蔡雪仰
(廣東省佛山市中心血站 528000)
正確鑒定血型和意外抗體鑒定是確保溶血性貧血患者輸血安全的關(guān)鍵步驟。進(jìn)行抗體鑒定時,須在兩種介質(zhì)中交叉配血,必要時加做第三種介質(zhì)交叉配血,以最大程度地發(fā)現(xiàn)并鑒定意外抗體,確保患者輸血安全。現(xiàn)將本站輸血工作中檢出的2例溶血性貧血患者的血型抗體報道如下。
1.1 一般資料 例1:患者,女,5歲,血型為A型,RhD陽性,無輸血史。臨床診斷為溶血性貧血。實驗室檢查:血紅蛋白58g/L,白細(xì)胞7.5×109/L,血小板138×109/L,因貧血癥狀明顯申請懸浮紅細(xì)胞1U。抗球蛋白卡交叉配血主、次側(cè)均有凝集,因此將標(biāo)本送來本血站進(jìn)行交叉配血。為查明凝集反應(yīng)原因,采用進(jìn)口譜細(xì)胞對患者血清進(jìn)行了抗體鑒定,證實患者血清中存在Rh系統(tǒng)的抗-e和非特異性自身抗體。篩選e抗原陰性洗滌紅細(xì)胞1U輸注,無輸血不良反應(yīng)發(fā)生。
例2:患者,男,32歲,血型為A型,RhD陽性,無輸血史。臨床診斷為溶血性貧血。實驗室檢查:血紅蛋白55g/L,白細(xì)胞6.5×109/L,血小板158×109/L,因貧血癥狀明顯申請懸浮紅細(xì)胞1U。抗球蛋白卡交叉配血主、次側(cè)均有凝集,因此將標(biāo)本送來本血站進(jìn)行交叉配血。為查明凝集反應(yīng)原因,采用進(jìn)口譜細(xì)胞對患者血清進(jìn)行了抗體鑒定,證實患者血清中存在Rh系統(tǒng)的抗-e和非特異性自身抗體。篩選e抗原陰性洗滌紅細(xì)胞1U輸注,無輸血不良反應(yīng)發(fā)生。
1.2 試劑 單克隆抗-A、抗-B試劑、ABO反定型試劑紅細(xì)胞、篩選細(xì)胞、抗人球蛋白試劑 (上海血液生物醫(yī)藥有限公司);凝聚胺試劑(臺灣貝索);譜細(xì)胞、抗-D、抗-E、抗-e、抗-C、抗-c(美國Immucro)。
1.3 方法 直接抗球蛋白試驗、抗體篩選與鑒定、血型鑒定、交叉配血按文獻(xiàn)[1]及試劑說明書進(jìn)行操作。
2.1 血型鑒定 例1患者,女,5歲,血型為A型,ccDEe;例2患者,男,32歲,血型為A型,CcDEe。
2.2 直接抗球蛋白試驗 二者均為陽性。
2.3 抗體篩選 試管法抗球蛋白介質(zhì)及凝聚胺介質(zhì)中均陽性。
2.4 抗體鑒定 見表1和表2。2例患者的血清在鹽水中與譜細(xì)胞不發(fā)生凝集;在抗球蛋白介質(zhì)中用試管法檢測,1號、2號、4~11號細(xì)胞均發(fā)生++~+++的凝集,3號細(xì)胞及自身對照不發(fā)生凝集,反應(yīng)格局符合抗-e陽性特征;在凝聚胺介質(zhì)中用試管法檢測,所有的細(xì)胞均發(fā)生凝集,其中1號、2號、4~11號細(xì)胞的凝集強(qiáng)度為+++~+++s,3號細(xì)胞及自身對照的凝集強(qiáng)度為+。考慮2例患者血清中均存在自身抗-e和非特異性自身抗體。
2.5 吸收放散試驗 用A型無意外抗體的紅細(xì)胞與患者血清在37℃下吸收,吸收后的紅細(xì)胞用乙醚放散,放散液與譜細(xì)胞在抗人球蛋白介質(zhì)中有凝集反應(yīng),反應(yīng)格局符合抗-e陽性特征。吸收后的血清在抗人球蛋白介質(zhì)中與譜細(xì)胞均無凝集。證實2例患者血清中均存在抗-e。

