TMSG1在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義

汪波

胃癌是常見的惡性腫瘤，近年來發(fā)病率逐年升高。胃癌的復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移是疾病進(jìn)展及胃癌患者死亡的主要原因。胃癌的發(fā)生發(fā)展是一個多基因、多階段的變化過程，涉及到多種癌基因的激活和抑癌基因的失活。TMSG1(tumormetastasis suppressor gene 1，腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因1)是近年來新發(fā)現(xiàn)的新型的腫瘤抑制基因。TMSG1已經(jīng)被證實在前列腺癌，宮頸癌，肝癌中TMSG1的表達(dá)與疾病的浸潤，轉(zhuǎn)移明確相關(guān)［1，2］，但在胃癌中的生理功能及臨床意義目前尚不十分明確，本文旨在探討TMSG1的表達(dá)與胃癌患者的臨床病理因素及預(yù)后的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性隨機(jī)選取霍山縣中醫(yī)院普外科2006年3月到2008年3月確診的81例胃癌患者為研究對象，患者年齡29～69歲，平均55歲。臨床分期:I+II期40例、III期41例。病理類型:腺癌68例、其它類型癌13例。手術(shù)前檢查(胸片，B超)未發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，以上病例均未接受過放療、內(nèi)分泌治療及化療，心肺肝腎功能均正常。另外選擇20例胃良性疾病標(biāo)本作為對照。

1.2 免疫組化染色 81例胃癌組織蠟塊均行4μm連續(xù)切片，分別作HE和免疫組織化學(xué)染色。鼠抗人單克隆抗體TMSG1抗體等相關(guān)試劑均購自福州邁新公司。免疫組化染色按照說明書步驟進(jìn)行。經(jīng)DAB顯色后，蘇木精復(fù)染，中性樹膠封片。用已知陽性切片作陽性對照，PBS緩沖液代替一抗作陰性對照。

1.3 結(jié)果判定 TMSG1的判定以胞質(zhì)內(nèi)有棕黃色或棕褐色細(xì)顆粒為陽性表達(dá)，選取5個高倍鏡(×400)視野做陽性細(xì)胞計數(shù)，陽性細(xì)胞數(shù)≤10%為陰性，＞l0%為陽性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 17.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計數(shù)資料采用χ2或Fisher檢驗;所有患者隨訪至2012年12月，以60個月為界進(jìn)行5年生存率分析，不同組間用Log-Rank檢驗，采用 Kaplan-Meier法繪制生存曲線，以 P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TMSG1蛋白在胃癌中的表達(dá) TMSG1蛋白在胃癌中的表達(dá)主要定位于細(xì)胞漿中，呈現(xiàn)出棕黃色的顆粒，TMSG1蛋白在胃癌中的表達(dá)為46.9%(38/81)，而在胃良性疾病中的表達(dá)高80%(16/20)，TMSG1在胃癌中的表達(dá)較良性疾病明顯下降(χ2=7.06，P=0.008)。

2.2 TMSG1的蛋白表達(dá)與胃癌患者的臨床病理因素的關(guān)系本組研究病例的結(jié)果提示，TMSG1的表達(dá)與患者年齡、腫瘤大小，病理類型及組織學(xué)分級無關(guān)(P＞0.05)，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤的分期密切相關(guān)(P＜0.05)，見表1。

2.3 TMSG1的表達(dá)在胃癌患者預(yù)后中的意義 TMSG1的表達(dá)與患者的總生存期(OS)明顯相關(guān)，TMSG1陽性組患者的總生存期明顯高于陰性組患者(P=0.0277，log-rank檢驗)，且TMSG1陽性組患者的無病生成期也明顯高于陰性組患者(P=0.0297，log-rank檢驗)。在多因素Cox回歸分析中可見TGSM1的缺失或減少及腫瘤的分期是腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的一個獨立預(yù)后因素(P=0.025，P=0.007)。

表1 TMSG1的蛋白表達(dá)與胃癌患者的臨床病理因素的關(guān)系

3 討論

胃癌的發(fā)生發(fā)展是一個多因素多步驟的過程，而體內(nèi)一些基因表達(dá)的改變導(dǎo)致細(xì)胞生長調(diào)控的失調(diào)是胃癌發(fā)生過程中一個重要的因素［3］。無序的細(xì)胞增殖最終也會導(dǎo)致腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移。現(xiàn)在大量的表明腫瘤相關(guān)的抑制基因如NM23、KAI-1、KISS-1在腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移中起到非常重要的作用［4-6］。

TMSG1是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種新型腫瘤相關(guān)基因，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在前列腺癌，肝癌，宮頸癌和胰腺癌中都有不同程度的表達(dá)。目前一些研究表明TMSG1的功能是抑制腫瘤的生長與浸潤。Chen等［7］在肝癌細(xì)胞系 HCCLM3中通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染TMSG1研究發(fā)現(xiàn)其能夠明顯抑制肝細(xì)胞腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移。Su等［8］研究發(fā)現(xiàn)高表達(dá)TMSG1的前列腺癌細(xì)胞系PE-3M-1E8的增殖，浸潤能力明顯被抑制。Tang等［9］研究發(fā)現(xiàn)在肝癌MHCC97-L細(xì)胞系通過siRNA干擾下調(diào)TMSG1的表達(dá)能夠明顯增加細(xì)胞外氫離子的濃度，提示通過抑制TMSG1的表達(dá)和V-ATP酶的活性可能提高了細(xì)胞膜氫離子泵的轉(zhuǎn)運功能從而增加了腫瘤細(xì)胞增殖與浸潤的能力。但是TMSG1在胃癌中表達(dá)的臨床意義及與患者的預(yù)后關(guān)系目前尚不十分清楚。

