淺談紫穗槐4種提取液對(duì)大皺鰓金龜子的活性分析

高 峰，屈寶林

（陜西省神木縣林業(yè)局，陜西 神木719300）

1 引言

紫穗槐（Amorphafruticosa（L）），是豆科紫穗槐屬的多年生小灌木，原產(chǎn)于北美，自20世紀(jì)30年代傳入我國(guó)，因其易種植、抗逆性強(qiáng)，而且有防風(fēng)固沙、保持水土等功能，被廣泛種植于西北沙漠地區(qū)。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)紫穗槐進(jìn)行了大量的研究，已發(fā)現(xiàn)它的根、干、皮、葉及果實(shí)均能產(chǎn)生和釋放一種抑菌及毒殺昆蟲的次生代謝物質(zhì)［1，2］。

大皺鰓金龜子（Trematodesgrandis），為鞘翅目鰓金龜科，是西北地區(qū)樟子松、長(zhǎng)柄扁桃防護(hù)林的主要食葉害蟲［3］，廣泛分布于毛烏素沙漠。大皺鰓金龜子以成蟲危害幼林，尤其是純?nèi)斯ち治：Ω鼮閲?yán)重，成片樹葉、嫰芽被吃光，使防護(hù)林毀于一旦，環(huán)境更加惡化。本實(shí)驗(yàn)以紫穗槐為材料，利用4種溶劑提取生物活性成分，以大皺鰓金龜子為試蟲，進(jìn)行生物活性研究，為營(yíng)造紫穗槐混交林防治這一沙地害蟲提供新思路。

2 材料和方法

2.1 實(shí)驗(yàn)材料

以紫穗槐鮮葉作為實(shí)驗(yàn)材料，花期采樣，試蟲采自毛烏素沙地公草灣林場(chǎng)，挑取健康一致的成蟲供試。

2.2 有效成分的提取

將采集的紫穗槐葉洗凈，放在40℃恒溫箱進(jìn)行干燥處理。干燥完成后，將其用粉碎機(jī)粉碎成細(xì)粉末狀。用分析天平秤取紫穗槐葉片粉碎物約各100g，共4份，分別加甲醇、乙醇、氯仿、蒸餾水，在室溫條件下密封浸提24h，期間振蕩5次，使其充分浸提，然后過濾，浸提重復(fù)兩次，合并濾液，45℃減壓濃縮至水相，蒸餾水定容至200mL，即濃度為100mg/mL，放4℃冰箱中備用。

2.3 生物活性的測(cè)定

（1）毒力作用測(cè)定。將從野外采集的樟子松芽浸入藥液約1min后迅速取出，晾干后放入墊有濾紙的直徑9cm燒杯中，每個(gè)燒杯內(nèi)置10個(gè)松芽。取已饑餓處理48h的試蟲按隨機(jī)區(qū)組法布置試驗(yàn)，每個(gè)燒杯內(nèi)接入試蟲10只，每組處理100只幼蟲，每天定時(shí)檢查試蟲生長(zhǎng)情況，記錄死亡數(shù)量，連續(xù)統(tǒng)計(jì)7d，并計(jì)算校正死亡率。

（2）觸殺作用測(cè)定。采用蟲體浸漬法，挑選大小一致的成蟲，放入浸蟲器皿中，在藥液中浸3～4s，取出后用吸水紙吸去多余藥液，然后放入鋪有濾紙保濕的直徑為9cm的燒杯中，飼喂新鮮樟子松嫩芽，每個(gè)處理100頭試蟲，重復(fù)3次，對(duì)照用蒸餾水處理，處理后試蟲置于光照培養(yǎng)箱，保持溫度25±1℃、濕度75%～80%、光照L∶D＝14∶10，培養(yǎng)24、48h后記錄死亡數(shù)，計(jì)算死亡率。

3 結(jié)果與分析

3.1 紫穗槐提取液對(duì)大皺鰓金龜子的毒力作用

紫穗槐提取液對(duì)大皺鰓金龜子72h內(nèi)的毒力測(cè)定結(jié)果表明，不同溶劑提取液對(duì)大皺鰓金龜子都有一定的致死率。從表1可知，紫穗槐乙醇提取液大皺鰓金龜子的殺蟲效率明顯高于其他溶劑，在72h的校正死亡率達(dá)92%，氯仿提取液次之，蒸餾水與甲醇提取液毒殺效率最低。

