老年子宮頸鱗癌患者癌組織中整合素連接激酶和基質金屬蛋白酶-14的表達及意義

周曉寧 (廣州軍區廣州總醫院婦產科，廣東 廣州 510010)

子宮頸鱗癌浸潤和轉移的生物學行為過程涉及多種基因和蛋白表達的異常。整合素連接激酶(ILK)是新發現的基因和相關蛋白產物，參與了生物體內多種信號傳導通路〔1〕。ILK對調節細胞外基質的降解有重要作用〔2〕。基質金屬蛋白酶(MMP)-14作為細胞外基質的強效降解劑，可以溶解基底膜，為腫瘤細胞離開原發灶形成轉移提供了重要前提〔3〕。本實驗關注老年子宮頸鱗癌術后組織ILK和MMP-14的表達與臨床病理特征的關系。

1 材料與方法

1.1 材料 2008年1月至2011年12月我院行子宮頸鱗癌根治術的老年患者97例作為觀察組，標本均經病理醫師明確診斷并依WHO的原則進行分型。年齡60～76(平均66.0)歲，術前均未進行任何放、化療。同時選取子宮脫垂或子宮肌瘤行子宮全切患者的宮頸組織(病理診斷為慢性宮頸炎)60例作為對照組，年齡60～74(平均65.3)歲。兩組一般臨床特征差別無統計學意義。

1.2 ILK和MMP-14蛋白表達的檢測 應用ILK和MMP-14抗體的濃縮液(購自武漢博士德生物技術公司)，并按不同配比進行稀釋后進行預實驗，選擇表達最理想的稀釋度進行正式實驗。實驗均由病理科主管技師集中操作完成，減少人為誤差，嚴格質量控制。

1.3 免疫組化結果的判定方法 ILK陽性染色定位于細胞質和(或)細胞膜之上，MMP-14陽性染色定位于細胞質上，以呈棕黃色的染色為陽性細胞。選擇染色最集中的10個高倍視野，計算陽性細胞占全部計數腫瘤細胞的百分率，以陽性細胞數＞25%為陽性，以陽性細胞數≤25%為陰性。

1.4 統計學方法 應用SAS6.12軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。

2 結果

2.1 兩組ILK和MMP-14蛋白表達的比較 觀察組ILK和MMP-14表達陽性率明顯高于對照組(P＜0.001)，見表1。

2.2 ILK和MMP-14蛋白的表達與子宮頸鱗癌臨床病理特征的關系 觀察組ILK和MMP-14的陽性表達在頸管侵犯、腫瘤最大直徑、FIGO分期及Ki67的表達中差別顯著(P＜0.01)。見表2。

表1 兩組ILK和MMP-14蛋白陽性表達的比較〔n(%)〕

表2 ILK和MMP-14蛋白的陰性表達與子宮頸鱗癌臨床病理特征的關系〔n(%)〕

2.3 觀察組ILK和MMP-14蛋白表達的相關性分析 ILK和MMP-14的表達具有正相關性(r=0.49，P=0.035 9)。

3 討論

ILK是一個具有3個結構單位的Ser/Thr蛋白激酶，在N端具有4個錨蛋白重復序列，接下來是一個磷酸肌醇結合序列，而在C端是整合素結合位點，也是蛋白激酶的結構域〔4，5〕。ILK作為整合素和生長因子受體信號傳導通路中的重要效應產物，通過介導細胞與細胞外基質的信號傳導，調控生長因子整合蛋白介導的信號傳導及WNT等多條經典傳導途徑，有效地調節細胞黏附、生存、移動、運動和侵襲〔6，7〕。MMP-14是膜型MMPs家族的經典成員，不僅降解膠原Ⅲ、膠原Ⅳ的作用強〔8〕，還可以促進腫瘤的血管生成、促進腫瘤細胞增殖。當MMP-14被激活后，引起MMP-2和MMP-9等明膠酶活化，可以放大其對細胞外基質和基底膜的降解作用，使腫瘤細胞容易離開原發灶，引發轉移〔9〕。

本實驗結果顯示ILK和MMP-14在子宮頸鱗癌中的表達明顯高于對照組，提示ILK和MMP-14對促進老年人子宮頸鱗癌的發生及癌變有重要價值。ILK和MMP-14參與腫瘤生長、浸潤及增殖。腫瘤的生長與血管生成密切相關，而ILK和MMP-14均具有激活血管內皮生長因子的作用，因此促進腫瘤生長可能與血管生成有關。Ki67是標記增殖的最重的蛋白，而ILK和MMP-14均與增殖相關，提示ILK和MMP-14促進腫瘤生長可能與促進增殖有關。FIGO分期是臨床常用的分期，對判斷預后和指導治療有重要幫助，本實驗結果也間接提示聯合檢測ILK和MMP-14的表達可能是判斷預后的重要指標，二者可能在腫瘤發生和進展過程中具有協同正向作用，分析認為ILK可能是上游蛋白，當ILK高表達時，引起MMP-14分泌增多。由于惡性腫瘤侵襲和轉移的先決條件是細胞外基質的降解，而細胞外基質是由膠原、蛋白多糖和基底膜構成〔10〕，當ILK促進MMP-14產生增多時，引起基底膜和細胞外基質廣泛溶解，此時腫瘤細胞易向周圍組織浸潤，同時易通過血管和淋巴管壁并進行播散〔11，12〕。

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11 沈劉忠，陳 鑫，張愛平，等.整合素相連激酶和基質金屬蛋白酶9在非小細胞肺癌中的表達及其與預后的關系〔J〕.中國胸心血管外科臨床雜志，2010;17(6):479-82.

12 Zellweger T，Ninck C，Bloch M，et al.Expression patterns of potential therapeutic targets in prostate cancer〔J〕.Int J Cancer，2005;113(4):619-28.