高效液相色譜法測定鹽酸西布曲明滴丸的含量

萬維香，朱鵬祥

(江蘇省泰州市人民醫院，江蘇 泰州 225300)

鹽酸西布曲明為作用于中樞的口服體重調節劑，藥理作用為抑制去甲腎上腺素和5－羥色胺的再攝取，增強生理性飽腹感，從而減少能量的攝入，并通過生熱作用增加能量消耗[1]。該藥物在臨床上已得到廣泛應用，但尚無滴丸劑上市，亦無滴丸劑研究的相關報道。筆者采用高效液相色譜(HPLC)法[2]對鹽酸西布曲明滴丸的含量進行了研究，為質量控制提供快速、有效的分析手段，該法準確可靠，操作簡便易行，現報道如下。

1 儀器與試藥

島津LC－10ATvp型高效液相色譜儀，島津LC－10Avp型紫外檢測器，島津CLASS－VP色譜工作站，CP124S型電子分析天平(Sartorius，德國)。甲醇為色譜純，水為重蒸水;鹽酸西布曲明對照品(南京長澳制藥有限公司，批號080103，純度99.4%);鹽酸西布曲明滴丸(正大清江制藥有限公司，批號分別為20080302，20080303，20080304);鹽酸西布曲明空白滴丸(正大清江制藥有限公司)。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱:DiamonsilTMODS 柱(250 mm ×4.6 mm，5μm)，奧泰alltima ODS柱(250 mm×4.6 mm，5μm)，大連依利特 ODS2柱(250mm ×4.6 mm，5 μm);流動相:磷酸二氫鉀溶液(磷酸調節pH=3.0) － 甲醇(3 ∶7);檢測波長:223 nm;流速:1.0mL/min;進樣量:20μL。

2.2 溶液制備

取經105℃干燥至恒重的鹽酸西布曲明對照品約10mg，精密稱定，置100mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。取樣品20丸，精密稱定質量，計算平均丸重，研細，精密稱取適量(約相當于鹽酸西布曲明10mg)，置100mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液作為供試品溶液。精密稱取鹽酸西布曲明空白滴丸細粉51.0 mg，置100mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，作為陰性對照品溶液。

2.3 方法學考察

專屬性試驗:在擬訂的色譜條件下，分別吸取對照品溶液、供試品溶液、陰性對照品溶液20μL，注入液相色譜儀，色譜圖見圖1。結果表明，陰性對照品溶液在與對照品溶液和供試品溶液色譜相對應的位置上無吸收峰，該法的專屬性良好。

圖1 高效液相色譜圖

線性關系考察:精密量取對照品溶液(0.998 g/L)，制成質量濃度分別為 10.0，49.9，99.8，199.6，499.0 μg/mL 的對照品溶液。各精密量取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測定峰面積。以峰面積值(A)對質量濃度(C)進行線性回歸，得回歸方程為A=49971C－355，r=0.99998(n=5)，結果表明，鹽酸西布曲明質量濃度在10.0～499.0μg/mL范圍內與峰面積有良好的線性關系。

精密度試驗:精密量取鹽酸西布曲明對照品溶液(100.0μg/mL)，重復進樣6次，記錄色譜圖。結果峰面積的 RSD=0.25%(n=6)，表明方法的精密度良好。

穩定性試驗:取同一供試品溶液，室溫放置，分別于0，2，6，12，24 h時進樣測定，記錄色譜圖峰面積的 RSD=0.37%(n=5)，表明供試品溶液在24 h內穩定。

重復性試驗:取同一批樣品，研細，精密稱取6份，依法測定含量。結果的 RSD為0.73%(n=6)，表明方法重復性良好。

加樣回收試驗:分別精密稱取原料藥，加入處方量輔料，分別配制低(80%)、中(100%)、高(120%)3個質量濃度的樣品，置100mL容量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，得供試品溶液，每個質量濃度配制3份，共9份，各精密量取20μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結果見表1。

表1 鹽酸西布曲明加樣回收試驗結果(n=9)

2.4 樣品含量測定

隨機取樣品20丸，依法制備供試品溶液。精密量取對照品溶液和供試品溶液20μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標法以峰面積計算結果乘以1.057，即得。結果見表2。

3 討論

耐用性試驗考察了流動相、色譜柱、流速的輕微變動，對分離度等結果的影響。結果表明，在測定條件下，流動相、色譜柱、流速和柱溫的輕微變動對試驗結果影響不大，系統耐用性良好。

鹽酸西布曲明為叔胺類化合物，為新型減肥藥，具有療效確切、副作用小等特點。現參照有機胺類藥物的分析方法，建立了鹽酸西布曲明滴丸的高效液相色譜含量測定方法，可作為鹽酸西布曲明滴丸的質量控制標準。

本試驗先用223 nm作為測定波長，且考慮本品的溶解性和檢測波長，選用磷酸二氫鉀溶液－甲醇(3∶7)作為流動相。為改善峰形，本試驗對緩沖液的pH及緩沖鹽的濃度進行了考察，結果表明，以磷酸二氫鉀2.72 g，加水900mL溶解，加三乙胺10mL，用磷酸調節pH至3.0，加水稀釋至1 000mL時峰形較好。

本試驗方法操作簡便、專屬性好、靈敏度高，可用于鹽酸西布曲明滴丸的含量測定。

表2 樣品含量測定結果(n=3)

[1]WS－240(X －207)－2000，國家藥品標準(試行)[S].

[2]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:化學工業出版社，2005:附錄 29.