豬圓環病毒2型引起急性肺水腫新癥狀

許瑞

（駐馬店市動物疫病預防控制中心，河南駐馬店 463000）

豬圓環病毒2型引起急性肺水腫新癥狀

許瑞

（駐馬店市動物疫病預防控制中心，河南駐馬店 463000）

豬圓環病毒（PCV）是迄今發現的最小動物病毒之一，現已知PCV有兩個血清型，即PCV-1和PCV-2。PCV-1為非致病性的病毒，PCV-2為致病性的病毒。PCV-2是斷奶仔豬多系統衰竭綜合征（PMWS）的主要病原，PMWS最早發現于加拿大。最近在美國有學者報道，豬圓環病毒出現一種新的表現癥狀，稱為急性肺水腫型(APE），它主要影響剛出生和剛斷奶的小豬，死亡率可達20%，臨床癥狀包括急性呼吸困難隨后導致迅速死亡，有的豬通常死亡前未見任何臨床癥狀。下面筆者就在美國發生的急性肺水腫型圓環病毒病做一下介紹，供大家參考。

一、APE豬的主要臨床癥狀和病理學變化

2009年，有學者報道，在美國中西部，免疫過圓環2型疫苗的豬出現了急性肺炎癥狀，主要發病豬為剛出生和剛斷奶的小豬。臨床癥狀包括急性呼吸困難、喘氣，隨后導致迅速死亡，皮膚也沒有變化，有的豬通常死亡前未見臨床癥狀。我們知道，一般情況下豬圓環病毒2型（PCV-2）與豬群中發生的許多疾病密切相關，主要引起斷奶仔豬多系統衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎與腎病綜合征（PDNS）、斷奶豬和育肥豬的呼吸道病綜合征（PRDC）、幼齡仔豬的先天性震顫等疾病，統稱為圓環病毒相關疾病（PCVAD），同時可造成免疫抑制。而這種急性肺炎導致迅速死亡的現象很容易與其他呼吸道病相混淆，進而造成誤診。

解剖APE豬，其病理變化主要為肺部病變，顯示胸腔充滿清亮的積液，肺部潮濕和厚重， 呈現中度或重度的小葉性肺炎，大部分呈現大葉性肺炎，有的肺有片狀出血(圖1A）。肺的顯微鏡檢查顯示小葉內膈葉彌漫性水腫膨脹，從而導致肺水腫的出現，肺間質中有大量巨噬細胞和淋巴細胞浸潤，血管壁壞死破裂(圖1B），周圍間隙是導致肺水腫的原因(圖1C）。多數感染豬淋巴系統衰竭，個別有鼻炎癥狀。

二、為什么說APE癥狀是由PCV-2病毒引起

Cino-Ozuna等調查了堪薩斯和內布拉斯加州相隔不少于200米的8個農場，發現在其中四個農場7周齡和14周齡的豬均出現了APE癥狀，其中7周齡的保育豬臨床癥狀非常明顯。用PCR和免疫組織化學診斷方法來確診圓環病毒2型感染。結果顯示在同一農場的同一群豬中呈現急性肺炎的豬和無臨床癥狀豬的數量幾乎相等。所有急性肺炎豬群血清和組織中PCV-2呈陽性。不同的PCR檢測包括oligo核酸探針針對PCV2a和PCV2b的檢測發現PCV2b是優勢基因型，而且肺、淋巴結和脾等各組織勻漿的PCR循環低至7個循環，說明PCV-2還在豬群中大量存在。相反，無臨床癥狀的豬群的13份血清樣本中僅2份PCV-2陽性，PCV-2病毒在急性肺炎和無臨床癥狀豬群之間有明顯的不同。PCV-2病毒大量存在于急性肺炎豬群，且在肺和淋巴結免疫組織化學反應陽性得到進一步確診。另外在肺血管內壁單核細胞的細胞質中可以觀察到PCV-2抗原，且在血管內皮細胞中也可以觀察到PCV-2抗原(圖1D）。病毒蛋白在內皮細胞核的定位表明其可能是病毒復制的活性部位。

