離子色譜法測定鹽酸貝那普利片的含量

樓超艷 薛 宇 朱 巖 周 丹＊

（浙江大學 理學院，杭州310058）

0 前言

鹽酸貝那普利片是一種常用的抗高血壓藥物，有效成分鹽酸貝那普利是一種不含巰基血管緊張素轉化酶（ACE）抑制劑的前體藥。人體吸收后水解成貝那普利拉而起作用，能抑制血管緊張素轉化酶Ⅰ（ACEⅠ），可用于治療高血壓和充血性心力衰竭［1］。鹽酸 貝 那 普 利 化 學 名 為 （3R）－3－［［（1S）－1－（乙氧羰基）－3－苯基丙基］氨基］－2，3，4，5－四氫－2－氧代－1H－1－苯并氮雜卓－1－乙酸鹽酸鹽，是貝那普利以鹽酸鹽形式存在形成的，屬于有機胺類化合物，易溶于水、甲醇和乙醇。在酸性條件下，鹽酸貝那普利是以陽離子的形式存在的，因此可以采用陽離子交換柱對鹽酸貝那普利進行分離和檢測。2001年，霍文［2］等建立了高效液相測定貝那普利片劑含量的研究分析方法。離子色譜經(jīng)過30多年的發(fā)展，已成為一種比較成熟的色譜分析法，在環(huán)境分析、微電子和電力工業(yè)中的痕量分析、食品檢測、石油化工、生命科學和醫(yī)藥等領域的作用越來越重要，也已經(jīng)有越來越多的離子分析方法錄入到檢測標準中［3－5］。采用離子色譜技術建立了一種檢測鹽酸貝那普利片含量的新方法，方法簡單、靈敏、快速、準確。目前尚未見到離子色譜法分析此藥物的文獻報道。

1 實驗部分

1.1 儀器

ICS－2100型離子色譜儀帶VWD紫外檢測器（戴安公司），Millipore simplicity超純水機，KQ－100DE臺式數(shù)控超聲波清洗器。

1.2 試劑與樣品

鹽酸貝那普利對照品（批號：100768－200501）由中國藥品生物制品檢定所提供。鹽酸貝那普利片為市售藥（生產(chǎn)批號：X1338；每片含貝那普利10mg）。乙腈為色譜純，甲烷磺酸為分析純，實驗用水為二次去離子水（電阻率≥18.2MΩ·cm）。

2 結果與討論

2.1 色譜條件的選擇

色譜條件選擇為色譜柱（4mm×250mm），保護柱（4mm×50mm），淋洗液：甲烷磺酸（6mmol／L）－乙腈（35%），流速：1.0mL／min，柱溫：25℃，進樣量：7μL，紫外檢測波長：215nm。根據(jù)以上設定的色譜條件進行分析，混合對照品溶液ガ和供試品ギ的色譜圖如圖1所示。

圖1 對照品圖譜Ⅰ和供試品圖譜ⅡFigure 1 The IC chromatograms：ガthe chemical reference substance andギthe sample.

2.2 溶液的制備

對照品儲備溶液（1 000mg／L）：準確稱取干燥至恒重的鹽酸貝那普利對照品10.0mg，置于10mL容量瓶中，加入5mL乙腈，超聲20min，使鹽酸貝那普利對照品溶解，并用去離子水稀釋，定容，搖勻，置于4℃冰箱內保存待用。

供試品溶液：取10片鹽酸貝那普利片，研成粉末，準確稱取所研粉末適量（約相當于鹽酸貝那普利3mg），置于100mL容量瓶中，加10mL乙腈，超聲20min使鹽酸貝那普利片粉末溶解，待冷卻至室溫，用去離子水定容，搖勻。

