BECKMAN DxI 800全自動化學發光儀甲狀腺檢測項目的性能驗證

陳芳芳，李家亮，王國洪

(本文編輯:張仲書; 英文編輯:王建東)

隨著國家《實驗室質量和能力認可準則》(ISO 15189實驗室認證)在國內大中型醫院的開展，使得化學發光等檢驗項目的方法學性能評價已提到日程上來［1］。參照美國臨床實驗室標準化協會(CLSI)有關文件要求和國家ISO 15189認證的規定［2］，凡參加醫學實驗室認證的實驗室，在開展某一檢測項目之前，需提供并保留相關的方法學驗證實驗數據。為了正在申報的ISO 15189實驗室認可工作，本實驗室參照相關要求，對BECKMAN DxI800全自動化學發光儀上的5項甲狀腺激素(TT3、TT4、FT3、FT4、TSH)的精密度、線性范圍及參考區間等方面進行驗證和評價，結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 儀器為美國BECKMAN UniCel DxI 800全自動化學發光儀。標本均取自本院患者及健康體檢者新鮮血清。質控品為美國伯樂公司高、低值質控品，批號分別為:40271、40273。

1.2 方法

1.2.1 批內精密度 參考CLSIEP5-A2［3］文件，選擇新鮮高值(H)、低值(L)混合血清標本進行驗證實驗，每個濃度樣本連續重復測定20次，計算出均值(x)、標準差(SD)和變異系數(CV)。與廠商聲明的CV值進行比較，如實驗結果小于廠商聲明結果，則接受廠商提供的批內精密度聲明。

1.2.2 批間精密度 參考CLSIEP5-A2［3］文件，選擇新鮮混合血清標本(H、L)進行驗證實驗，每個濃度樣本每工作日重復測定4次，連續測定5工作日，計算出x、SD和CV。與廠商聲明的CV值進行比較，如實驗結果小于廠商聲明，則接受廠商提供的批間精密度結果。

1.2.3 線性范圍驗證 參考CLSIEP6-A2［4］文件，選取新鮮血清H和L各一份，將H和L按5L、4L+1H、3L+4H、2L+3H、1L+4H、5H 配制成6 個濃度，每個濃度每個項目分別測定2次，2次檢測結果的均值為實測值。將各項目檢測數據，分別輸入Excel表評估數據，以實測值為橫坐標(X)，理論值為縱坐標(Y)，做線性圖Y=aX+b，如斜率(a)=1.00±0.05，相關系數(r)≥0.975則驗證通過。

1.2.4 參考區間驗證 參考CLSIC28-A2［5］文件，選取本院健康體檢者(年齡為28～67歲，均無心、肝、肺、胃等重要臟器疾病，肝、腎功能正常，家族中無腫瘤及遺傳病史)男、女性各10名，檢測其正常新鮮血清樣本，超過95%的結果如在廠商建議的參考區間內，則驗證通過。

1.3 統計學處理 采用Excel 2003軟件進行分析。各項檢測數值以x與SD表示，并計算CV與r等數據進行比較。

2 結果

2.1 精密度驗證結果 5項甲狀腺激素(TT3、TT4、FT3、FT4、TSH)的批內精密度和批間精密度檢測結果顯示，各檢測項目的CV均小于廠商聲明的CV(≤8.33%)，與廠商聲明一致，在允許范圍內，驗證通過。結果見表1和表2。

2.2 線性范圍驗證結果 按照線性標準要求，驗證結果的a值均在(1±0.05)范圍內，r值均≥0.975(表3)。

表1 5項甲狀腺激素批內精密度驗證結果(n=20)

表2 5項甲狀腺激素批間精密度驗證結果(n=20)

表3 5項甲狀腺激素線性范圍驗證結果(n=20)

2.3 參考區間驗證結果 參考 CLSIC28-A2［5］要求，20例健康成人樣本作為參考個體，比較小樣本參考區間和廠商提供參考區間之間的可比性。如果20例參考個體中有超過95%的結果在建議的參考區間內，則驗證通過，可以直接引用廠商提供的參考區間。結果顯示(表4)，20個參考值數據的驗證結果均在廠商提供的參考區間內，驗證通過。

表4 5項甲狀腺激素生物參考區間驗證結果

3 討論

醫療質量評價是醫療質量管理的一個重要環節，對提高醫療質量起著重要的作用［6］。BECKMAN DxI 800全自動化學發光檢測是利用化學發光技術和磁性微粒子分離技術相結合的測定技術。根據《臨床實驗室改進法規修正案》和ISO 15189要求，在儀器用于臨床之前，實驗室必須對其主要分析性能進行驗證［7］。