表1 不同溶劑提取物對(duì)大皺鰓金龜子的毒殺作用

3.2 紫穗槐提取液對(duì)大皺鰓金龜子的觸殺活性分析

紫穗槐的4種溶劑提取液對(duì)大皺鰓金龜子的觸殺作用如表2所示，4種提取液均對(duì)大皺鰓金龜子有一定的觸殺活性，但是總體來看活性不高。乙醇提取液對(duì)大皺鰓金龜子觸殺活性相對(duì)較高，濃度為100mg/mL時(shí)，對(duì)大皺鰓金龜子的觸殺率為51%；氯仿提取液的觸殺活性次之，僅41%；蒸餾水和甲醇提取液對(duì)大皺鰓金龜子的觸殺活性最低。

表2 紫穗槐提取液對(duì)大皺鰓金龜子的觸殺活性

4 結(jié)語

植物在長(zhǎng)期自然演變中進(jìn)化出一套適應(yīng)周圍環(huán)境的化學(xué)機(jī)制，不僅可以與鄰近植物競(jìng)爭(zhēng)資源，擴(kuò)大生存空間，還要對(duì)付各種昆蟲、細(xì)菌、真菌和病毒等，作為紫穗槐化學(xué)防御系統(tǒng)的組成部分，灰葉酚、灰葉素、魚藤素、魚藤酮等次生代謝產(chǎn)物起重要作用。這些化學(xué)物質(zhì)，本身殺蟲活性較弱，只有按一定比例配比，即能表現(xiàn)明顯的協(xié)同增效作用，而在不同的溶劑中其毒力也明顯不同［5，6］。

本文通過4種溶劑（甲醇、乙醇、氯仿、蒸餾水）獲得紫穗槐的提取液（濃度100mg/mL），并對(duì)其進(jìn)行毒力測(cè)定分析，結(jié)果表明：紫穗槐4種溶劑提取液對(duì)大皺鰓金龜子均有不同程度的毒殺作用，以乙醇提取液效果最強(qiáng)，氯仿提取液次之，甲醇蒸餾水提取液最差。紫穗槐不同溶劑提取液對(duì)大皺鰓金龜子觸殺作用活性都不高，表明紫穗槐次生代謝物質(zhì)不適合開發(fā)觸殺藥劑；紫穗槐乙醇提取液對(duì)大皺鰓金龜子表現(xiàn)出很強(qiáng)的生物活性，因此，可以對(duì)其進(jìn)行下一步的研究和開發(fā)，將有助于找到防治害蟲的新途徑。

［1］高桂枝，苑姍姍，虞 梅.紫穗槐協(xié)同殺蟲成分分離及其毒力研究［J］.現(xiàn)代農(nóng)藥，2008，7（5）：43～45.

［2］姜 泓，白麗萍.紫穗槐果實(shí)化學(xué)成分［J］.中藥材，2005，28（1）：19～22.

［3］曹艷萍，盧翠英，白根舉.紫穗槐葉殺蟲化學(xué)成分研究［J］.中草藥，2005，36（10）：1468～1469.

［4］屈秋耘，白至誠(chéng)，石得玉，等.紫穗槐葉殺蟲成分研究［J］.西北植物學(xué)報(bào)，1998，18（2）：311～313.

［5］郭忠錄，蔡崇法.紫穗槐莖葉水浸液對(duì)大豆和蠶豆的化感作用［J］.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，29（4）：452～456.

［6］曹艷萍，盧翠英，白根舉.紫穗槐葉中殺蟲化學(xué)成分的分離和結(jié)構(gòu)鑒定［J］.化學(xué)研究與應(yīng)用，2004，16（5）：718～720.

［7］GUO Z L，CAI C F，et al.Nitrogen competition incont our hedgerow systems in subtropical China［J］.Nutrient Cyclin gin Agroecosystems，2008（81）：71～83.