龍須藤的化學成分研究

徐 偉，李 煌，褚克丹，張玉琴，陳立典，沙 玫

福建中醫藥大學藥學院，福建福州 350122;2福建中醫藥大學康復醫學部，福建福州 350122

龍須藤 Bauhinia championi(Benth.)Benth為豆科羊蹄甲屬多年生藤本植物，別名羊蹄藤、烏郎藤、過崗圓龍、九龍藤、五花血藤、梅花入骨丹、燕子尾、黑皮藤等，分布于浙江、江西、福建、廣東、廣西、湖南、湖北、貴州等省區［1］。龍須藤作為一種畬醫病證論治中針對痹癥治療的特色藥，其性平、苦澀，無毒，具有祛風除濕，活血止痛，健脾理氣等功效［2］。根據《中國畬族醫藥學》記載以及前期對畬族地區用藥調查統計，多位畬醫的風濕疼痛經驗方均記載有龍須藤的使用，在福建閩東地區，當地正大力發展龍須藤等當地特色經濟作物。近年來，隨著風濕、類風濕病發病率的不斷上升，對龍須藤的深入研究逐漸受到重視。文獻報道該植物含有黃酮類化合物［3，4］、揮發油［5］、多糖［6］等成分。為了進一步了解龍須藤的化學成分，我們對其進行了化學成分研究。本文報道從其乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇部分分離得到7個化合物，其中化合物oblongixanthone A為首次從該種植物中分離發現。

1 儀器和材料

熔點用MDS-3型顯微熔點測定儀，YANAGIMOTO MFG，CO;Agilent 1100 series液質聯用質譜儀，美國Agilent公司;紅外光譜用Bruker公司傅利葉紅外光譜儀(VECTOR22);核磁共振波譜用Burker核磁共振儀(ACF200型)。柱層析硅膠和薄層用硅膠G購自青島海洋化工廠，Sephadex LH-20購自Pharmacia公司，所用試劑均為分析純，購自國藥集團化學試劑有限公司。

本樣品于2011年4月采于福州永泰，經福建中醫藥大學藥學院中藥教研鑒定室盧偉教授鑒定為龍須藤Bauhinia championi(Benth.)Benth。藥材樣本存放于福建中醫藥大學藥學院標本室。

2 提取和分離

取龍須藤藤莖7.8 kg，粉碎成粗粉后用80%乙醇回流提取3次，每次2 h，合并提取液，回收乙醇，得到乙醇提取物。提取物加水混懸后，依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取，回收溶劑后得到石油醚部分3 g，三氯甲烷部分30.8 g，乙酸乙酯部分236.5 g，正丁醇部分503 g。取乙酸乙酯部分(100 g)經粗硅膠(160～200目)以二氯甲烷-甲醇梯度洗脫(體積比90∶1-50∶1)，等體積收集洗脫液，流分經TLC檢識再合并，經反復的硅膠、聚酰胺、SephadexLH-20、ODS分離和純化，得到化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ。

取正丁醇部分(100 g)用熱水溶解，用二氯甲烷-甲醇梯度洗脫(體積比 4∶1、3∶2、1∶4、2∶3)，等體積收集洗脫液，流分經 TLC檢識再合并，經反復的硅膠、聚酰胺、SephadexLH-20、ODS分離和純化，得到化合物Ⅴ、Ⅶ。

3 結構鑒定

化合物1 白色針狀結晶(丙酮)，mp 141～142℃，2%濃硫酸香草醛反應，105℃條件下加熱顯紫紅色。IR 中顯示在 3432、2936、2860、1461、1381、1054、959、800 cm-1處有吸收帶，與 Sigma Biological Sample Library譜庫中β-谷甾醇的匹配度達90%以上。在石油醚-乙酸乙酯、石油醚-丙酮、二氯甲烷-丙酮三種不同展開條件下，其Rf值與谷甾醇一致，混合熔點不下降，故鑒定為β-谷甾醇。

化合物2 白色粉末，mp 288～289℃，2%濃硫酸香草醛反應，105℃條件下加熱顯紫紅色。IR中顯示在 3397、2959、2933、2869、1463、1379、1073、1024 cm-1處有吸收帶，與 Aldrich Condensed Phase Sample Library譜庫中胡蘿卜苷的匹配度達90%以上。在硅膠薄層板上用二氯甲烷-丙酮、二氯甲烷-甲醇、二氯甲烷-甲醇-水等體系展開，均為單點，其Rf值與胡蘿卜苷標準品一致，且混合熔點不下降，故鑒定為胡蘿卜苷。

化合物3 白色片狀結晶(石油醚-乙酸乙酯)，mp 65～66 ℃。IR 中顯示在 2917、2848、1472、1061、719 cm-1有吸收帶，與 Aldrich Condensed Phase Sample Library譜庫中三十烷的匹配度達90%以上，且在硅膠薄層板上用不同的溶劑體系展開，均為單點，其Rf值與三十烷標準品一致，故鑒定為正三十烷。

化合物4 白色片狀固體(石油醚-乙酸乙酯)，mp 97～98 ℃。IR 中顯示在 2917、2849、1742、1472、1363、1239、1179 cm-1處有吸收帶，與 Aldrich Condensed Phase Sample Library譜庫中六十烷的匹配度達90%以上，且在硅膠薄層板上用不同的溶劑體系展開，均為單點，故鑒定為正六十烷。

