國內不同廠家替米沙坦片與原研制劑的溶出曲線對比分析＊

賈孟良，謝守霞，楊紅英，練宏新，王 玉

(廣東省深圳市人民醫院·暨南大學第二臨床醫學院，廣東 深圳 518020)

替米沙坦為高選擇性血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)受體拮抗劑，由德國勃林格殷格翰公司開發，1999年在美國首次上市，用于高血壓治療[1]。替米沙坦在水和pH=3～9范圍內幾乎不溶，口服生物利用度為50%[1]。為考察替米沙坦片的質量，按照2010年版《中國藥典(二部)》附錄ⅩC第二法，參照文獻[2]用高效液相色譜法定量，比較了市售4個廠家間的替米沙坦片及與原研制劑的體外溶出曲線的相似性。現報道如下。

1 儀器與試藥

RCZ－8B型溶出儀(天津天大天發科技有限公司);BP211D型十萬分之一電子天平(德國賽多利斯);ZKT－7F型真空脫氣機(天津天大天發科技有限公司);Waters2695型高效液相色譜儀－2487UV檢測器(沃特世科技有限公司)。替米沙坦對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號為 144701－48－4，含量98.9%);國外A企業替米沙坦原研制劑(勃林格殷格翰，商品名 Micardis，每片 80 mg)，國內B企業替米沙坦片(每片40mg)，國內C企業替米沙坦片(每片40 mg)，國內D企業替米沙坦片(每片40mg)，國內E企業替米沙坦片(每片40 mg);鹽酸;試驗所用試劑均為分析純，水為超純水。

圖1 替米沙坦的高效液相色譜圖

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱:WatersSymmetry C18柱(250mm ×4.6mm，5μm);流動相:乙腈－水 －冰乙酸(500∶500 ∶1;)流速:1.0 mL/min;檢測波長:210 nm;進樣量:10μL;柱溫:30℃[3]。色譜圖見圖1。

2.2 溶出度試驗條件

按照2010年版《中國藥典(二部)》附錄ⅩC第二法(槳法)，以pH=7.4磷酸鹽緩沖溶液1 000 mL為溶出介質，溶出溫度(37±0.5)℃，轉速50 r/min，依法操作，按擬訂色譜條件測定。

2.3 溶液制備

精密稱取替米沙坦對照品 0.025 68 g，以流動相稀釋至50mL，混均得 513.6μg/mL對照品貯備液。溶出介質為 pH=7.4磷酸鹽緩沖溶液，取磷酸二氫鉀6.8 g和0.9 g氫氧化鈉，加水1 000mL，搖均，調 pH 至 7.4。

2.4 方法學考察

波長選擇與線性關系考察:精密稱取替米沙坦對照品貯備液1mL，用流動相稀釋至200mL，于200～400 nm波長范圍內進行掃描，測定其最大吸收波長為210 nm。分別精密稱取替米沙坦貯備液 1mL 置 10，25，50，100，200，500mL 容量瓶中，用溶出介質稀釋至刻度，搖勻，以溶出介質為空白，用高效液相色譜法在210nm波長處測得峰面積，以峰面積(Y)對質量濃度(X)進行線性回歸，得回歸方程 Y=29.171 4X+0.003 9，R2=1.000 0(n=6)。結果表明，替米沙坦質量濃度在1～50mg/L范圍內與峰面積線性關系良好。

精密度試驗:精密稱取替米沙坦對照品貯備液0.5，2，3.5mL，定容于 50 mL 容量瓶中，分別得 5.136，20.544，35.952 μg/mL的測定液，進行日內精密度測試，分別于 0，1，4，9，16，24 h 時進樣測定。結果的 RSD=0.023%(n=3)，表明儀器精密度良好。

加樣回收試驗:精密稱取替米沙坦細粉適量(相當于5mg替米沙坦)，置100mL容量瓶中，將對照品3，5，8mg分別加入，用溶出介質定容至刻度，搖勻，濾過，進樣10μL，測定峰面積，計算回收率。結果見表1。

表1 不同企業產品的替米沙坦含量測定與加樣回收試驗結果

2.5 溶出曲線測定[3]

量取經脫氣的溶出介質1 000mL于溶出杯中，加熱使溶出介質保持在(37±0.5)℃范圍內，調整轉速使其穩定在75 r/min。取供試品6粒，分別置6個轉籃中，將轉籃降到燒杯內，立即計時，并定時在 5，10，15，20，30，45，60min 取樣 10 mL(及時補液)，立即用0.8μm濾膜過濾后，用高效液相色譜法進行定量計算，得不同時間點的累積溶出率。

Q為各時間點校正后累積溶出量，Cn為各時間點取出后的樣品質量濃度(稀釋前);L為制劑標示量(L/V2單位需與 Cn一致);V1為各時間點固定取樣體積;V2為溶出介質體積。

溶出曲線見圖 2。根據 Weibull方程 InIn[1/(1－Ft)]=m in t+in A，求出不同廠家替米沙坦片的溶出參數 T50(藥物溶出50%的時間)、TD(藥物溶出 63.2%的時間)及 m(參數 m)，見表2。并對其進行國內廠家與進口制劑的兩兩 t檢驗，由表3可知，A 廠家與 B，C，D，E 4 個廠家的溶出參數 T50，TD，T80，m 值均無顯著性差異(P ＞0.05，t=1.812，df=10)。

圖2 5個廠家的替米沙坦片累積溶出曲線

表2 不同廠家替米沙坦片的釋放參數

表3 對照片與國產替米沙坦片的 t值檢驗表

3 討論

高效液相色譜法是常用的檢驗分離方法，具有定量準確、專屬性強等優點，操作簡單，適用于快速分析試驗采用。在以溶出介質pH=7.4的磷酸鹽緩沖溶液中，比較A廠家與B，C，D，E廠家的溶出參數，經雙單側 t檢驗進行分析，B，C，D，E 4個廠家生產的替米沙坦片與A廠家生產的原研制劑均可在35min內溶出標示量的85%以上，溶出曲線基本一致。由表3可見，B，C，D，E 4個廠家的溶出參數與進口對照片均無顯著性差異，質量可靠。溶出度是藥品質量控制的指標之一，固體制劑的溶出度直接影響藥品的體內生物利用度和臨床療效。因此，應嚴格按照藥典的質量標準控制產品內在質量，保證用藥的合理性和安全性。

[1]楊惠娣，徐 彬.降壓型藥替米沙坦[J].世界臨床藥物，2003，24(11):695－697.

[2]Kurade VP，Pai MG，Gude R.RP－HPLC Estimation of Ramipril and Telmisartan in Tablets[J].Indian JPharm Sci，2009 ，71(2):148 － 151.

[3]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:中國醫藥科技出版社，2010:附錄ⅤD.