張雪松 劉微 李佳
3種血漿速凍方法的比較
張雪松 劉微 李佳
血漿速凍;血漿中心溫度
《血站技術操作規程》(2012版)中對血漿的速凍提出了具體的要求, 明確血漿速凍環節在保存Ⅷ因子加工過程的重要性;同時提出要在60min內將血漿中心溫度降至-30℃以下[1]。目前大部分血站采用的血漿速凍方法有3種, 第一種是低溫保存箱法, 第二種是國產速凍機法, 第三種是進口平板速凍機法, 作者對這3種方法進行了比較, 報告如下。
1.1 一般資料 長春市中心血站采集的400 ml全血中分離的血漿。
1.2 儀器 -50℃低溫保存箱MDF-U460BR(日本三洋公司);血漿速凍機HRSDX-386(青島海爾);平板接觸式血漿速凍機MBF21(德國Dometic);血漿模擬袋(德國多美達)。
1.3 方法
1.3.1 校準 將血漿模擬袋的測溫探頭與血站質控用的標準溫度計比對, 二者檢測溫度差為0.01℃, 證明探頭測溫數值準確, 用模擬袋能測試出血漿的中心溫度。
1.3.2 低溫保存箱法 將-50℃低溫保存箱預溫到-45℃以下, 將40袋200 ml血漿平鋪, 將血漿模擬袋放在中間, 測溫探頭的數據線與平板速凍機的測溫面板相聯, 開始速凍;每隔10 min記錄面板的溫度。
1.3.3 國產速凍機法 將血漿速凍機預溫至-50℃, 將40袋200 ml血漿平鋪, 將血漿模擬袋放在中間, 開始速凍;將測溫探頭的數據線與平板速凍機的測溫面板相聯, 每隔10 min記錄面板的溫度;采用相同方法分別記錄70袋和110袋不同數量血漿的溫度變化。
1.3.4 平板接觸式血漿速凍機法 將速凍機預溫, 上下冷凍板的溫度下降到-45℃以下, 將30袋200 ml血漿平鋪于下冷凍板上, 將血漿模擬袋放在中間, 測溫探頭的數據線與平板速凍機的測溫面板相聯, 關閉冷板, 開始速凍;每隔10 min記錄面板的溫度, 5次的試驗結果見表1。
見表1。
國家在新版《全血和成分血質量要求》對新鮮冰凍血漿的定義是:采集后儲存于冷藏環境中的全血, 最好在6小時(保養液為ACD)或8 h(保養液為CPD或CPDA-1)內, 但不超過18 h將血漿分離出并速凍呈固態的成分血[2]。同時在新版《血站技術操作規程》中提出了速凍的概念, 明確了保存凝血因子Ⅷ中二個關鍵的參數是冷凍速率和血漿中心溫度, 以往的檢測方法都是通過檢測血漿表面的溫度來檢測血漿的速凍效果, 而血漿模擬袋是一個袋子中有上下二層, 分別可以注入液體, 能模擬出不同規格血漿的厚度;中間是一個套管, 可以放置測溫探頭。這樣就可以準確檢測出血漿的中心溫度。從我們的試驗結果可看出, 3種速凍的方法效果比較有顯著差異。速凍同樣數量的血漿, 平板接觸式速凍機需要50 min, 血漿速凍機(青島海爾)速凍機需要70 min, 而低溫存箱則需要200 min。
從速凍的原理來看:平板接觸式速凍機是采用的是兩塊冷板夾心法, 通過高效壓縮機使2個金屬板的溫度穩定在-50℃左右, 血漿通過低溫金屬直接接觸進行熱傳遞, 接觸多的是漿袋厚的中間部位。結冰是由漿袋中間向四周擴散,最后是邊角;金屬的熱傳導率為58w/m.k是空氣的上百倍(空氣的熱傳導率為0.28w/m.k),因此平板接觸式速凍機法使血漿降溫過程所需時間少[3],降溫效率得到極大的提高。只要花費50 min, 血漿中心溫度就能達到-30℃以下, 符合《血站技術操作規程》要求。血漿速凍機(青島海爾)是采用冷板接觸和空氣對流技術, 低溫金屬板下方有冷凍導管, 同時加上強勁低溫風冷技術, 與金屬板接觸面是由中間向四周結冰,另一面是先四周后中間的結冰方式, 也能在70 min內使得血漿中心溫度能達到-30℃以下。同比平板接觸式速凍機要慢一些, 但大批量速凍時效果較好, 所花費的總體時間較少。低溫保存箱完全是采用風冷技術, 速凍血漿是由四周邊角開始結冰, 再緩慢向漿袋中間擴散, 中心區的結冰速度比較慢。雖然能在200 min內凍好血漿, 但其降溫緩慢, 前170 min的溫度都處于-8.0℃, 不能起到速凍的作用。

表1 三種血漿速凍法的比較
我們認為平板接觸式速凍機作為新一代血漿速凍設備具有降溫速度快、時間短、效果好的優點, 能滿足新鮮冰凍血漿和制備冷沉淀的原料漿速凍要求。唯一不足是速凍容量不夠大(一次最多只能速凍30袋), 不能滿足大批量血漿的速凍;而血漿速凍機(青島海爾)雖然速凍效果略低于平板接觸式速凍機, 但有容量大, 大批量血漿速凍總體時間短等優點。
[1] 中華人民共和國衛生部 .血站技術操作規程,2012.
[2] 中華人民共和國衛生部.全血及成分血質量要求 ,GB18469-2012.
[3] 陳文彪.2種血漿速凍方法的比較.中國輸血雜志,2010, 23(4):298-299.
長春市中心血站