注射用甲磺酸培氟沙星制備工藝

盧 葦 鄒意瓊

（西南藥業(yè)股份有限公司，中國 重慶 400038）

甲磺酸培氟沙星是一種新型喹諾酮類藥物，對腸桿菌科的大部分細菌有良好的抗菌活性，對β－內(nèi)酰胺酶陽性或陰性的流感嗜血菌和黏膜炎莫拉氏菌及一些非典型病原體也均具有較強的殺傷作用。該藥可直接作用于細菌DNA螺旋酶的A亞單位，通過抑制DNA的合成、復制導致其死亡。甲磺酸培氟沙星是一種新型喹諾酮類藥物，對腸桿菌科的大部分細菌有良好的抗菌活性，對β－內(nèi)酰胺酶陽性或陰性的流感嗜血菌和黏膜炎莫拉氏菌及一些非典型病原體也均具有較強的殺傷作用。該藥可直接作用于細菌DNA螺旋酶的A亞單位，通過抑制DNA的合成、復制導致其死亡[1-2]。主要用于敏感菌所致的尿路感染，呼吸道感染，耳、鼻、喉感染，婦科、生殖系統(tǒng)感染，腹部和肝、膽系統(tǒng)感染，骨和關(guān)節(jié)感染等[3-4]。

本文研制注射用甲磺酸培氟沙星，通過正交設計試驗，對其處方進行篩選，并對優(yōu)化處方進行了考察。

1 試驗材料

1.1 藥品與試劑

甲磺酸培氟沙星對照品（由中國藥品生物制品檢定所提供）；注射用甲磺酸培氟沙星（自制）；甲磺酸培氟沙星（湖北省人福藥業(yè)有限責任公司）；甘露醇（山東天力制藥有限公司）；焦亞硫酸鈉（湖南爾康制藥有限公司）；針用活性炭（上海活性炭廠）；醋酸銨（天津市科密歐化學試劑有限公司）；甲醇（阿達瑪斯公司）。

1.2 儀器

高效液相色譜儀（安揭倫科技公司）、pH計（上海雷磁儀器廠）、紫外分光光度計（安揭倫科技公司）、不溶性微粒檢測儀（北京東方森聯(lián)自動化技術(shù)有限公司）、澄明度檢測儀（天津大學精密儀器廠）和電子天平（梅特勒公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 注射用甲磺酸培氟沙星的制備

在配制鍋中加入配置總量80%的注射用水，將甘露醇和抗氧劑溶解后，再加入甲磺酸培氟沙星攪拌溶解，最后加入活性炭，用氫氧化鈉溶液調(diào)pH，最后將藥液稀釋至總量。經(jīng)灌裝，上半塞、冷凍干燥后得注射用甲磺酸培氟沙星成品。

2.2 甲磺酸培氟沙星的含量測定試驗

2.2.1 對照品溶液制備

精密稱取在105C°干燥至恒重的甲磺酸培氟沙星對照品適量，用流動相溶解并制成每1ml中含20μg的溶液，作為對照品溶液。

2.2.2 樣品溶液的制備

精密量取本品適量，用流動相溶解并稀釋成每1ml含培氟沙星15μg的溶液，作為供試品溶液。

2.2.3 色譜條件與系統(tǒng)適應性試驗

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；0.2mol/L醋酸銨－甲醇（72：28，用磷酸調(diào)pH值至3.0）為流動相，流速為每分鐘1ml，檢測波長為276nm，理論板數(shù)按培氟沙星峰計算應不低于2000。

2.2.4 空白輔料的檢測

取本品約12mg（相當于培氟沙星7.5mg）和空白輔料3mg，分別用流動相溶解成50ml，各取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，結(jié)果空白輔料不出色譜峰，即空白輔料不干擾主藥甲磺酸培氟沙星的測定

2.2.5 線性關(guān)系

取在105℃烘至恒重的甲磺酸培氟沙星對照品適量，精密稱定，用流動相溶解并制成每1ml含1mg的溶液，作為貯備液。精密量取貯備液 10ml，用流動相稀釋成 100ml（溶液Ⅰ），另吸取貯備液 1.4、1.6、1.8、2.0、2.2、2.5ml，分置 10ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻；另精密量溶液Ⅰ1、1.6、1.8、2.0、2.2、2.4、3.4、5.0 和 8.0ml， 分置 10ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，分別進樣測定，記錄峰面積，測定結(jié)果見表1。

表1 線性范圍測定結(jié)果

對表中數(shù)據(jù)進行回歸分析， 得線性方程為 A=1.08×108C＋2.20×104，r=0.9999，即濃度在 0.01mg/ml～0.25mg/ml范圍內(nèi)，響應值峰面積與濃度呈良好線性關(guān)系

2.2.6 重復性試驗

取同一批樣品，連續(xù)進樣6次，按照含量測定方法測定，記錄色譜圖，計算響應值峰面積的相對標準偏差，從測定結(jié)果可知，方法重復性良好。測定結(jié)果見表2。

表2 重復性試驗數(shù)據(jù)

2.2.7 精密度試驗

取一批樣品6份，按含量測定方法測定，從測定結(jié)果可知，測定方法的精密度符合要求。其結(jié)果見表3。

表3 精密度試驗結(jié)果

2.2.8 穩(wěn)定性試驗

取含量測定項下的供試品溶液，分別在0小時、1小時、2小時、3小時、4小時、5小時和6小時測定7次，記錄峰面積，測定結(jié)果表明供試品溶液在流動相溶液中6小時內(nèi)較穩(wěn)定。結(jié)果見表4。

