酶免四項(xiàng)再檢標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果分析

宮鋒巖 孫庶麗 劉勤曉

酶免四項(xiàng)再檢標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果分析

宮鋒巖 孫庶麗 劉勤曉

目的 對(duì)HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP酶免四項(xiàng)中再檢標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行追溯,分析造成再檢的原因, 為是否對(duì)單試劑陽(yáng)性獻(xiàn)血者進(jìn)行永久屏蔽提供參考依據(jù)。方法 追溯分析2010年1月1日~2012年12月31日本站無(wú)償獻(xiàn)血者酶免四項(xiàng)再檢標(biāo)本2329例, 用原試劑進(jìn)行雙孔再檢的情況。結(jié)果 再檢標(biāo)本66.98%為陰性, 陽(yáng)性符合性僅為33.02%。陽(yáng)性獻(xiàn)血者中除抗-TP主要為雙試劑陽(yáng)性報(bào)廢外, 其他3項(xiàng)均以單試劑陽(yáng)性報(bào)廢為主, 尤其是抗-HIV, 單試劑陽(yáng)性報(bào)廢占87.10%。結(jié)論單試劑陽(yáng)性獻(xiàn)血者永久屏蔽會(huì)造成一定比例合格獻(xiàn)血者的流失。建議對(duì)單試劑陽(yáng)性獻(xiàn)血者實(shí)行暫時(shí)屏蔽, 并定期追蹤復(fù)查, 復(fù)查陰性者可解除屏蔽, 復(fù)查陽(yáng)性者再進(jìn)行永久屏蔽較為合理。

酶免四項(xiàng)；再檢；屏蔽

酶免四項(xiàng)再檢標(biāo)本指獻(xiàn)血者標(biāo)本在初檢、復(fù)檢兩次檢測(cè)中, HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP四項(xiàng)中1項(xiàng)或1項(xiàng)以上單試劑陽(yáng)性或處于灰區(qū)或雙試劑處于灰區(qū)的標(biāo)本, 經(jīng)用原試劑雙孔復(fù)試后, 再檢陽(yáng)性獻(xiàn)血者屏蔽, 以后不能獻(xiàn)血。本文對(duì)威海市中心血站2010年1月1日~2012年12月31日所有酶免四項(xiàng)再檢標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行追溯, 分析造成再檢的原因, 為是否對(duì)弱陽(yáng)性獻(xiàn)血者進(jìn)行永久屏蔽提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010年1月1日~2012年12月31日本站所有酶免四項(xiàng)再檢標(biāo)本2329例, 其中HBsAg 803例；抗-HCV 720例；抗-HIV 277例；抗-TP 529例。

1.2 試劑與設(shè)備 HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP初復(fù)檢試劑均為中國(guó)藥品生物制品檢定所批批檢檢定合格的兩種不同廠家的國(guó)產(chǎn)試劑, 且均處于效期內(nèi)；RSP-150加樣系統(tǒng)(瑞士)；FAME24/20后處理(瑞士)。

1.3 方法 采用兩種不同廠家的酶免試劑對(duì)獻(xiàn)血者標(biāo)本進(jìn)行HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP的檢測(cè), 四項(xiàng)中1項(xiàng)或1項(xiàng)以上單試劑陽(yáng)性或處于灰區(qū)或雙試劑處于灰區(qū)的標(biāo)本, 經(jīng)用原試劑雙孔復(fù)試后, 雙孔均陰為陰性, 雙孔均陽(yáng)或一陰一陽(yáng)為陽(yáng)性, 仍處于灰區(qū)按陽(yáng)性計(jì)算, 再檢陽(yáng)性獻(xiàn)血者屏蔽, 以后不能獻(xiàn)血。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用PASW18.0統(tǒng)計(jì)分析軟件, 采用χ2檢驗(yàn), P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2329例再檢標(biāo)本中1560例為陰性, 占66.98%, 769例為陽(yáng)性, 僅占33.02%, 表明初次檢測(cè)陽(yáng)性的2329例標(biāo)本中, 66.98%并非真正的陽(yáng)性, 而是操作污染所致。見表1。