表1 例1患者血清與譜細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果

表2 例2患者血清與譜細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果
2.6 交叉配血 選擇不含e抗原的A型RhD陽性洗滌紅細(xì)胞進(jìn)行交叉配血,主側(cè)在鹽水介質(zhì)和抗球蛋白介質(zhì)中無凝集、無溶血,在凝聚胺介質(zhì)中凝集強(qiáng)度為+。
2.7 輸血 選擇A型、RhD陽性且無e抗原的洗滌紅細(xì)胞1 U輸注,輸注過程及輸血后均無不良反應(yīng)發(fā)生。
自身免疫性溶血性貧血患者的溫自身抗體通常是非特異性的,在間接抗球蛋白試驗中與所有的紅細(xì)胞結(jié)合,呈陽性反應(yīng)。少部分溫自身抗體具有特異性,Rh抗原是其最常見的靶抗原。據(jù)報道國外的患者溫自身抗體包括Rh系統(tǒng)抗體、Duffy系統(tǒng)抗體,Kidd系統(tǒng)抗體,Diego系統(tǒng)抗體,LW系統(tǒng)抗體,Lutheran抗體,Colton系統(tǒng)抗體,國內(nèi)患者自身抗體的特異性報道多為Rh系統(tǒng)抗體,少量MNS、Kidd抗體[2]。在引起自身免疫性溶血性貧血的Rh系統(tǒng)抗體中,抗-e最為常見,其次為抗-c、抗-E,抗-D,抗-C。本文報道中的2例患者均無輸血史和妊娠史,溶血性貧血診斷明確,抗球蛋白介質(zhì)檢測其血清中存在抗-e,Rh分型為ccDEe,考慮抗-e為自身抗體,但產(chǎn)生原因尚不明確。
臨床上可見自身抗-e及自身抗-e聯(lián)合其他特異性自身抗體引起溶血性貧血的報道[3-5]。本研究用試管法對2例患者的血清進(jìn)行抗體鑒定時,抗球蛋白介質(zhì)中格局明顯,自身對照不發(fā)生凝集,抗-e的結(jié)果明確。但凝聚胺介質(zhì)中,患者血清與e抗原陰性的譜細(xì)胞也有凝集反應(yīng),但凝集強(qiáng)度為僅為+,遠(yuǎn)小于e抗原陽性譜細(xì)胞的凝集強(qiáng)度(+++~+++s),此外,自身對照亦有+的凝集,綜合患者病史、臨床基本資料及試驗結(jié)果,考慮e抗原陰性譜細(xì)胞的凝集為非特異性自身抗體所致。上述實驗結(jié)果提示,聯(lián)合不同的介質(zhì)法進(jìn)行抗體鑒定,有助于進(jìn)一步明確溶血性貧血患者自身抗體的種類及特異性,從而為臨床安全輸血提供保障。
[1] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:246-270.
[2] 向東,劉曦,王健蓮,等.紅細(xì)胞溫自身抗體的血清學(xué)特點分析及配血對策[J].中國輸血雜志,2008,21(12):924-925.
[3] 黃靚,涂同濤,魏晴.抗-e引起自身免疫性溶血性貧血1例[J].中國輸血雜志,2009,22(3):231-232.
[4] 楊珊,孔慶芳.抗-e自身抗體患者配血報告1例[J].中國輸血雜志,2009,22(10):839-840.
[5] 李翠瑩,徐弘,何花,等.類抗-C、類抗-e檢出1例[J].中國輸血雜志,2010,23(6):478-479.