摘要:目的:對保山市不同產地種植的菘藍藥材進行鑒定及檢驗,分析對比不同產地菘藍的質量差別,為建立中藥材種植基地提供數據支持。方法:根據《中國藥典》2010版一部對樣品進行性狀、鑒別、檢查、含量等檢驗,確定藥材質量。結果:樣品各項指標均符合《中國藥典》的規定。結論:保山本地種植的菘藍藥材符合《中國藥典》的各項規定,可以在不同區域大量種植,增加農民收入。
關鍵詞:菘藍;板藍根;大青葉;質量評價
中圖分類號:R282.6文獻標識碼:A
文章編號:1007-2349(2013)01-0056-03
根據保山市“十二五”生物產業發展規劃的布署,2009年8月~2012年8月保山市食品藥品檢驗所要承擔建立“保山市種植(養殖)中藥材質量信息庫”的任務,負責收集區域內種植的中藥材原植物標本和藥材標本,并提供基源鑒定報告和藥材樣品質量檢驗報告。目前已成規?;N植的藥材很多,其中在保山瓦房、楊柳、水寨、蒲縹等地廣泛種植菘藍約480多畝。菘藍(Isatis indigotica Fort.)為十字花科植物,它的根為板藍根(Isatidis Radix),葉為大青葉(Isatidis Folium),均可藥用或制成制劑使用,收載于《中國藥典》(2010年版)一部。其味苦,性寒,具有清熱解毒、涼血消斑、利咽的功效,臨床上常用于治療流行性感冒、溫毒發斑、丹毒、癰腫等病癥[1]?,F代藥理研究表明該藥具有抗腫瘤、抗菌、抗病毒等藥理作用,其中靛藍、靛玉紅為其主要的化學成分[2~4]。由于菘藍適應性較強,對環境和土壤要求不嚴,喜溫暖環境,本市大部分屬溫帶,自然環境適宜其生長。但不同產地環境差異較大,可能導致藥材品質參差不齊。因此科學的綜合評價菘藍的質量具有十分重要的意義,本實驗按照《中國藥典》(2010年版)一部對菘藍藥材進行各項指標的檢驗和質量分析,為我市大面積種植該藥材提供科學的依據。
1儀器與試藥
1.1儀器Agilent 1200 高效液相色譜儀(四元泵帶真空脫氣機G1311A、自動進樣器G1329A、柱溫箱G1316A、紫外檢測器G1315D、儀器控制及數據處理Agilent Chemstation);Sartorius cp225D電子分析天平;電熱恒溫水浴鍋(北京市永光明醫療儀器廠);高速萬能粉碎機(北京中興偉業儀器有限公司制造);101-1型電熱鼓風干燥箱(上海實驗儀器廠);SX2-2.5-10箱式電阻爐(北京市永光明醫療儀器廠);ZF-2型三用紫外儀(上海市安亭電子儀器廠)。
1.2對照品靛藍(批號:716-8802);靛玉紅(批號:0717-200003);精氨酸(批號:872-200204);(R,S)—吿依春(批號:111753-201103,以99.5%計);板藍根對照藥材(批號:121177-200302)。均由中國藥品生物制品檢定研究院提供。
1.3樣品板藍根藥材(樣品1~4號,依次來源于水寨海棠洼、蒲漂永興寨、瓦房鄉、楊柳娘咱),大青葉藥材(樣品5~8號,依次來源于水寨海棠洼、蒲漂永興寨、瓦房鄉、水寨鄉)。經任仁安等鑒定[5~7]為:板藍根為十字花科植物菘藍(Isatis indigotica Fort.)的干燥根,大青葉為其干燥葉。
1.4試劑硅膠G板和GF254板(青島海洋化工廠分廠,批號20111208,20071210)。高效液相用甲醇為色譜醇,水為去離子水,其它試劑為分析純。
2方法與結果
2.1板藍根的薄層鑒別
2.1.1分別取樣品1~4號(板藍根)粉末0.5 g,加稀乙醇20 mL,超聲處理20 min,濾過,濾液蒸干,殘渣加稀乙醇1 mL使溶解,作為供試品溶液。另取板藍根對照藥材0.5 g,同法制成對照藥材溶液。再取精氨酸對照品,加稀乙醇制成每1 mL含0.5mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(藥典一部附錄VI B)試驗,吸取上述6種溶液各2 μL,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正丁醇-冰醋酸-水(19:5:5)為展開劑,展開,取出,熱風吹干,噴以茚三酮試液,在105℃加熱至斑點顯色清晰。結果見圖1。