表1 2010~2012年酶免四項(xiàng)再檢陽(yáng)性統(tǒng)計(jì)［n(%)］

表2 2010~2012年酶免四項(xiàng)陽(yáng)性統(tǒng)計(jì)［n(%)］

2.2 2010~2012年酶免檢測(cè)陽(yáng)性淘汰1544人中, 雙試劑陽(yáng)性775人, 占50.19%, 單試劑陽(yáng)性769人, 占49.81%, 表明本站所用兩家試劑檢測(cè)符合性不高, 尤其是抗-HIV試劑, 雙試劑陽(yáng)性僅占12.9%。見表2。

3 討論

為保障血液安全, 相關(guān)法規(guī)要求血液檢測(cè)必須使用2種不同的試劑檢測(cè)2遍［1］, 目的是為了2種試劑互補(bǔ), 提高真陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)能力。只有2遍檢測(cè)結(jié)果均合格, 血液才能發(fā)放使用［2］。否則, 血液報(bào)廢, 該獻(xiàn)血者屏蔽。

本試驗(yàn)所有陽(yáng)性報(bào)廢中除抗-TP主要為雙試劑陽(yáng)性報(bào)廢外, 其他3項(xiàng)均以單試劑陽(yáng)性報(bào)廢為主, 尤以抗-HIV更為明顯。抗-HIV陽(yáng)性標(biāo)本中, 雙試劑陽(yáng)性僅為16份, 108份為單試劑陽(yáng)性, 通過(guò)CDC的確認(rèn)結(jié)果看, 8份確認(rèn)陽(yáng)性均為雙試劑強(qiáng)陽(yáng)性標(biāo)本, 108份單試劑陽(yáng)性均為假陽(yáng)性, 與實(shí)行兩遍檢測(cè)的初衷不符,與文獻(xiàn)報(bào)道一致［3］。說(shuō)明近幾年, 大家普遍把注意力集中在窗口期問題上, 試劑廠家想方設(shè)法提高試劑靈敏度來(lái)減少漏檢, 往往忽視了假陽(yáng)性的淘汰問題［4,5］,造成一定比例獻(xiàn)血者的流失。原因是靈敏度高的ELISA試劑假陽(yáng)性就多, 靈敏度與特異性成反比［6］。

再檢標(biāo)本中66.98%為陰性, 陽(yáng)性符合性僅為33.02%, 表明初次檢測(cè)陽(yáng)性的2329例標(biāo)本中, 66.98%并非真正的陽(yáng)性,其初試有反應(yīng)性可能由于假反應(yīng)性或技術(shù)誤差導(dǎo)致, 檢測(cè)結(jié)論為無(wú)反應(yīng)性, 血液可放行供臨床使用［2］。產(chǎn)生的原因包括以下幾方面：①檢測(cè)人員的責(zé)任心不強(qiáng)或技術(shù)不夠熟練, 對(duì)標(biāo)本離心不徹底、標(biāo)本溶血、加樣過(guò)程吸入紅細(xì)胞、孵育時(shí)間和溫度掌握不準(zhǔn)確、洗滌針頭堵塞、洗板位設(shè)置不合理、讀板光路老化等均可導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果錯(cuò)誤［7］。②儀器設(shè)備的使用維護(hù)不到位, 加樣針密封塞漏氣、設(shè)備未按檢定周期進(jìn)行校準(zhǔn)檢定、設(shè)備管路未定期清洗出現(xiàn)霉變等直接影響檢測(cè)結(jié)果。③實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理不規(guī)范, 室內(nèi)質(zhì)量控制措施有效性差。建議采取以下措施來(lái)減少假陽(yáng)性：①加大實(shí)驗(yàn)室人員的培訓(xùn)與考核力度, 使其具備高度的責(zé)任心和熟練的操作技能, 對(duì)檢驗(yàn)工作的重要性有充分的認(rèn)識(shí), 針對(duì)日常工作中出現(xiàn)的問題能主動(dòng)分析, 及時(shí)采取糾正及預(yù)防措施。②建立詳盡規(guī)范的SOP, 并保證被嚴(yán)格執(zhí)行。③加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室管理, 從檢測(cè)試劑的選擇、設(shè)備的定期維護(hù)校準(zhǔn)、環(huán)境溫濕度的控制等細(xì)節(jié)入手, 盡量減少試劑、設(shè)備、環(huán)境因素對(duì)酶免檢測(cè)結(jié)果的影響。