化合物5 黃色針狀結晶(氯仿-甲醇)，mp＞300℃。365 nm紫外下黃色熒光，鹽酸-鎂粉反應為陽性，故初步判斷為黃酮類化合物。ESI-MS m/z:301.0［M-H］-;IR 中顯示在 2918、2849、1664、1610、1521、1450、1381、1318、1261、1198、1167、1013 cm-1處有吸收帶，與HR Aldrich Aldehydes and Ketones譜庫中槲皮素的匹配度達90%以上。1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)δ:12.464(1H，s，5-OH)、10.760(H，s，7-OH)、9.319(1H，s，4'-OH)、9.288(1H，s，3'-OH)、7.674(1H，d，J=2.2 Hz，H-2')、7.553(1H，dd，J=2.2 Hz，H-6')、6.868(1H，d，J=8.5 Hz，H-5')、6.402(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)、6.18(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)。13C NMR(DMSO-d6，300 MHz):175.766(C-4)，163.837(C-7)，160.655(C-5)，156.075(C-9)，147.637(C-2)，146.746(C-3')，144.991(C-4')，121.890(C-1')，119.898(C-6')，115.532(C-5'')，115.010(C-2')，102.938(C-10)，98.114(C-6)，93.275(C-8).1H NMR 和13C NMR數據與文獻報道［7-9］的槲皮素數據一致。且在硅膠薄層板上用不同的溶劑體系展開，均為單點，且Rf值與槲皮素對照品一致，混合熔點不下降。故鑒定為槲皮素。

化合物6 黃色粉末，mp 276～278℃。365 nm紫外光下顯黃色熒光，鹽酸-鎂粉反應呈陽性，FeCl3反應呈陽性。1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)δ:12.476(1H，s，5-OH)、10.732(1H，s，7-OH)、9.291(2H，brs，3'，5'-OH)、8.765(1H，brs，4'-OH)、7.222(2H，s，H-2'，6')、6.351(1H，d，J=2.1 Hz，H-8)、6.168(1H，d，J=2.2 Hz，H-6);1H NMR 數據與文獻報道［7］的楊梅素數據一致。且在硅膠薄層板上用不同的溶劑體系展開，均為單點，且Rf值與楊梅素對照品一致，混合熔點不下降。故鑒定為楊梅素。

化合物7 黃色顆粒狀晶體，mp:＞280℃。ESI-MS m/z:327.2［M-H］-;IR(KBr)cm-1:3409，1647，1611，1576，1458，1293，1257，1168，1119;1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)7.335(1H，s)，6.896(1H，d)，6.402(1H，d)，6.169(1H，d)，5.936(1H，d)，1.471(6H，s)。比較環 B和氧雜蒽醌(xanthone)的NMR數據和該化合物的HMBC譜可得出該化合物 與氧雜蒽醌(xanthone)相似。1H NMR(DMSO-d6，300 MHz)中 δH6.169(1H，d，J=1.9 Hz)和6.402(1H，d，J=1.9 Hz)的信號提示有 1，2，3，5-四取代苯環，δH13.012(OH-1，s)的信號提示有螯合氫質子，芳香質子δH7.335(1H，s)，二甲基色烯環［δH6.896，5.936(1H，d，J=10.0 Hz)和1.471(6H，s)］;芳香質子(δH6.169 和6.402)彼此相關，1，2，3，5-四取代苯環 B 環上的 H-1 和 H-3;給出來信號δH7.335(1H，s)的芳香質子歸屬于環A。從HMBC 譜中，觀察到 H-8與 δC147.3、145.3、143.4(C-6，C-7 和 C-10a)、C-9(δC178.9 s)的遠程相關信號，H-11與 C-5，C-6，和 C-10a的遠程相關信號，二甲基苯并吡喃連接于氧雜蒽醌的C-5和C-6上。綜上分析，與文獻報道［10］相一致，故鑒定該化合物為 1，3，7-三羥基 13，13-二甲基-2H-吡喃［5，6-B］呫噸酮，即oblongixanthone A，結構見圖1。

圖1 Oblongixanthone A的結構Fig.1 Structure of oblongixanthone A

1 《全國中草藥匯編》編寫組.《全國中草藥匯編》(上冊).人民衛生出版社，1996:264-265.

2 Jiangsu New Medical College(江蘇新醫學院).Dictionary of Chinese Traditional Drugs.Shanghai Scientific and Technical Publishers.Shanghai，China.1986.pp 43.

3 Bai HY(白海云)，Zhan QF(詹慶豐)，Xia ZH(夏增華)，et al.Studies on the chemical constituents of Bauhinia championii(benth.)Benth.(II).Nat Prod Res Dev(天然產物研究與開發)，2004，4:312-313.

4 Bai HY(白海云)，Zhan QF(詹慶豐)，Lao AN(勞愛娜)，et al.Studies on the chemical constituents of Bauhinia championii(benth.)Benth(I).Chin J Chin Mater Med(中國中藥雜志)，2005，30(1):42-43.

5 Ye HZ(葉蕻芝)，Zheng CS(鄭春松)，Lin W(林薇)，et al.Component Analysis of Volatile Oil From Bauhinia Championii(Benth.)Benth.by GC-MS.J Fujian College of TCM(福建中醫學院學報)，2009，19:20-22.

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7 Zhang GY(張國英)，Zeng T(曾韜).Study on Chemical Constituents of Polygonum Hydropiper Linn.Chemistry＆ Industry of Forest Products(林產化學與工業)，2005，25(3):21-24.

8 中國科學院上海藥物研究所植物化學研究室。黃酮體化合物鑒定手冊.北京:科學出版社，1981，674.

9 Mao YW，Tseng HW，Liang WL，et al.Anti-Inflammatory and Free Radial Scavenging Activities of the Constituents Isolated from Machliuszuihoensis.Molecules，2011，16，9451-9466.

10 Huang SX，Chao F，Yan Z，et al.Bioassay-Guided Isolation of Xanthones and Polycyclic Prenylated Acylphloroglucinols from Garcinia oblongifolia.J Nat Prod，2009，72:130-135.