表4 穩(wěn)定性試驗數(shù)據(jù)

2.2.9 回收率試驗

按處方量的80%、90%和120%進行回收試驗，取對照品約16mg、20mg和24mg，精密稱定，置100ml量瓶中，分別加入空白輔料6mg，加流動相溶解并稀釋至刻度，再吸取該溶液1.0ml，置10ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻，分別取20μl注入液相色譜儀記錄色譜，按外標法以峰面積計算，結(jié)果見表5。

表5 回收率實驗結(jié)果表

測定結(jié)果表明，方法的平均回收率為99.97%，相對標準偏差為0.47%，能滿足含量測定要求

2.2.10 甲磺酸培氟沙星含量測定法

精密量取本品適量，用流動相溶解并稀釋成每1ml含培氟沙星15μg的溶液，作為供試品溶液。另精密稱取在105C°干燥至恒重的甲磺酸培氟沙星對照品適量，用流動相溶解并制成每1ml中含20μg的溶液，作為對照品溶液。取供試品溶液和對照品溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得。

2.3 注射用甲磺酸培氟沙星制備工藝的考察

2.3.1 質(zhì)量指標

①性狀:白色塊狀物。②pH測定：參照《中國藥典》2010版二部附錄ⅥH pH測定法，pH范圍3.5-4.5。③水分：參照水分測定法（中國藥典2010年版二部附錄ⅧM第一法）測定，水分不得過1.0%。④有關(guān)物質(zhì)測定：有關(guān)物質(zhì)用高效液相法測定，應不超過1.0%。⑤含量測定：甲磺酸培氟沙星含量用高效液相法測定，甲磺酸培氟沙星含量應在90%～110%范圍內(nèi)。

2.3.2 正交試驗結(jié)果

根據(jù)以上實驗設計方案，對注射用甲磺酸培氟沙星工藝影響較大的幾個方面如賦形劑、活性炭的量和抗氧劑進行正交設計試驗，以篩選最佳處方，如表6。結(jié)果見表7。

表6 因素水平表

表7 正交試驗結(jié)果分析表

由表6可知，對注射用甲磺酸培氟沙星含量的影響因素C>B>A，并得知最佳方案為A3B1C3。

2.4 注射用甲磺酸培氟沙星質(zhì)量檢測

按照A3B1C3方案在公司凍干粉針劑車間中試放大三批注射用甲磺酸培氟沙星，藥液經(jīng)過 0.45μm和0.22μm過濾，灌封后經(jīng)上半塞，冷凍干燥，全上塞和軋蓋后得樣品，樣品經(jīng)過質(zhì)量檢測，結(jié)果見表8。

表8 三批樣品試驗結(jié)果表

三批中試放大樣品經(jīng)過質(zhì)量檢測，各項指標均符合質(zhì)量標準，表明采用A3B1C3方案制備的注射用甲磺酸培氟沙星結(jié)果較好。

3 討論

3.1 由于甲磺酸培氟沙星的水溶液凍干后的成型性較差，為了使制劑易于凍干和成型并能保持較好的外型和機械強度，選擇合適的賦形劑很重要。常用的賦形劑有乳糖、葡萄糖、甘露醇、水解明膠、甘氨酸、右旋糖苷等。但是乳糖、葡萄糖、水解明膠、甘氨酸、右旋糖苷等有一定的吸濕性。甘露醇為常用的凍干制劑輔料，本品無吸濕性，干燥快，化學穩(wěn)定性好，易溶于水。因此直接選用甘露醇作為賦形劑，通過對加入不同量的甘露醇考察其成型效果，當甘露醇的用量為每瓶0.1g時，制劑的成型性﹑溶解性和機械強度都較好，因此，選擇甘露醇用量為0.1g/瓶。

3.2 活性炭有吸附雜質(zhì)、去除熱原等作用，注射劑中需加入活性炭，其用量通常為0.01%-0.5%。但活性炭同時對主藥有吸附作用。為了保證主藥含量的準確性，進行了不同濃度活性炭對主藥吸附的考察，以確定活性炭的用量。從實驗結(jié)果表明，活性炭的用量為0.05%，對主藥含量影響最小。

3.3 抗氧劑的選擇：甲磺酸培氟沙星屬于第三代氟喹諾酮類抗菌劑，從甲磺酸培氟沙星結(jié)構(gòu)可知，該藥對光不穩(wěn)定，尤其在有鐵、鎂等金屬離子存在時，更加速降解。因此，在生產(chǎn)過程中需要加入抗氧劑，試驗表明同時加入亞硫酸氫鈉和依地酸鈣鈉兩種抗氧劑效果最好。

［1］張明明，賈曉梅，謝霞，等.甲磺酸培氟沙星治療手術(shù)后下呼吸道感染老年患者的療效觀察[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2012，21（26）：2903-2904.

［2］孫立偉.甲磺酸培氟沙星治療泌尿系統(tǒng)感染臨床效果觀察[J].中國當代醫(yī)藥，2012,19（11）:58-59.

［3］王明樂，劉俊芳.甲磺酸培氟沙星注射液穩(wěn)定性及有效期預測[J].中國當代醫(yī)藥，2009,12（4）:50-51.

［4］高志恒.甲磺酸培氟沙星注射液治療40例急性呼吸道感染的臨床觀察[J].中國現(xiàn)代藥物應用，2008，2(8):41-42.