2.3 檢測方法

使用孔徑0.45μm有機濾膜過濾對照品溶液和供試品溶液，然后準確移取7μL進樣。

2.4 線性考察

準確移取對照品儲備溶液適量于10mL容量瓶中，用去離子水稀釋至刻度，搖勻，制備成濃度分別為0.5，1，2，5，25μg／mL的對照品溶液，在上述色譜條件進行分析，記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標（Y），濃度為橫坐標（X）作線性標準曲線，線性回歸方程為Y＝0.482 1 X－0.005線性相關系數(shù)r＝0.999 9。

線性考察實驗結果表明：鹽酸貝那普利在0.5～25μg／mL范圍內有良好的線性關系。

2.5 穩(wěn)定性實驗

取同一批供試品溶液，在上述色譜條件下，分別選取0，1，2，3，6，8，12，24，48h為時間點，進行測定，記錄色譜圖，測得鹽酸貝那普利峰面積的RSD值為1.1%。

穩(wěn)定性實驗結果表明，供試品溶液在配制后48h內穩(wěn)定。

2.6 精密度實驗

取2.4線性項的第三個濃度對照品溶液連續(xù)進樣5次，記錄譜圖，測得鹽酸貝那普利峰面積的RSD值為0.64%。

實驗結果表明，離子色譜法測定鹽酸貝那普利的精密度符合技術要求。

2.7 重復性實驗

取同一批樣品，按2.2.2項方法配制供試品溶液6份，分別進樣7μL，記錄色譜圖，測得鹽酸貝那普利峰面積的RSD分別為1.2%。

重復性實驗結果表明，離子色譜法測定鹽酸貝那普利片的重復性較好，符合技術要求。

2.8 回收率實驗

在供試品中加入適量對照品使其在供試品中分別成低、中、高三個不同的濃度點。色譜測定條件同2.1。加標回收率測定采用外標法，結果見表1。

表1 鹽酸貝那普利片方法回收率（n＝3）Table 1 The methodological recovery tests for the benazepril hydrochloride tablets

2.9 含量測定

供試品溶液配制如2.2，色譜測定條件同2.1，記錄色譜圖，通過所得的線性回歸方程計算樣品中鹽酸貝那普利含量，結果見表2。

表2 鹽酸貝那普利片含量測定結果Table 2 The determination results of the benazepril hydrochloride tablets ／%

3 結語

選擇的低容量的硅膠基質鍵合羧酸基團的中等疏水性的Ion Pac?SCS1陽離子交換柱。經(jīng)比較不同濃度比例的流動相，發(fā)現(xiàn)甲烷磺酸和乙腈濃度增加能減少保留時間，考慮到柱子所能承受pH范圍以及出峰時間及峰形等因素，最后選擇甲烷磺酸（6mmol／L）－乙腈（35%）作為流動相。在 200～400nm范圍內紫外掃描，在215nm和240nm處有最大吸收峰。根據(jù)光譜圖、響應值及雜峰影響，最后選取215nm作為測定波長，得到的色譜圖峰形尖銳，與雜峰分離度好。

采用離子色譜法精確測定了鹽酸貝那普利片的含量，方法簡單，快速，結果準確，可作為鹽酸貝那普利片含量測定方法之一。

［1］Kaiser G.，Ackermann R，Dieterle W，et al.Determination of a new angiotensin converting enzyme inhibitor and its active metabolite in plasma and urine by gas chromatography－mass spectrometry［J］.J Chromatogr，1987，419：123.

［2］霍文，崔立杰.高效液相色譜法測定貝那普利片含量［J］.藥物分析雜志，2001，21（5）：346－348.

［3］張培敏，周淡春，朱巖.離子色譜在制藥分析中的新進展.藥物分析雜志，2007，27（1）：151－155.

［4］張水鋒，陳小珍，張東雷，李紅艷，陳萬勤.離子色譜－電導檢測法測定不同乳制品中硫氰酸鹽［J］.中國無機分析化學，2012，2（3）：60－63.

［5］呂偉德，周丹，朱巖.離子色譜法測定復方卡托普利片中卡托普利和氫氯噻嗪的含量［J］.中國無機分析化學，2012，2（3）：73－75.