維他昔布咀嚼片體外溶出度的測定

宋 頌，華 潔，周福軍，呂鵬月，孫燕錦，侯文彬

(1．天津中醫藥大學，天津 300193;2．天津藥物研究院，天津 300193;3．北京歐博方醫藥科技有限公司，北京 100085)

環氧合酶－2(COX－2)抑制劑成為一類新的非甾體類抗炎藥，可迅速的緩解骨關節炎，風濕性關節炎引起的疼痛［1］。維他昔布為新型的COX－2抑制劑，可特異性地抑制COX－2，阻止炎性前列腺素類物質的產生，起到抗炎、鎮痛及退熱作用，適用于緩解犬骨關節炎引起的疼痛和炎癥，用于骨或軟組織圍手術期治療管理。對于因為骨關節炎造成慢性疼痛的犬類的治療，目前所使用的方法包括:抗發炎和止痛藥物、舒緩疾病的骨性關節炎藥物等。該藥用于治療犬類骨關節炎所引起的痛疼和炎癥具有口服后快速吸收，廣泛分布，生物利用度高的優點。

目前，在我國維他昔布咀嚼片(Vitacoxib chewable tablets)尚未上市，維他昔布咀嚼片的體外溶出度研究國內外均未見文獻報道，而溶出度是評價藥物制劑質量的重要依據［2］。為此，對其進行了相關研究，建立了該片劑的體外溶出度測定方法。

1 儀器與試劑

1．1 儀器 UV－1601型紫外分光光度儀(日本島津)、ZRS－8G智能溶出試驗儀(天津大學無線電廠)、BP211D－電子天平(Sartorius公司)

1．2 藥品與試劑 維他昔布對照品為北京歐博方醫藥科技有限公司提供(批號:30080－098A1);維他昔布咀嚼片(天津藥物研究院自制，批號20120105，20120106，20120107);十二烷基硫酸鈉為化學純，鹽酸、磷酸二氫鉀、氫氧化鈉均為分析純，蒸餾水。

2 方法與結果

2．1 對照品溶液和供試品溶液的制備

2．1．1 對照品溶液的制備 精密稱取維他昔布對照品適量，用甲醇溶解制成每1 mL含維他昔布0．25 mg的對照品儲備液，精密吸取對照品儲備液適量，用0．8%十二烷基硫酸鈉溶液稀釋制成每1 mL含維他昔布0．01 mg的溶液，即得。

2．1．2 供試品溶液的制備 精密稱取本品約30 mg，置于50 mL量瓶中，加0．8%十二烷基硫酸鈉溶液適量，超聲處理30 min，用0．8%十二烷基硫酸鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，精密吸取2 mL置10 mL量瓶，加0．8%十二烷基硫酸鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2．2 溶出方法 按照《獸用化學藥物質量標準建立的規范化過程技術指導原則》與《中國獸藥典2010年版》一部［3］中溶出度的有關內容，維他昔布咀嚼片為片劑，選擇槳法，轉速為50 r/min。

2．3 溶出介質的選擇

2．3．1 維他昔布為難溶性藥物 因此選擇了多種溶出介質進行研究。

方法:槳法，溫度37℃，轉速:50 r/min，溶出介質體積為 900 mL。介質:水、0．1 mol/L HCl、磷酸鹽緩沖液(pH6．8)、0．5%十二烷基硫酸鈉溶液。

以45 min為取樣時間，取樣后在244 nm的波長處測定吸光度，結果見表1。

表1 維他昔布咀嚼片在不同介質中的溶出度結果表

結果表明，維他昔布咀嚼片在水、0．1 mol/L HCl和磷酸鹽緩沖液(pH6．8)中，均不能完全溶出，必須加入適量的十二烷基硫酸鈉來增加藥物的溶解。

2．3．2對十二烷基硫酸鈉的加入量進行進一步的研究，結果見表2。

表2 維他昔布咀嚼片在不同濃度的十二烷基硫酸鈉溶液中的溶出度結果表

結果表明，維他昔布咀嚼片在0．8%十二烷基硫酸鈉溶液中，在45 min時，溶出度已達到80%以上，符合要求，因此確定維他昔布咀嚼片的溶出介質為0．8%十二烷基硫酸鈉溶液。

2．4 取樣時間的確定 取維他昔布咀嚼片(20120105批)6片，采用槳法，溫度37℃，轉速:50 r/min，以0．8%十二烷基硫酸鈉溶液為溶出介質，介質體積為 900 mL，分別在 5、10、20、30、45、60 min取樣，在247 nm的波長處測定吸光度，考察其溶出曲線。結果見表3。

表3 維他昔布咀嚼片溶出度曲線結果表

結果表明，在30 min時，溶出度已達到80%以上，符合要求，因此確定維他昔布咀嚼片溶出取樣時間為30 min。

2．5 專屬性 取維他昔布咀嚼片與空白輔料分別研成粉末，取適量用0．8%十二烷基硫酸鈉溶液溶解，濾過，取續濾液制成供試品溶液。照紫外－可見分光光度法［3］在200～400 nm之間進行全波長掃描，結果顯示，維他昔布咀嚼片在247 nm的波長處有最大吸收，輔料于247 nm處無吸收，不影響測定。因此確定維他昔布咀嚼片溶出度的檢測波長為247 nm。

