1，6-二磷酸果糖對(duì)小鼠阿霉素急性心肌損傷防治作用的研究

張泉麗 陳乃耀

1.長(zhǎng)春市兒童醫(yī)院，吉林長(zhǎng)春 130051；2.華北煤炭醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院，河北唐山 063000

阿霉素（Adriamycin，ADR）是一種強(qiáng)效、廣譜的蒽環(huán)類(lèi)抗腫瘤藥物，其嚴(yán)重的急、慢性心肌毒性限制了在臨床上的廣泛應(yīng)用[1-2]。 1，6-二磷酸果糖（fructose 1,6 diphosphate, FDP）作為糖分解代謝的中間產(chǎn)物，不僅具有調(diào)節(jié)代謝、改善紅細(xì)胞變形的能力和穩(wěn)定細(xì)胞膜、溶酶體膜等的作用，還能抑制粒細(xì)胞氧自由基的生成[3]。為了探索阿霉素（ADR）急性心肌損傷和1，6-二磷酸果糖（FDP）對(duì)該損傷防治作用的可能機(jī)制，該文就是通過(guò)小鼠ADR急性心肌損傷實(shí)驗(yàn)， 研究ADR 急性心肌損傷的機(jī)制和FDP 對(duì)ADR 急性心肌損傷的防治作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

將健康的昆明小鼠48 只，體重（28±2.0）g，隨機(jī)分成3 組，每組16 只， 雌雄各半。 FDP 組于實(shí)驗(yàn)第1 天腹腔注射ADR（30 mg/kg），第1、3、5 天腹腔注射FDP（1 100 mg/kg），F(xiàn)DP 在第1 天于注射ADR 前20 min 使用；ADR 組于實(shí)驗(yàn)第1 天一次性腹腔注射ADR（30 mg/kg），并分別于第1、3、5 天腹腔注射與FDP 等量的生理鹽水 （NS）；NS 組于實(shí)驗(yàn)第1、3、5 天腹腔注射與ADR及FDP 等量的NS。 所有動(dòng)物均在實(shí)驗(yàn)第6 天處死。

1.2 標(biāo)本采集與處理

第6 天實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，將各組動(dòng)物處死，剖開(kāi)腹腔，取心臟組織剪碎，去除結(jié)締組織，在冰鹽水中漂洗后，濾紙吸干水分，迅速稱(chēng)重，置于-192 ℃液氮凍存。 臨用前配制成10%組織勻漿。

1.3 觀測(cè)指標(biāo)

各組動(dòng)物死亡率。 各組動(dòng)物心肌組織勻漿中MDA 與GSH含量，用試劑盒測(cè)定，購(gòu)自南京建成生物研究所。

2 結(jié)果

2.1 死亡情況

NS 組小鼠無(wú)一只死亡，和NS 組比，ADR 組小鼠死亡9 只，死亡率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而FDP 組死亡數(shù)明顯減少，死亡率明顯低于ADR 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見(jiàn)表1。

表1 各組動(dòng)物死亡情況一覽表

2.2 心肌組織勻漿中MDA、GSH 含量

與NS 組比，ADR 組與FDP 組小鼠心肌組織勻漿中MRD 含量均明顯增高， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＜0.01）； 而與ADR 組比，F(xiàn)DP 組小鼠心肌組織勻漿中MDA 含量增高幅度明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。 與NS 組比，ADR 組及GSH 組小鼠心肌組織勻漿中GSH 含量均明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與ADR 組比較，F(xiàn)DP 組小鼠心肌組織勻漿中GSH 含量高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 見(jiàn)表2。

表2 小鼠心肌組織勻漿中MDA、GS H 含量

3 討論

從實(shí)驗(yàn)中可以看到，在小鼠注射ADR 后第2 天，小鼠肌張力即開(kāi)始下降，但FDP 組下降幅度小。 ADR 組與FDP 組體重均較NS 組有明顯下降。 此外ADR 組小鼠在第4 天即出現(xiàn)死亡，第6 天死亡率高達(dá)56.25%，遠(yuǎn)大于FDP 組（18.75%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.05）。可見(jiàn)，F(xiàn)DP 能降低小鼠使用ADR 后的死亡率。此外，各組小鼠包括死亡小鼠解剖均未發(fā)現(xiàn)胸水、腹水及肝脾腫大情況，可推知其死亡并非充血性心衰，而可能與ADR 所致的其它形式的急性心肌損傷有關(guān)。

丙二醛（MDA）是自由基引發(fā)的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)的代謝產(chǎn)物之一， 所以其含量的多少可以反映脂質(zhì)過(guò)氧化程度并間接反映自由基的多少。 因而測(cè)試MDA 的含量常?？煞从硻C(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度，從而間接地反映出細(xì)胞損傷的程度。 谷胱甘肽（GSH）是細(xì)胞合成的抗氧化劑，主要存在于細(xì)胞內(nèi)，是細(xì)胞內(nèi)重要的水溶性抗氧化劑。 它是一種低分子清除劑，可清除單線態(tài)氧（1O2）、H2O2、OH·及脂氫過(guò)氧化物（LOOH）。 該實(shí)驗(yàn)中觀察到ADR 組動(dòng)物心肌組織勻漿中MDA 含量升高，GSH 含量下降，與Jaulka 等[4]報(bào)道一致。 而FDP 組這種變化幅度則較小，且與ADR 組比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P﹤0.01）。 可見(jiàn)ADR 可使心肌組織中脂質(zhì)過(guò)氧化代謝產(chǎn)物增多，抗氧化能力下降，也間接地說(shuō)明ADR 使小鼠心肌組織產(chǎn)生自由基能力增加， 清除自由基能力下降。 加用FDP 則可減少ADR 小鼠心肌組織組織脂質(zhì)過(guò)氧化程度，并增加其抗氧化能力，從而減輕了ADR 對(duì)小鼠心肌組織產(chǎn)生的急性損傷?？梢?jiàn)抗氧自由基損傷很可能是FDP 改善ADR 急性心肌損傷的機(jī)制之一。

綜上所述，認(rèn)為脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)增強(qiáng)、機(jī)體抗氧化能力下降參與了ADR 急性心肌損傷的發(fā)生； 降低脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)程度、提高肌體抗氧化能力，可是FDP 抗氧化損傷的機(jī)制之一。

[1] Severs NJ，Twist VW，Powell T.Acute effects of adriamycin on the macromolecular organization of the cardiac muscle cell plasma membrane[J].Cardioscience 1991,2:35-45.

[2] Lipshultz SE, Colan SD, Gelber RD, et al.Late cardiac effects of doxorubicin therapy for acute lymphoblastic leukaemia in childhood[J].N Engl J Med，1991,324:808-815.

[3] Markov AK, Feletcher JA, Finch CD, et al.Prevention of oxygen radicals -induced myocardial reperfusion injury with fructose -1,6 -diphosphate[J].Clin Res, 1986,34:208.

[4] Deepinder Jaulka,anjay Sarin KD Gill.A possible mechanism for adriamycin induced cardiotoxicity[J].Indian Journal of Experimental Biology,1994,32:146-148.