2.1.2分別取樣品1~4號(板藍根)粉末1 g,加80%甲醇20 mL,超聲處理30 min,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇1 mL使溶解,作為供試品溶液。另取板藍根對照藥材1 g,同法制成對照藥材溶液。再取(R,S)—吿依春對照品,加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(藥典一部附錄VI B)試驗,吸取上述6種溶液各5 μL,分別點于同一硅膠GF254薄層板上,以石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯(1:1)為展開劑,展開,取出,晾干,置紫外光燈(254nm)下檢視。結果見圖2。
1為板藍根對照藥材,2為(R,S)—吿依春對照品,3~6為樣品
2.2大青葉的薄層鑒別分別取樣品5~8號(大青葉)粉末0.5 g,加三氯甲烷20 mL,加熱回流1 h,濾過,濾液濃縮至1 mL,作為供試品溶液。另取靛藍對照品、靛玉紅對照品,加三氯甲烷制成每1 mL各含1 mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(藥典一部附錄VI B)試驗,吸取上述6種溶液各5 μL,分別點于同一硅膠G薄層板上,以環己烷-三氯甲烷-丙酮(5:4:2)為展開劑,展開,取出,晾干,觀察顯色結果。結果見圖3。
1為靛藍對照品,2為靛玉紅對照品,3~6為樣品
2.3板藍根、大青葉的檢查按水分測定法(藥典一部附錄IX H第一法)分別對1~8號樣品進行水分檢查,結果見表1。按灰分測定法(藥典一部附錄IX K)分別對1~4號樣品進行總灰分、酸不溶性灰分檢查,結果見表2。
2.4板藍根、大青葉浸出物測定按醇溶性浸出物測定法(藥典一部附錄X A)項下的熱浸法分別對樣品進行測定,1~4號樣品(板藍根)用45%乙醇作溶劑,5~8號樣品(大青葉)用乙醇作溶劑。結果見表3。
2.4板藍根的含量測定[1,8~9]按中國藥典(2010年版一部)用高效液相色譜法,分別對1~4號樣品進行含量測定。色譜條件:色譜柱:Zorbax XDB C18,4.6 mm×150 mm,5 μm(993967-902);柱溫;25℃;流動相:甲醇-0.02%磷酸溶液(7:93);檢測波長:245 nm;流速:1.0 mL/min;進樣體積:10 μL。理論塔板數按(R,S)—吿依春峰計算為5369。測定結果見表4。
2.5大青葉的含量測定[1,8~9]按中國藥典(2010年版一部)用高效液相色譜法,分別對5~8號樣品進行含量測定。色譜條件:色譜柱:Zorbax Extend C18,4.6 mm×150 mm,5 μm(773450-902);柱溫:25℃;流動相:甲醇-水(75:25);檢測波長:289 nm;流速:1.0 mL/min;進樣體積:20 μL。 理論塔板數按靛玉紅峰計算為5770。大青葉測定色譜條件:色譜柱測定結果見表5。
表5大青葉含量測定結果
樣品號1靛玉紅含量(%)510.035610.098710.032810.103藥典規定:按干燥品計,大青葉中靛玉紅(C16H10N2O2)的含量不得少于0.020%,結果表明,樣品中靛玉紅含量均符合規定。
3討論
本次試驗按照中國藥典(2010年版)一部對板藍根、大青葉的各項指標進行質量測定,根據檢驗結果進行質量分析研究,雖然含量有高低,但結果8批樣品均符合《中國藥典》2010年版一部的規定。
通過上述實驗,為保山本地種植菘藍提供了數據支持,為其擴大種植規模及產業化發展提供依據,提高農民收入,服務地方經濟,為社會主義新農村建設做出一定貢獻。
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(收稿日期:2012-11-19)