本研究采用免疫組織化學(xué)的方法檢測了胃癌中TMSG1的蛋白的表達(dá)發(fā)現(xiàn)，胃癌中TMSG1的蛋白表達(dá)較胃良性組織中明顯下降(P＜0.05)，說明在胃癌的發(fā)生過程中TMSG1的表達(dá)明顯被抑制，這可能與腫瘤的增殖浸潤有關(guān)。進(jìn)一步分析TMSG1的蛋白表達(dá)與患者的臨床病理因素的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，TMSG1的蛋白表達(dá)與患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，腫瘤的分期密切相關(guān)(P＜0.05)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的TMSG1的蛋白表達(dá)及mRNA的表達(dá)明顯低于淋巴結(jié)陰性組，且TNM分期愈晚其TMSG1的蛋白表達(dá)及mRNA的表達(dá)越下降，說明可能在腫瘤的進(jìn)展過程中TMSG1的表達(dá)被顯著抑制。在患者的預(yù)后分析中作者發(fā)現(xiàn)TMSG1的表達(dá)與患者的預(yù)后明顯相關(guān)，TMSG1高表達(dá)患者的總生存期(OS)及無病生存期(PFS)明顯高于TMSG1低表達(dá)組患者，在多因素生存分析中進(jìn)一步表明TMSG1的表達(dá)是患者的一個獨立預(yù)后因素，這與Wang等研究結(jié)果相同，TMSG1的表達(dá)的減少與缺失是膀胱癌腫瘤轉(zhuǎn)移及無病生成期的一個獨立預(yù)后標(biāo)記，尤其在腫瘤的早期階段它是一個非常重要的預(yù)后參考指標(biāo)。

綜上所述通過使用免疫組織化學(xué)分析TMSG1的蛋白的表達(dá)與患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，腫瘤的臨床分期(TNM)及患者的預(yù)后密切相關(guān)，進(jìn)一步證實了TMSG1的表達(dá)與胃癌的進(jìn)展及預(yù)后密切相關(guān)，對判斷臨床患者的病情發(fā)展具有重要的指導(dǎo)意義。當(dāng)然由于本實驗的樣本量較少，這仍然需要大樣本前瞻性的實驗來進(jìn)一步證實，并且需要進(jìn)一步了解TMSG1抑制腫瘤增殖浸潤的具體調(diào)控機(jī)制，希望未來TMSG1能夠成為治療胃癌浸潤轉(zhuǎn)移的一個新的治療靶點。

［1］ Su J，You JF，Zhen J，et al．Overexpression of tumor metastasis suppressor gene 1 suppresses proliferation and invasion，but enhances apoptosis of human breast cancer cells MDA-MB-231 cells．Chin JPathol，2007，36(2):672-676.

［2］ Mesicek J，Lee H，F(xiàn)eldman T，etal．Ceramide synthases2，5，and 6 confer distinct roles in radiationinduced apoptosis in HeLa cells．Cell Signal，2010，22(3):1300-1307.

［3］ Moon HG，Jeong SH，Ju YT，et al．Upregulation of RhoGDI2 in human breast cancer and its prognostic implications．Cancer Res Treat，2010，42(7):151-156.

［4］ Zhang C，Lv F，Zhou L，et al．Effect of verapamil on the expression of EGFR and NM23 in A549 human lung cancer cells．Anticancer Res，2009，29(1):27-32.

［5］ Wu CY，Yan J，Yang YF，et al．Overexpression ofKAI1 induces autophagy and increases MiaPaCa-2 cell survival through the phosphorylation of extracellular signal-regulated kinases．Biochem Biophys Res Commun，2011，404(5):802-808.

［6］ Cao GL，Chu MX，F(xiàn)ang L，et al．Analysis on DNA sequence of KiSS-1 gene and its association with litter size in goats．Mol Biol Rep，2010，37(3):3921-3929.

［7］ Chen SH，Bubb MR，Yarmola EG，et al．Vacuolar H-ATPase binding to microfilaments:regulation in response to phosphatidylinositol3-kinase activity and detailed characterization of the actinbinding site in subunit B．JBiol Chem，2004，279(5):7988-7998.

［8］ Su J，You JF，Zhen J，etal．Studies of tumormetastasis suppressor gene TMSG-1 inhibited proliferation and invasion of prostate cancer．Chin JCancer，2008，30(2):404-407.

［9］ Tang N，You HY，Jin J．Small interfering RNA targeting LASS2 gene enhances invasion capacity of hepatocellular carcinoma cells．Tumor，2009，29(2):399-403.