精密度是指重復測定值間的一致性。它反映儀器整體性能的首要指標，是其他方法學評價的基礎，也是進行其他方法學驗證實驗的前提［8-10］。本文測定的5項甲狀腺激素高值、低值的批內和批間CV值均小于廠商聲明的范圍，說明BECKMAN DxI 800全自動化學發光系統檢測5項甲狀腺激素的精密度良好，符合廠商要求，達到評價目的。

線性范圍是指測定值與稀釋倍數呈線性關系的范圍，以保證樣本的檢測結果在線性范圍內準確可靠，少數標本超過線性范圍，應按要求用適當的稀釋液和方法進行稀釋后重新測定，否則檢測的結果與真值的誤差就超過了臨床可接收范圍。本文用線性實驗對甲狀腺5項檢測的線性范圍作了評價，表3結果顯示，各檢測項目的a值均在(1±0.05)范圍內，r≥0.975，說明實測值與理論值具有良好的相關性，與廠商聲明一致，結果符合要求。

生物參考區間是指某項檢查結果在正常人群中的分布范圍，是解釋檢驗結果分析檢驗信息的一個基本尺度和依據［11］。實驗室給臨床提供檢驗項目可靠的生物參考區間，才能使臨床對患者或健康體檢者的診斷治療有明確的指引，因此確立可靠的檢驗項目生物參考區間是實驗室的重要任務［12］。本實驗結果顯示，各驗證結果均在廠商提供的參考區間內，因此認為本實驗室5項甲狀腺激素的參考區間符合臨床要求。

綜上所述，通過對5項甲狀腺激素的精密度、線性范圍及生物參考區間的方法學性能評價，顯示各項分析參數的性能均符合臨床和廠商的相關要求，可用于臨床分析。按照美國病理學協會(CAP)要求，每年至少一次需要對儀器進行性能評價的驗證，其結果也應符合相應的要求［13］。通過對 BECKMAN DxI 800全自動化學發光儀上5項甲狀腺激素檢測性能的評價，可以保證其分析性能能達到實驗室認可的目標，使檢驗結果更加可靠，達到持續性質量改進的目的，更好地服務于臨床。

［1］張保平，董 莉，馮新平，等.雅培ARCHITECT i2000化學發光儀測定6種腫瘤標記物項目的方法學性能評價［J］.國際檢驗醫學雜志，2011，32(4):488-490.

［2］中國合格評定國家認可委員會.ISO 15189醫學實驗室質量和能力認可準則［S］.北京:中國合格評定國家認可委員會，2008:1236.

［3］NCCLS.EP5-A2 Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods;Appr Guideline-Second Edition［M］.Pennsylvania:NCCLS，2004:1-39.

［4］NCCLS.EP6-A Evaluation of Linearity of Quantitative Measurement Procedures:A statistical Approach;Appr Guideline［M］.Pennsylvania:NCCLS，2003:1-47.

［5］NCCLS.C28-A2 How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory;Approved Guideline Second Edition［M］.Pennsylvania:NCCLS，2000:1-40.

［6］易 凡，林村河，林錦標，等.當前醫療質量管理面臨的形勢及對策［J］. 東南國防醫藥，2012，14(3):268-270.

［7］畢 波，呂 元.定量檢測方法學性能驗證的系統設計［J］.中華檢驗醫學雜志，2007，30(2):143-145.

［8］徐建華，何 敏，黃憲章，等.強生干化學檢測系統方法學性能驗證實驗結果分析［J］.中國現代醫學雜志，2011，20(23):3571-3575.

［9］徐建華，黃憲章，莊俊華，等.羅氏MODULAR ANALYTICS全自動生化分析儀酶學指標檢測性能驗證［J］.檢驗醫學，2010，25(1):81-85.

［10］馮仁豐.臨床檢驗質量管理技術基礎［M］.第三產業版.上海:上海科學技術文獻出版社，2007.

［11］魏有仁.參考值的幾個基本問題［J］.中國實驗診斷學，1997，1(1):44-46.

［12］馮仁豐.臨床檢驗質量管理技術基礎［M］.上海:上海科技文獻出版社，2004:36.

［13］College of American Pathologists.Urinalysis checklist［M］.Chicago:CAP，2006:17-18.