對酶免四項弱反應(yīng)性獻血者的追蹤檢測

孫庶麗 劉勤曉 李杰

對酶免四項弱反應(yīng)性獻血者的追蹤檢測

孫庶麗 劉勤曉 李杰

目的 對酶免四項弱反應(yīng)性獻血者進行追蹤檢測, 了解其假陽性比率, 為弱反應(yīng)性獻血者的屏蔽及日后歸隊提供參考資料。方法 對100例弱反應(yīng)性獻血者在6個月以后進行追蹤檢測, 標本均按原檢測不合格項目分類, 用檢驗科目前正在使用的初、復(fù)檢試劑進行檢測。結(jié)果 57%的獻血者仍呈反應(yīng)性, 而43%的獻血者呈現(xiàn)無反應(yīng)性, 且所檢測標本的S/CO值均處于0.7~2之間, 均屬弱反應(yīng)性。結(jié)論 弱反應(yīng)性獻血者中存在很大程度的假陽性, 全部對其進行屏蔽, 必然造成大量血液的浪費和愛心獻血者的流失, 期待相關(guān)部門對獻血者的屏蔽范圍及歸隊管理出臺明確的要求, 尤其是對弱反應(yīng)性獻血者是否需要屏蔽及假陽性獻血者的日后歸隊管理制定統(tǒng)一的標準。

弱反應(yīng)性；追蹤檢測；屏蔽；歸隊

弱反應(yīng)性獻血者指經(jīng)再檢后仍處于單試劑反應(yīng)性/灰區(qū)或雙試劑灰區(qū)的獻血者。處于血液安全性的考慮, 所獻血液報廢, 獻血者屏蔽。通過對2006~2008年威海市中心血站檢測為弱反應(yīng)性獻血者在6個月以后進行追蹤檢測分析, 為弱反應(yīng)性獻血者的屏蔽及日后歸隊提供參考資料。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2006年1月1日~2008年12月31日100例檢測結(jié)果為弱反應(yīng)性的獻血者。

1.2 試劑與設(shè)備 HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP試劑均為中國藥品生物制品檢定所批批檢檢定合格的國產(chǎn)試劑,且均處于效期內(nèi)；RSP-150加樣系統(tǒng)(瑞士)；FAME24/20后處理(瑞士)。

1.3 方法 對100例弱反應(yīng)性獻血者在6個月以后進行追蹤檢測, 標本均按原檢測不合格項目分類, 用檢驗科目前正在使用的初、復(fù)檢試劑進行檢測。雙試劑反應(yīng)性/灰區(qū)為反應(yīng)性, 雙試劑無反應(yīng)性為無反應(yīng)性, 單試劑反應(yīng)性/灰區(qū)進行雙孔復(fù)試, 仍為反應(yīng)性/灰區(qū)按反應(yīng)性計。

2 結(jié)果

表1 酶免四項弱反應(yīng)性獻血者追蹤檢測結(jié)果［n(%)］

3 討論

酶免檢測因其敏感度高, 操作簡單、易于自動化, 成本低等特點被普遍用于獻血者篩選, 但在實際工作中發(fā)現(xiàn), 其檢測結(jié)果易受獻血者體內(nèi)因素、標本質(zhì)量、試劑、設(shè)備、操作人員等因素的影響致使結(jié)果出現(xiàn)假陽性［1］。本文的研究證實了這一點, 通過對弱反應(yīng)性獻血者在6個月后的追蹤檢測發(fā)現(xiàn)僅有57%仍呈反應(yīng)性, 且所檢測標本的S/CO值均處于0.7~2之間, 均屬弱反應(yīng)性, 而43%的獻血者呈現(xiàn)無反應(yīng)性。說明原弱反應(yīng)性獻血者中存在很大程度的假陽性, 全部對其進行屏蔽, 必然造成大量血液的浪費和愛心獻血者的流失。

追蹤檢測不合格比例由高到低依次是抗-TP＞抗-HCV> HBsAg>抗-HIV, 符合低現(xiàn)患率人群中的假反應(yīng)性率較高現(xiàn)患率人群高的特點［3］。

自2012年7月本站開展核酸檢測以來, 檢驗科將同期所有HBsAg、抗-HCV、抗-HIV初/復(fù)檢結(jié)果為弱反應(yīng)性獻血者標本401例全部納入核酸檢測, 包括HBsAg 122例,抗-HCV 205例, 抗-HIV 74例, 其核酸檢測結(jié)果均為陰性,并將此74例抗-HIV弱反應(yīng)性標本送疾控中心確認, 結(jié)果均為陰性。由此證實401例弱反應(yīng)性標本中不存在真正的陽性標本。迄今為止本站檢出并經(jīng)確認的核酸陽性標本8例均來自酶免雙試劑無反應(yīng)性標本, 酶免弱反應(yīng)性標本中未出現(xiàn)一例核酸陽性。

2013年下半年, 本站采用梅毒螺旋體顆粒凝集試驗(TPPA)對抗-TP弱反應(yīng)性標本進行確認, 迄今為止共確認標本27例, 結(jié)果均為陰性。

我國法規(guī)要求血液檢測使用兩個不同廠家的試劑進行,只要一種試劑出現(xiàn)反應(yīng)性, 血液均要報廢, 目的是兩種試劑互補, 避免真陽性標本的漏檢。但從檢測數(shù)據(jù)看, 采用2次檢測并未增加真陽性標本的檢出能力, 而是增加了假陽性率,造成大量的血液報廢和愛心獻血者的流失。尤其近幾年, 酶免試劑廠家為避免漏檢, 一味提高試劑的靈敏度, 忽視了試劑的特異性, 再加上檢測人員為避免弱反應(yīng)性標本的漏檢,人為加大灰區(qū)范圍, 將灰區(qū)標本按反應(yīng)性計, 導(dǎo)致相當比例合格獻血者被淘汰。實際通過本站的檢測數(shù)據(jù)看, 灰區(qū)標本中未出現(xiàn)一例確認陽性標本。

