吳 亮,李秀良,文信旺
(廣西畜牧研究所,廣西 南寧530001)
奶牛酮病是奶牛由于碳水化合物和揮發性脂肪酸代謝紊亂所引起的一種營養代謝性疾病,在臨床病理學方面主要表現為低血糖、高血脂、酮血、酮尿、脂肪肝以及酸中毒等。臨床表現以消化功能紊亂和神經癥狀為主。患病奶牛體質衰弱,生產性能大幅度下降,給奶牛業造成很大的經濟損失。據統計,大多數實行集約化畜牧業的國家都有乳牛酮病流行,主要見于舍飼高產奶牛,且發病率差別大。據調查,我國奶牛酮病發病率為15%~30%,美國為5.0%,印度為14.7%,日本高達43.1%(黃克和,2008)。
國內外許多學者對奶牛酮病進行了深入的研究,尤其在奶牛產后一段時期內進行了多方面的研究,并取得了一定進展。據報道奶牛酮病的多發期在產后30d,且集中在產后的24~28d[1]。但目前缺少奶牛產后血酮含量的動態變化研究報道,因此為了更加深入地了解奶牛酮病,本試驗采用動態的方法研究產后奶牛血液酮體的變化規律。
1.1 試驗儀器 數顯恒溫水浴鍋,可見分光光度計,800型離心沉淀器 ,電子天平 ,微量凱氏蒸餾器,電熱鼓風干燥箱 ,自動雙重純水蒸餾器 。
1.2 試驗奶牛 被檢荷斯坦奶牛13頭,選自南寧市某奶牛場荷斯坦奶牛中臨床健康奶牛,被檢時均為二胎牛,舍飼飼養,體重在500kg左右。奶牛產后采食量正常,糞便質地及顏色正常,糞便的pH值偏酸性,尿酮定性檢查有部分為陽性。
1.3 飼料配方 奶牛精飼料配方、總蛋白含量如表1。

表1 精飼料配方
粗料飼料配方為:玉米青貯8kg,干草5kg,青料8kg,象草8kg,玉米芯10kg。
1.4 檢測方法
1.4.1 酮體定量測定 分別在選定奶牛產后0、5、12、19、26、33、40d各采頸靜脈血,肝素鈉抗凝,現場離心取血清,盡快送至廣西大學獸醫臨床實驗室檢測。采用水楊醛比色法定量檢測血酮濃度。將樣品中的乙酰乙酸和β-羥丁酸轉化為丙酮,測定樣品中丙酮總量得到血清總酮。其主要步驟為除蛋白,蒸餾,水楊醛顯色及比色等。
試驗試劑:40%氫氧化鈉溶液,20%水楊醛溶液,18N 濃硫酸(9mol/L),0.33mol/L硫酸,5%重鉻酸鉀溶液,10%鎢酸鈉溶液,丙酮標準液(2mg/dl)。酮體定量檢測判定標準(表2)。

表2 酮體定量檢測判定標準
1.4.2 酮體定性測定 采用酮粉法。配制酮粉:硫酸銨100.00g,無水碳酸鈉50.00g,亞硝基鐵氰化鈉3.00g,充分磨細裝入褐色瓶內,震蕩混勻后放到干燥箱內保存。
2.1 血酮動態變化過程 有7頭奶牛產犢當天因故未采血,其他時間正常采血檢測。
從表3可以看出,試驗期間出現3頭次亞臨床型酮病,其中在產后12d出現2次,與同時期平均值比較均差異極顯著(P<0.01);在產后26d1次,與同時期平均值比較差異極顯著(P<0.01)。試驗中檢測出6頭次疑似酮病例,主要發生在12~33d。
2.2 奶牛產后血酮平均含量和日平均產奶量的動態變化 血酮在產后5d最低(1.19mg/dl),在產后12d最高(5.54mg/dl),然后逐漸下降,但在產后26d又出現一個高峰(4.65mg/dl),以后逐漸下降。日產奶量在25kg以上的高產奶牛有11頭,最高達36.5kg/d。11頭奶牛在產后4~6周達到泌乳高峰,2頭奶牛在產后2周達到泌乳高峰;產奶量呈動態變化過程,由初期的平均23.4kg/d逐漸升高到平均28.8kg/d,然后逐漸下降。
2.3 不同時期血酮分析 所有數據都用SAS軟件進行統計,對各階段血液酮體進行統計,算出平均值、標準差、變異系數。