2．6 線性范圍 精密稱取維他昔布對照品適量，用甲醇溶解制成每1 mL含維他昔布0．25 mg的對照品溶液，精密吸取對照品溶液適量，加0．8%十二烷基硫酸鈉溶液稀釋制成每1 mL含維他昔布0．05 mg的溶液，作為對照品儲備液。精密吸取對照品貯備液0．5、1．0、1．5、2．0、2．5、3．0、3．5 mL 移入 10 mL量瓶中，加0．8%十二烷基硫酸鈉溶液稀釋至刻度，搖勻，即得濃度為 0．002496、0．004992、0．007488、0．009984、0．01248、0．014976、0．017472 mg/mL 的一系列溶液。在247 nm的波長處測定吸光度，將吸光度(Y)對濃度(X)結果進行回歸分析，得線性方程為 Y=50．78X+0．002(r=0．9995)，即維他昔布濃度在0．002496～0．017472 mg/mL范圍內，與吸收度呈良好的線性關系。

2．7 回收率試驗 取維他昔布咀嚼片(20120105批)，研細，分別稱取9份，每份約15 mg(半量)，置50 mL量瓶中，每3份分別精密加入相當于半量濃度的80%，100%和120%的維他昔布對照品溶液，按2．1．2項下的方法，制成樣品溶液，在247 nm的波長處測定吸光度，結果見表4。

表4 維他昔布咀嚼片含量測定加樣回收率試驗結果表

結果測得，維他昔布咀嚼片加樣回收率的平均值為102．9%，RSD 為1．36%。

2．8 重復性 取維他昔布咀嚼片(20120105批)，研細，分別稱取6份，按2．1．2項下的方法，制成樣品溶液，在247 nm的波長處測定吸光度，含量分別為 0．0554、0．0553、0．0553 、0．0565、0．0558、0．0547、0．0555 mg/mg，重復性試驗的 RSD 為1．09%，本方法重復性良好。

2．9 溶液的穩定性 取重復性項下的樣品，分別于 0、1、2、4、8 h，在 247 nm 的波長處測定吸光度，0、1、2、4、8 h 的吸光度分別為 0．347、0．346、0．345、0．347、0．347，穩定性試驗的 RSD 為 0．26%，表明供試品溶液在8 h內穩定。

2．10 重現性試驗 取本品三批(20120105、20120106、20120107)各6片，照《中國獸藥典2010年版》一部溶出度測定法第二法槳法，0．8%十二烷基硫酸鈉溶液為溶出介質，體積為900 mL，溫度37℃，以50 r/min鐘的轉速，依法分別操作，經5、10、20、30、45、60 min 后，取溶液 5 mL，及時補充相同體積的溶出介質，濾過，棄去初濾液，取續濾液，即得。在247 nm的波長處測定吸光度，結果見圖1，重現性良好，質量穩定。

圖1 三批維他昔布咀嚼片的溶出度重現性結果圖

2．11 均一性試驗 取本品(20120105批)6片，同“2．7”項下操作，測定其溶出度。結果見圖2，溶出均一性好，質量穩定。

圖2 維他昔布咀嚼片溶出均一性試驗結果表

2．12 三批樣品溶出度的測定 取本品三批(20120105、20120106、20120107)各 6 片，照《中國獸藥典2010年版》一部溶出度測定法第二法槳法，0．8%十二烷基硫酸鈉溶液為溶出介質，體積為900 mL，溫度37℃，以50 r/min的轉速，依法分別操作，30 min取樣，在247 nm的波長處測定吸光度，維他昔布咀嚼片三批樣品的平均溶出度84．87%、85．14%、86．15%，三批樣品30 min時溶出度均達到80%以上，符合《中國獸藥典2010年版》一部要求。

3 討論與結論

3．1 溶出度系指藥物從片劑或膠囊劑等固體制劑在規定條件下溶出的速度和程度［2］。是一種模擬內服固體制劑在胃腸道中的崩解和溶出的體外實驗方法。維他昔布為難溶性藥物，一般認為，難溶性藥物、因制劑處方與生產工藝造成臨床療效不穩定的藥物以及治療量與中毒量相接近的藥物，其口服制劑質量標準中必須設定溶出度檢查項。藥物進入體內，需經過崩解、溶出才能被機體吸收而發揮藥效，因此，溶出速度的快慢會對藥效產生影響，它是評價藥物制劑質量的重要依據。

3．2 在溶出介質的選擇試驗中，選擇244nm作為紫外檢測波長測定吸光度是由于在預實驗中溶出介質尚未確定，因而參考了原料藥的最大吸收波長244nm。在專屬性研究中，測定了維他昔布咀嚼片在選定的溶出介質中的最大吸收波長為247nm，因此在之后的研究中采用247nm作為溶出度試驗的紫外檢測波長。

3．3 在選擇溶出介質的研究中，先進行了預實驗，測定了維他昔布在各種介質中的平衡溶解度，篩選出四種介質后，進行了溶出度考察和篩選，最后確定為0．8%十二烷基硫酸鈉溶液。

3．4 謝沐風的研究中［4］建議采用900mL作為溶出介質體積，由于900mL與人體消化道內的體液總體積較為接近，增加其體內外的相關性。另外，維他昔布咀嚼片規格為30mg，根據平衡溶解度的預實驗，900mL也可以滿足漏槽條件。所以試驗中介質體積確定為900mL。

本法通過對維他昔布咀嚼片溶出度線性關系、回收率、重復性和溶液穩定性的方法學的驗證，確認本方法準確，可用于維他昔布咀嚼片的體外溶出度測定。

［1］ Brooks，PM，DayRO．Cox － 2Inhibitors［J］．MedicalJournalof Australia，2000，177(8):433 －436．

［2］ 尹燁華，梁文濤，余永鵬，等．恩諾沙星微囊體外溶出度的研究［J］．中國獸藥雜志，2011，2:20 －22．

［3］ 中國獸藥典委員會．中國獸藥典2010年版一部［S］．附錄26－27．

［4］ 謝沐風．科學、客觀地制訂溶出度試驗質量標準［C］．藥品技術審評論壇，2012，1(35):23．