有人利用免疫熒光法對PCV-2特異性抗體進行檢測(IFA），其中所有的豬均注射圓環病毒2型疫苗，免疫熒光法不能區分注射疫苗產生的抗體和野毒感染產生的抗體，但是，急性肺炎豬的抗體有很重要的特征，例如，9份急性肺炎豬中有5份檢測不到抗體，提示我們，急性肺炎豬任何PCV-2型抗體不管來自母源抗體或者疫苗源抗體都缺失。

圖1 APE豬的解剖學和顯微鏡組織學特征。A：急性死亡豬的胸腔內含有大量的積液，肺部明顯水腫，淤血，出血。B：肺薄膜用蘇木精-曙紅染色。表示肺間質有巨噬細胞、淋巴細胞、漿細胞浸潤和動脈管壁平滑肌纖維素樣壞死。C：肺水腫的肺薄片的組織蘇木精-伊紅染色。呈現明顯的周圍動脈擴張（箭頭）。D：肺的PCV-2抗原免疫組織化學染色。動脈管腔內許多細胞（單核細胞）的細胞質染色和動脈壁內皮細胞核染色（箭頭）。

除了圓環病毒之外，作為輔助因子，Cino-Ozuna等還調查了其他幾種病毒（豬藍耳病病毒PRRSV、豬巨細胞病毒PCMV、豬輸血傳播病毒TTV、豬流感病毒SI等）。豬藍耳病病毒是一個常見的與正在感染和嚴重感染PCVAD的病例相關的病毒，盡管在Cino-Ozuna調查的其中一農場曾經有過藍耳病史，但藍耳病毒PCR診斷和血清學檢測顯示所有急性肺炎豬群藍耳病毒陰性，另外，四個感染APE的農場有兩個場整體藍耳病毒陰性。豬鼻炎的存在暗示PCMV的可能性，Hamel等報道，血清和組織樣本的PCMV的PCR檢測顯示PCMV（豬巨細胞病毒）在APE豬和無臨床癥狀的豬群之間的流行情況無明顯的差別。近年來，豬輸血傳播病毒TTV病毒被認為與圓環病毒相關疾病具有協同作用。Segale，s等PCR檢測TTV-1和TTV-2顯示TTV陽性率在APE豬和無臨床癥狀的豬群中基本相同。豬流感的臨床癥狀的缺失與APE感染豬鼻腔試紙的陰性結果可以排除豬流感的可能性。其他普通病毒的結果相似，顯示與APE沒有明顯關系。

三、APE發生原因的探討

1.PCV-2基因突變。為什么免疫過圓環病毒2型的豬還會發生急性肺炎？一個可能原因是PCV-2衣殼蛋白基因突變從而逃離了抗體的保護。從同一農場的4個急性肺炎豬的PCV-2的ORF2的肽鏈序列是從組織病料進行PCR擴增而得，這4個PCR擴增產物測序序列基本相同，僅有一條序列第30位氨基酸由V變成了L，其中一條急性肺炎病例的PCV-2的ORF2的肽鏈序列D71923，與在美國中西部2005-2006年暴發PCVAD時分離的11條具有代表性的堪薩斯序列相比很相似，并且與其中四條237-A，237-C，237-D，和D-28-1序列完全相同。因此，與APE相關的圓環病毒2型是在該區域一段時期內流行的代表性病毒，也很容易啟發我們想到可能PCV-2其中某個蛋白基因的突變就有可能脫離保護或者引起新的癥狀。

2.豬圓環病毒2型疫苗的廣泛使用。PCV-2是一種在環境中普遍存在的病毒，各生長階段的豬都易感，后備母豬在6～8周齡后進行最后一次PCV-2疫苗免疫，抗體水平逐漸消退，分娩時，初乳中母源抗體的低水平就不能充分地保護新生仔豬 PCV-2感染。在PCV-2疫苗發揮作用之前，新生仔豬可以被在母豬繁殖之前一定程度的自然感染產生的母源抗體保護。因此，APE可能是一個意想不到的由于PCV-2疫苗的廣泛使用而導致的后果。

