葛根對(duì)雷公藤誘導(dǎo)的卵巢早衰模型大鼠的治療作用

劉震坤 董克勤 金 影 (吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院婦科，吉林 長(zhǎng)春 130021)

葛根為豆科多年生落葉藤本植物野葛(Pueraria lobata)、甘葛藤(Puerarin thomsonii)的干燥根，在我國(guó)南方的一些省區(qū)常作為蔬菜食用。其藥用價(jià)值主要是其含有葛根素等黃酮類成分，現(xiàn)代藥理研究顯示葛根素具有植物雌激素功效〔1，2〕。因此，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用雷公藤多甙復(fù)制了卵巢早衰大鼠病理模型〔3〕，觀察葛根水提物抗卵巢早衰的作用。

1 材料與方法

1.1 藥物 雷公藤多甙:上海復(fù)旦復(fù)華藥業(yè)有限公司;雌二醇(E2)、黃體生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)放免試劑盒:購(gòu)買于北京北方生物技術(shù)研究所。葛根水提物的制備:葛根購(gòu)于吉林省中醫(yī)藥科學(xué)院藥劑科，取10倍體積清水浸泡30 min，煎煮2次后混合藥液，濃縮，置冰箱備用。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 雌性SD大鼠，30只，體重(180±20)g，吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。大鼠經(jīng)適應(yīng)性飼養(yǎng)后，行陰道脫落細(xì)胞學(xué)檢查，篩選出動(dòng)情周期正常者為受試大鼠。隨機(jī)選出9只為空白對(duì)照組(A組)，其余大鼠每日給予50 mg/kg雷公藤多甙片懸浮液(含0.05%羧甲基纖維素鈉)連續(xù)灌胃14 d造模，空白對(duì)照組大鼠給予等量的生理鹽水(含0.05%羧甲基纖維素鈉)。將造模成功后的大鼠隨機(jī)分為2組:模型組(B組)、葛根組(C組)。A組和B組灌胃給予生理鹽水2 ml/d，C 組給予葛根水提物 2.5 g(生藥)·kg－1·d－1，相當(dāng)于人用劑量的10倍，連續(xù)給藥時(shí)間持續(xù)21 d。

1.3 卵巢早衰大鼠子宮、卵巢和腎上腺臟器系數(shù)的檢測(cè) 采用乙醚麻醉，稱重，眼球取血。剖腹，取子宮、雙側(cè)卵巢和腎上腺，稱取臟器濕重，計(jì)算臟器系數(shù)。臟器系數(shù) =臟器濕重(mg)/體重(g)×100%。

1.4 卵巢早衰大鼠血清性激素的檢測(cè) 血液室溫靜置30 min后，3 000 r/min離心15 min，取血清，－20℃保存待測(cè)。采用放射免疫法測(cè)定血清E2、LH和FSH水平。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 葛根水提物對(duì)卵巢早衰大鼠卵巢、子宮、腎上腺臟器系數(shù)的影響 與A組比較，B組卵巢和腎上腺臟器系數(shù)明顯下降(P＜0.05)，子宮臟器系數(shù)沒有顯著變化;與B組比較，C組大鼠子宮臟器系數(shù)明顯增加(P＜0.01)，卵巢和腎上腺臟器系數(shù)無明顯變化。見表1。

表1 葛根水提物對(duì)卵巢早衰大鼠卵巢、子宮、腎上腺臟器系數(shù)的影響(±s，n=9)

表1 葛根水提物對(duì)卵巢早衰大鼠卵巢、子宮、腎上腺臟器系數(shù)的影響(±s，n=9)

與A組比較:1)P＜0.05，2)P＜0.01;與B組比較:3)P＜0.01

組別 卵巢系數(shù) 子宮系數(shù) 腎上腺系數(shù)A組0.204±0.001 0.420±0.007 2.043±0.440 0.273±0.004 B組 0.290±0.0091) 1.862±0.654 0.190±0.0012)C組 0.299±0.007 2.040±0.2213)

2.2 葛根水提物對(duì)卵巢早衰大鼠血清性激素的影響 與A組比較，B組E2明顯升高，F(xiàn)SH顯著下降(P＜0.05);與B組比較，C組能夠升高卵巢早衰大鼠E2和LH水平(P＜0.05)，而對(duì)FSH沒有顯著影響。見表2。

表2 葛根水提物對(duì)卵巢早衰大鼠血清性激素的影響(±s，n=6)

表2 葛根水提物對(duì)卵巢早衰大鼠血清性激素的影響(±s，n=6)

與A組比較:1)P＜0.05;與B組比較:2)P＜0.05

組別 E2LH FSH A組0.530±0.041 7.431±1.486 0.282±0.003 0.730±0.026 B組 6.064±1.4231) 0.281±0.138 0.596±0.0281)C組 9.347±1.9432) 0.382±0.0162)

3 討論

卵巢早衰是女性40歲之前即閉經(jīng)的現(xiàn)象，其特點(diǎn)是原發(fā)或繼發(fā)閉經(jīng)伴隨血雌激素水平降低和促性腺激素水平升高，并伴有:潮熱多汗、性欲低下等癥狀。臨床上本病的發(fā)生并不少見且有逐漸增加的趨勢(shì)〔4〕。

葛根是臨床常用的治療卵巢早衰的中藥之一。其化學(xué)成分多樣，其中異黃酮類成分具有雌激素樣活性，即能夠與雌激素受體結(jié)合產(chǎn)生雌激素樣作用，被稱為植物雌激素〔5〕。

本實(shí)驗(yàn)說明葛根能夠促進(jìn)內(nèi)源性雌激素的分泌。由于卵巢臟器系數(shù)沒有變化，可以推測(cè)雌激素分泌的增加不是通過改變臟器形態(tài)結(jié)構(gòu)，而是通過增強(qiáng)卵巢臟器功能實(shí)現(xiàn)的。雌激素水平增高必然會(huì)影響增加子宮內(nèi)膜的增生等形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化，由此導(dǎo)致了子宮臟器指數(shù)的增加。葛根能夠增加雌激素的分泌而改善卵巢早衰，但需注意其對(duì)子宮的影響。

1 曹鐘靈，李建北，張東明.葛屬植物中異黃酮類化合物的研究進(jìn)展〔J〕.中藥材，2005;28(1):67-71.

2 牛建昭，趙丕文，王繼峰，等.補(bǔ)骨脂等5種中藥植物雌激素活性的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2008;31(10):676-81.

3 郝 娟，王春蓮，王培嵩，等.雷公藤多甙片致卵巢早衰大鼠動(dòng)物模型的研究〔J〕.中國(guó)婦幼保健，2012;27(12):1866-70.

4 徐 岺，宋亦軍.卵巢早衰的臨床表現(xiàn)和診斷標(biāo)準(zhǔn)〔J〕.實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2003;19(4):195-6.

5 張 偉，湯旭磊，田 泉.葛根素雌激素樣作用的實(shí)驗(yàn)研究〔J〕.中國(guó)婦幼保健，2005;20(17):2243-5.