SA-6000血液流變分析儀清洗液的研制和應用

賀洪軍

（四川省安岳縣人民醫院檢驗科 642350）

SA-6000血液流變分析儀是目前國內先進的血黏度分析系統，儀器采用錐板式測量方式，通過一個低慣性的轉矩馬達對被測試液體施加一個受控應力，驅動軸由一個低阻力磁浮軸承保持在中心位置，它將施加的應力傳遞到被測液體上，其測試頭為錐板式。該儀器自動化程度高，簡單，快速，特別適用于血栓性疾病的篩查［1］。但儀器所用清洗液采用獨特配方，其他型號儀器的清洗液不能取代，為了節約成本，本文對清洗液進行了研制并取得了初步成功，經與原裝清洗液進行對比和實際應用，效果良好，具有明顯的社會、經濟效益。

1 材料與方法

1.1 儀器 SA-6000血液流變分析儀（北京賽科希德科技發展有限公司）；PHS-2C型酸度計（上海虹益儀器儀表有限公司）；Moder13900滲透壓測定儀（美國生產）。

1.2 試劑 （1）對比試劑：SA-6000血液流變分析儀原裝清洗液。（2）自制試劑：主要成分為非離子表面活性劑、電解質等化學試劑及適量的穩定劑及防腐劑。

1.3 試劑配制方法 首先在分析天平上定量稱取不同種類和重量的表面活性試劑、電解質等試劑，用蒸餾水溶解，不斷攪拌并加熱，配成1 000mL透明溶液過濾后備用。取2mL全血，讓其自然凝固，等量分成9部分，置于9根清洗干凈的透明試管備用。

1.4 統計學方法 資料經SPSS13.0軟件處理，作配對t檢驗和相關分析。

2 結 果

首先仔細分析原裝清洗液的主要成分，分析其理化指標：pH、滲透壓及電導率等；然后設計自制清洗液配方并優化。

2.1 析因設計選擇表面活性劑種類 根據兩種以上的表面活性劑組成的復合配方，在種類不同時可發生協同作用，獲得強去污能力這一原理［1］。作者采用析因設計篩選表面活性劑種類，其方法是將新鮮配制的一定濃度的表面活性劑，兩兩隨機分配，每次處理兩個因素（a、b），每個因素兩個水平（a1，a2，b1，b2），研究采用2×2析因設計組合方式，將實驗單位隨機等分為4組，分別接受a1b1，a2b1，a1b2，a2b2各兩個水平共4種處理方式。通過10、30、60、300s等續觀察，結果發現表面活性劑A與表面活性劑B的混合液能迅速使血凝塊溶解，交叉作用分析證明，表面活性劑合理組合具有明顯的增效作用。

2.2 正交試驗優選最佳濃度 因為電解質及消泡劑等微環境不同，在不同程度上可以影響表面活性劑的去污能力，故采用正交試驗考察其相互影響［2］，其步驟是先制定因素與水平表（表1）。按照正交試驗設計好的表格，嚴格操作，分別在9根試驗管中加入不同的試劑，并于10、30、60、300s和15min及1h逐一觀察其溶解血凝塊的效果，并記錄下每種條件的試驗結果（表2）。

表1 因素與水平表

表2 正交試驗結果

試驗發現：9組試驗在30s時上清液均出現紅色，表明紅細胞已經開始溶解，隨時間推移，凝塊開始縮小，第8組能在15min時基本溶解全部血凝塊。其最優組合為A3B2C1D3E1，即取表面活性劑 A 1mL、表面活性劑B 0.4 mL、消泡劑0.5mL、pH7.5，電解質濃度9mol時清洗效果最佳。根據極差Ri的差異，各因素對清洗質量影響程序如下：表面活性劑A＞消泡劑＞表面活性劑B＞電解質濃度＞液體pH。

2.3 相關性分析 對臨床上50例患者靜脈血隨機取樣分別用原裝試劑和自配清洗液測定，結果見表3。

表3 兩種清洗液在儀器上測定的結果（n＝50）

自配清洗液與原裝清洗液在全血（切變率1、5、30、50、200）及血漿黏度測定中，差異無統計學意義（P＞0.05）。而相關系數最小為0.98，充分證明兩組數據呈高度正相關。說明自配清洗液可以替代原裝清洗液。

3 討 論

血栓性疾病是目前嚴重危害中老年生命健康的常見病，已成為世界各國成年人死亡和致殘的主要原因之一。血液黏度分析是心腦血管系統疾病乃至全身各系統疾病的臨床診斷及療效觀察最重要的項目指標之一，大量研究證明，許多危害人類健康的常見病、多發病，如高血壓、高血脂、急性心肌梗死、閉塞性動脈粥樣硬化癥、血栓閉塞性脈管炎、先天性心臟病、肺源性心臟病、充血性心力衰竭、惡性腫瘤、燒傷、休克及慢性肝腎疾病，在疾病的發生與發展過程中均與血液黏度升高有關［2］。

表面活性劑是指具有固定親水，親油基團的化合物，主要分為陽離子表面活性劑，陰離子表面活性劑及非離子表面活性劑三大類。表面活性劑之間相互作用與相互影響的報道很多［3］，所以作者采用析因設計的科研方法尋找沒有相互拮抗，同時又具有增強去污效果的兩種表面活性劑。復合表面活性劑獲得比單一表面活性劑更優的去垢效果的機制是：性質不同的表面活性劑在溶液中形成膠束，有很強的表面活性作用，能大大降低水的表面張力，更有利于去垢［4］。同時，兩種不同性質的表面活性劑與單一表面活性劑相比，不但沒有相同電荷的斥力，反而增加了正、負電荷間的引力，這就大大促進了兩種離子間的結合，因而產生強的去垢效果［5］。陰離子表面活性劑具有很強的溶血能力，在本實驗中得到了驗證。

電解質及消泡劑作用：電解質可使離子型表面活性劑cmc大大降低，膠束聚集數增加，濁度降低，使增溶能力增強［6］。清洗過程中易產生氣泡，而使表面活性劑無法接觸污垢，加入消泡劑能有效清除液體流動時產生的氣泡，增強清潔效果。

析因設計是一種全面、均衡、高效的設計方法，是一種多因素分析設計方法。多因素設計區別于單因素設計的明顯特征是：其處理因素是由兩個或兩個以上因素組合而成，每個因素至少有兩個水平。這種設計的顯著特點是可以獲得3個方面重要信息：各因素的效應大小；各因素間交互作用大小；通過比較各種組合的效應，找出各因素各水平的最優組合，正是由于本試驗優選出了好的配方，才有好的檢測結果。

清洗液的配制應由指定的專職人員負責，必須固定試劑的生產廠商，不要隨意更換生產廠家，不同的廠家產品質量有所不同，每次試劑配制最好兩人負責，做好記錄，保證清潔液有很好的重復性，這一過程非常重要。實踐證明：自主研發的清洗液效果佳，化學性質穩定，成本低廉，對皮膚無腐蝕。低濃度的復合表面活性劑同時適用于血細胞計數儀及生化分析儀管道的日常清洗。隨著技術將愈來愈成熟，復合表面活性劑的研究與應用將會受到人們更多的關注。

［1］ 翁維良.血液流變學研究方法及其應用［M］.北京：科學出版社，1992：37-40.

［2］ 黃文芳.實用醫學分析技術與應用［M］.北京：人民衛生出版社，2002：586-602.

［3］ 鐘靜芬.表面活性劑在藥學中的應用［M］.北京：人民衛生出版社，1996：515-518.