表3 產后奶牛血酮含量的動態變化 (mg/dl)

表4 奶牛血液酮體含量動態變化的分析 (mg/dl)
經過分析得出:在7個階段中,產后5d平均血酮濃度最低,為1.91mg/dl;產后12d奶牛平均血酮濃度最高,達到5.54mg/dl,為產后5d平均血酮濃度的2.9倍,二者差異顯著(P<0.05),其他各階段之間血酮平均值差異不顯著(P>0.05)(表4和表5)。

表5 差異顯著性分析
3.1 產后奶牛血液酮體含量的動態變化 從整體上看,血酮在產后5d最低(平均值1.19mg/dl),在產后12d最高(平均值5.54mg/dl),二者方差檢驗差異顯著(P<0.05),其他各階段之間差異不顯著(P>0.05)。
從個體來看,不同奶牛出現酮體高峰雖然不完全一致,但是基本在產后12~33d之間,血酮在1.06mg/dl~18.88mg/dl之間;而產犢當天和產后5d血酮最低,血酮在0.53mg/dl~3.60mg/dl之間,處于正常范圍。這與多數研究結果一致,即產后2~6周奶牛血酮達到最高。這可能是由于奶牛產后食欲出現得晚(產后8~10周),而泌乳高峰出現得早(產犢后4~6周),造成奶牛能量代謝過早出現負平衡。當機體低血糖時體脂和體蛋白將大量動員,導致大量游離脂肪酸進入血液,引起酮體在體內積存,血酮濃度升高。之后隨著能量代謝好轉,體內的酮體逐漸下降。
在試驗期間發現血酮有升高和降低的情況,這可能與該場定時補糖有關。夏成等指出,產后5d未檢出尿中的酮體,而產后10d、15d和20d,酮體陽性率明顯增加為4.44%、8.88%、8.88%[2],表明奶牛體內酮體水平呈現動態遞增的趨勢。這與本試驗血酮動態變化的結果一致。
3.2 奶牛酮病的患病與產奶量的關系 本次試驗表明,患亞臨床型酮病的奶牛日產奶量均在25kg以上,如2 218日產奶量為27.9kg,115日產奶量為29.9kg。母牛泌乳高峰出現得早(產犢后4~6周),而食欲和采食欲出現得晚(產后8~10周)。假如母牛產奶量高,體內糖消耗過多過快,造成糖供給與消耗之間的不平衡。每天產27kg奶量的母牛,體內需合成1 225g乳糖,并轉移到乳汁,一個乳糖需有兩個單糖縮合而成。1頭產34kg奶量的牛,幾乎可將血中全部糖轉化為乳糖。因此,母牛泌乳高峰出現越快,產奶量越多的牛,越易患酮病。據劉德義等統計,年產奶量在6 000kg以下牛只酮病發病率僅為0.3%,年產奶量在6 000~7 000kg的奶牛酮病發病率為1.04%,產奶量在7 000kg以上的奶牛發病率達到2.86%,而產奶量在10 000kg以上的奶牛酮病發病率最高,達7.55%[1],這表明高產奶牛易患酮病。
[1] 劉德義,姚傳珠.奶牛酮病與胎次、產乳量、泌乳月及季節關系的分析[J].黑龍江畜牧獸醫,1998(10):3-4.
[2] 夏成,張洪友,馮萬宇,等.酮粉法檢測泌乳牛尿酮、乳酮的應用研究[J].中國獸醫雜志,2003,39(12):3-4.