四、如何預防APE的發生

PCVAD被描述為育肥豬的慢性漸進性最終衰竭死亡的傳染性動物疾病，肺水腫是由圓環病毒2型導致的免疫抑制或者功能障礙從而引起典型的細菌繼發感染或者病毒感染的結果。相反，APE豬死亡率的傳播很快速，容易感染健康豬， APE更容易感染年幼豬，不與其他的傳染性疾病相關，其發病機理起初是年幼豬肺內單核細胞和血管壁內皮細胞內有大量病毒增殖，導致機體更易感染并且有助于更高水平的病毒復制，感染常發生于接種疫苗之前的仔豬，在缺乏母源抗體保護水平的情況下，APE易感豬體內缺乏相應的抗體保護水平，而在免疫之前感染。所以，一種使幼豬避免APE的方法是早期免疫。另一種方法是做好繁殖動物的抗體跟蹤監測，當PCV-2特異性抗體水平低的時候進行及時補免和補防來提高和改善。

另外就是適合本場科學合理的免疫程序，不要千篇一律，照搬照抄，否則會適得其反，達不到相應的預防疾病的效果，浪費人力、物力和財力；還有至關重要的一點就是做好日常飼養管理工作，這也是一種預防的方法，不能忽視，把工作做在平時，對防制工作很重要。以下是防制中的幾個具體建議。

1.加強飼養管理。降低飼養密度，實行嚴格的全進全出制和混群制度，減少環境應激因素，控制并發感染，保證豬群具有穩定的免疫狀態，加強豬場內部、外部的生物安全措施，購豬時保證豬只來自清潔的豬場是預防控制本病、降低經濟損失的有效措施。

2.做好豬主要傳染病的預防免疫和免疫效果監測。雖然APE與其他傳染病無明顯的聯系，但PCV-2與其相關豬病的發生還需要另外的條件或共同因素才能誘發臨床癥狀，且常見于與其他病毒病或細菌病混合感染時。所以目前世界各國控制本病的經驗是做好適當的主動免疫和被動免疫，做好豬場豬瘟、豬偽狂犬病、豬細小病毒病、氣喘病和藍耳病等疫苗的免疫接種，確保胎兒和吮乳期仔豬的安全是重中之重。一般規模豬場各方面免疫做的還都比較好，有些大型豬場和種豬場免疫效果的跟蹤監測做的也很好，主要還是一些散養戶和小規模的豬場做的不夠，也很容易發生疾病，這方面要引起注意。

3.人工被動免疫和自家疫苗的使用。可采取血清療法。從豬場的育肥豬采血(健康的淘汰種豬血最好），分離血清，給斷乳期的仔豬腹腔注射，最好是本場內的豬，這種方法見效快，立竿見影。豬場一旦發生本病，可把發病豬的內臟加工成自家疫苗，據臨床實踐，效果不錯。但要注意滅活要徹底，保證其安全性，以免散毒。

4.“感染”物質的主動免疫。“感染”物質指本豬場感染豬的糞便、死產胎豬、木乃伊胎等，用來喂飼母豬，尤其是初產母豬在配種前喂給，能起到較好的效果。如有一定抗體的母豬在懷孕80 d以后再作補充喂飼，則可產生較高免疫水平，并通過初乳傳遞給仔豬。這種方法，不僅對防制本病、保護胎豬和吮乳仔豬的健康有效，而且對其他腸道病毒引起的繁殖障礙也有良好的效果。但使用本法要十分慎重，如果場內有小豬會造成人工感染。

5.藥物預防。預防性投藥和治療，對控制細菌源性的混合感染或繼發感染，是非常可取的，但注意要適當投藥，不能濫用藥以免造成細菌耐藥性的產生。

備注：本文編譯自《Character ization of a New Disease Syndrome As sociated with Porcine Circovirus Type 2 in Previously Vaccinated Herds》A da G. Cino-y， Richard Hesse. C linical Veterinary Microbiol.[J] ，May 2011; 49: 2012 - 2016.