內藥物濃度的變化。溫度對反應初均速的[FL）][SD1，1][FQ（19。175mm，X，DY-W][SQ+1mm][CD=175mm][FL（K8mm]影響符合Arrhenius指數規律，將此直線外推至室溫，則可求得室溫貯存期[5]。

初均速v0=[SX（]c0-ci[]ti[SX）]，式中c0=2312μg/mL，ci為ti時間對應的濃度，計算結果見表1。以lnv0-1/T進行線性回歸，得回歸方程

lnv0=-10482[SX（]1[]T[SX）]+29934（r=-09927）

計算活化能：E=-8314×（-10482）×10-3=8715kJ·mol-1

推算室溫（29815K）貯存期（分解10%的時間）：

ln[SX（]01c0[]τ09[SX）]=-10482[SX（]1[]29815[SX）]+29934

計算得：τ09=4288h=20d

3小結與討論

用初均速法預測巖白菜醇提液的穩定性，數據處理結果線性關系良好，得出的活化能8715 kJ·mol-1與中藥典型活化能文獻值836 kJ·mol-1接近；推算出室溫下巖白菜醇提液的貯存期是20 d，提示巖白菜醇提液不可長時間貯存，貯放應盡可能在較低溫度下進行。

影響中成藥產品質量的主要因素有藥材的質量、生產工藝以及有效成分的穩定性，巖白菜制劑在生產工藝中常采用醇提制膏而成，生產中得到的醇提液應盡快制成最終產品，避免巖白菜素在醇提液中分解，以保證藥品質量。[KH*1D]

參考文獻：

[1]王剛，麻兵繼巖白菜素的研究概況[J].安徽中醫學院學報，2002，21（6）：59～62

[2]云南省藥物研究所云南重要天然藥物[M].昆明：云南科技出版社，2006：276～283

[3]劉海周，孫海林，李文軍，等巖白菜中巖白菜素的純化及提取工藝研究[J].云南中醫學院學報，2011，34（2）：22～25

[4]國家藥典委員會中華人民共和國藥典[S]（一部）北京：中國醫藥科技出版社，2010：384

[5]龐貽慧，魯純素藥物穩定性預測方法[M].北京：人民衛生出版社，1984：76～80[JX*1]