當(dāng)前, 臨床供血壓力日益增大, 如何在保證血液質(zhì)量安全的前提下, 盡可能地保留獻(xiàn)血者尤為重要［8］。針對(duì)假陽(yáng)性問題, 如何制定符合我國(guó)國(guó)情的假陽(yáng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)策略受到諸多學(xué)者的關(guān)注［9,10］。通過(guò)此次調(diào)查分析, 建議對(duì)單試劑初試有反應(yīng)性標(biāo)本進(jìn)行再次核查, 再次核查仍為有反應(yīng)性可實(shí)行暫時(shí)屏蔽, 并定期進(jìn)行追蹤復(fù)查［11］, 復(fù)查陰性者解除屏蔽,并召回獻(xiàn)血者, 復(fù)查陽(yáng)性者再考慮永久屏蔽, 并給獻(xiàn)血者以合理的解釋。

［1］ 全血及成分血質(zhì)量要求.中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB18469-2012.中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.

［2］ 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.血站技術(shù)操作規(guī)程.衛(wèi)醫(yī)政發(fā)［2012］1號(hào)附件.

［3］ 吳亞玲,祝宏,勵(lì)曉濤,等.獻(xiàn)血者抗-HCV陽(yáng)性標(biāo)本中RIRA確認(rèn)情況的研究.中國(guó)輸血雜志, 2010,23(11):941.

［4］ 吳為民,季陽(yáng),王迅,等.全國(guó)血站系統(tǒng)檢驗(yàn)室室間質(zhì)控調(diào)查分析.中國(guó)輸血雜志, 2000,13(4):205-208.

［5］ 鄭嵐,王迅,許莉萍,等.全國(guó)采供血機(jī)構(gòu)五項(xiàng)傳染病標(biāo)志物檢測(cè)室間質(zhì)量評(píng)價(jià).臨床輸血與檢驗(yàn), 2005,7(1):69-71.

［6］ 趙江燕,毛焱,桑葉,等.兩步法及中和試驗(yàn)在HBsAg檢測(cè)中的應(yīng)用.臨床輸血與檢驗(yàn), 2004,6(3):199-200.

［7］ 張德志.關(guān)于ELISA檢測(cè)影響因素分析.中外醫(yī)學(xué)研究, 2010, 8(4):53.

［8］ 劉宇寧,蔡菊英,劉曉音.血液篩查HBsAg、抗-HCV假陽(yáng)性獻(xiàn)血者歸隊(duì)的調(diào)查分析.中國(guó)輸血雜志, 2012,25(3):261.

［9］ 郭永建,姚鳳蘭,林授,等.HIV-1和HCV核酸檢測(cè)、血液處置和獻(xiàn)血者屏蔽與歸隊(duì)指引(上).中國(guó)輸血雜志, 2011, 24(1): 79-84.

［10］ 葛紅衛(wèi),林授,汪德海,等.HIV-1和HCV核酸檢測(cè)、血液處置和獻(xiàn)血者屏蔽與歸隊(duì)指引(下).中國(guó)輸血雜志, 2011, 24(2): 172-176.

［11］ 王迅,賈堯,伍曉菲,等.血液肝炎病毒篩查試驗(yàn)結(jié)果的分析.微生物與感染, 2006,3(3):143-146.

Enzyme analysis of results in detection of four further specimens

GONG Feng-yan, SUN Shu-li, LIU Qin-xiao. Department of Laboratory Central Blood Bank of Weihai City, Weihai 264200, China

Objective To analyze the reasons for check again in the four specimens detection of HBsAg, anti-HCV, anti-TP, in order to provide a reference for whether to shield permanently for single reagent positive blood donors.Methods Retrospective analysis on report from January 1,2010 to December 31, 2012 enzymes from blood donors specimens of four further 2,329 cases, double again with the original reagent test.Results Found a specimen of 66.98% was negative, positive compliance was only 33.02%.Anti-TP-positive blood donors in addition to the main positive for double reagent scrap outside while the other 3 were dominated by single reagent positive scrap, especially anti--HIV, single reagent positive scrap accounted for 87.1%.Conclusion Single reagent positive conclusion permanent screening of blood donors will result in loss of certain percentage of eligible blood donors.Recommended for single reagent temporarily-positive blood donors screened, and regular follow-up review, review the negative can be lifted by shielding, review positive and permanent masking more reasonable.

Enzyme four； Check again；Shield

264200 山東省威海市中心血站檢驗(yàn)科(宮鋒巖)，質(zhì)管科(孫庶麗)；威海市口腔醫(yī)院麻醉科(劉勤曉)