綜合分析, 產(chǎn)生假陽性的原因包括以下幾方面：①政策原因：我國血液篩查未做確認試驗。②試劑原因：靈敏度高的試劑特異性較低, 不同廠家的試劑包被的抗原或抗體組合不完全相同, 或同一廠家的試劑靈敏度和特異性存在批間差異［2］。③獻血者原因：獻血者體內(nèi)存在某種干擾物質(zhì)。④檢測原因：加樣器、洗板機、酶標儀等設(shè)備故障、人為操作失誤等。⑤心理因素：決策者對漏檢的恐懼和擔憂。

以上種種原因?qū)е? 在處理獻血者結(jié)果時, 為避免陽性標本的漏檢, 人們寧可錯殺一千也不放過一個。

當前, 臨床供血壓力日益加大, 如何在確保血液安全的前提下, 更好地保留愛心獻血者越發(fā)重要。采取適當方法降低酶免檢測假陽性率, 減少假陽性所致的獻血者淘汰成為挽留獻血者的重要措施。

通過本次研究, 作者認為對酶免四項初次檢測為弱反應(yīng)性的獻血者不應(yīng)全部進行屏蔽, 應(yīng)該在半年后進行該項目的EILSA雙試劑追蹤檢測, 檢測結(jié)果仍為有反應(yīng)性則進行永久屏蔽, 檢測結(jié)果為無反應(yīng)性再進行相關(guān)確認試驗, 確認結(jié)果陽性進行永久屏蔽, 確認結(jié)果陰性則該獻血者可繼續(xù)獻血,捐獻的血液仍需經(jīng)常規(guī)2次酶免篩查和血型檢測, 結(jié)果全部合格后, 血液才可應(yīng)用于臨床。

首先血站應(yīng)做好以下幾方面的工作：①選擇合理的檢測模式, 真正起到方法上互補, 避免陽性漏檢；②對酶免試劑質(zhì)量嚴格把關(guān), 在強調(diào)靈敏度的同時加強特異性的控制；③灰區(qū)范圍設(shè)置要合理, 不要盲目擴大灰區(qū)范圍；④酶免檢測弱反應(yīng)性標本, 要進行雙孔復(fù)查, 排除人為因素及設(shè)備問題所致的假陽性。其次建議采供血系統(tǒng)成立酶免四項確認機構(gòu), 對血站重復(fù)檢測為弱反應(yīng)性標本進行確認, 確認結(jié)果作為血液去向和獻血者是否屏蔽的依據(jù)。若確認結(jié)果為陽性則獻血者永久屏蔽, 血液報廢；若確認結(jié)果為陰性則獻血者暫時屏蔽, 本次所獻血液報廢, 6個月后再進行一次酶免復(fù)查, 復(fù)查結(jié)果為無反應(yīng)性解除屏蔽, 復(fù)查結(jié)果仍為有反應(yīng)性則永久屏蔽。

期待相關(guān)部門對獻血者的屏蔽范圍及歸隊管理出臺明確的要求, 尤其是對弱反應(yīng)性獻血者是否需要屏蔽及假陽性獻血者的日后歸隊管理制定統(tǒng)一的標準, 各血站統(tǒng)一遵照執(zhí)行,既可挽留更多的愛心獻血者, 緩解臨床供血壓力, 又體現(xiàn)了對獻血者的愛心呵護, 不至對獻血者的身心造成不良影響。

［1］ 王鳳玲,馮秀河,華麗鳳,等.酶聯(lián)免疫吸附法檢測梅毒抗體假陽性產(chǎn)生的原因探討.實用醫(yī)技雜志, 2007,14(11):1417-1418.

［2］ 符慧杰,徐克前,侯玨,等.梅毒抗體篩查可疑感染獻血者回訪結(jié)果分析.中國輸血雜志, 2010,23(9):724-725.

［3］ 劉宇寧,蔡菊英,劉曉音.血液篩查HBsAg、抗-HCV假反應(yīng)性獻血者歸隊的調(diào)查分析.中國輸血雜志, 2012,25(3):261.

Enzyme detection of four tracks for the weak reaction of blood donor

SON Shu-li, LIU Qin-xiao, LI Jie.Central Blood Bank of Weihai City Weihai 264200, China

Objective Purpose for enzymes from four track weak reaction of blood donor testing and know its false positive rate, for the weak reaction of blood donor screening and subsequent back reference.Methods 100 patients with weak reactivity track testing blood donors after 6 months, the specimens are classified by original detected faulty items, is now beginning, review of clinical laboratory reagents for detection.Results 57% blood donors was still reactivity, 43% blood donor unresponsiveness, and lies between the 0.7-2 S/CO values of the test specimen are weakly reactive.Conclusion Weak reaction sexual blood who in the exists is large degree of fake positive, all on its for shield, necessarily caused large blood of waste and love blood who of loss, looks forward to related sector on blood who of shield range and the back Management introduced clear of requirements, especially on weak reaction sexual blood who is needs shield and the fake positive blood who of future back management developed unified of standard.

Weakly reactive; Trace detection; Screening; Return

264200 威海市中心血站(孫庶麗)；威海市口腔醫(yī)院(劉勤曉)；威海市婦女兒童醫(yī)院(李杰)