高產多糖香菇和靈芝的品種篩選

郭 興，邢振楠，任廣明，高智濤

（黑龍江省伊春林業科學院，黑龍江伊春 153000）

食用菌產業是一項集經濟效益、生態效益和社會效益于一體的短平快農村經濟發展項目，專家們普遍認為，進入21世紀，隨著人們生活水平的不斷提高，危害人類健康的問題不是饑餓和營養不良，而是由于經濟提高，食物富裕，體力活動減少而帶來的慢性疾病，如心血管、高血壓、糖尿病以等，而具有真核的菌類食品，以其能產生抗細菌、抗病毒作用，并對人體有保健功能而廣泛受到重視，受到越來越多人的青睞。目前國際市場對食用菌的需求正不斷上升，近幾年食用菌每年的產值達250～280億。食用菌產業被認為是21世紀的朝陽產業。食用菌又是一類有機、營養和保健的綠色食品，發展食用菌產業，符合人們消費增長和農業可持續發展的需要是農民快速致富的有效途徑。

真菌多糖可以制成抗腫瘤、抗病毒藥品口服或者進行注射，還可以作為保健品中的添加物能起到延緩衰老調節免疫力的作用，也是新藥開發的重要途徑之一?，F在多糖體也被廣泛應用于食品行業，例如多糖飲料，多糖面包等等，并且市場需求量較大。在保健品行業多糖應用更為廣泛，配合蛋白質、核酸等微量元素制成的多糖膠囊其抗衰老、抗疲勞免疫調節作用發揮的淋漓盡致。

1 材料

1.1 供試菌株

供試菌種見表1，由伊春林業科學院原生態食用菌研究所保藏。

1.2 試劑

實驗用試劑見表2。

1.3 儀器與設備

實驗用儀器、設備見表3。

表1 15個香菇品種和8個靈芝品種Tab.1 15 mushrooms and 8 ganoderma lucidum varieties

表2 所用試劑Tab.2 Reagents used

表3 所用儀器Tab.3 Instruments used

2 方法

2.1 食用菌多糖的提取工藝流程

預處理→浸提→過濾→濃縮→醇析→去蛋白→食用菌多糖。

2.2 培養基的配制

CYM培養基含葡萄糖20 g、蛋白胨2 g、酵母膏2 g、硫酸鎂0.5 g、磷酸氫二鉀1 g、磷酸二氫鉀 0.46 g 和 1 000 mL 水。［1］

2.3 實驗方法

（1）CYM培養基搖瓶培養，培養溫度28℃，150 r/min，CYM培養基搖瓶培養擴繁菌絲體，過濾，60℃干燥菌絲體，稱干重。

（2）按照水:干菌絲=30∶1沸煮菌絲5 h，過濾取上清濃縮，加入95%酒精至酒精終濃度達75%。－4℃過夜醇沉食用菌多糖。

（3）4 000 r/min離心15min沉淀食用菌多糖，30∶1水稀釋沉淀，按照體積比3∶1加入sevag試劑（氯仿:異戊醇 =24∶1），渦旋震蕩充分混勻，4 000 r/min離心15 min去除蛋白及雜質，取上清，3倍體積的95%乙醇沉淀多糖，4 000 r/min離心15 min后，沉淀物60℃烘干，所得即為食用菌多糖。

2.4 食用菌多糖標準曲線的建立

以葡萄糖制作標準液，采用硫酸蒽酮比色法，取7支大試管，按表4數據配制一系列不同濃度的葡萄糖標準液。

表4 葡萄糖標準液制作表Tab.4 The production table glucose standard solution

在每支試管中立即加入蒽酮試劑4.0 mL，迅速浸于冰水浴中冷卻，各管加完后一起浸于沸水浴中，管口封好，以防蒸發。自水浴重新煮沸起，準確煮沸10 min取出，用流水冷卻，室溫放置10 min，在620 nm波長下比色。以標準葡萄糖含量作橫坐標，以吸光值作縱坐標，作出標準曲線，如圖1 所示［2］。

2.5 食用菌多糖的提取率、多糖產量的測定

提取率計算如下:

圖1 葡萄糖標準曲線Fig.1 The glucose standard curve

式中:m1為紫外分光光度計檢測的多糖含量，g;m2為食用菌菌絲體的干重，g［3］。

因為培養液體積不同會導致食用菌菌絲體產量不同，所以多糖產量為每100 mL培養液培養菌種所產生出來的。

3 結果

3.1 食用菌多糖標準曲線的建立

經紫外可見光分光光度計檢測，將所得的數據進行回歸處理，得到回歸方程Y=0.006 2X+0.1426（R2=0.996 1）

3.2 食用菌多糖的提取率、純度、多糖產量的測定

由表5可知，香菇15個品種中多糖產量最多的是品種9 608，單個三角燒瓶 （液體培養基300 mL）可產生干菌絲體2.04 g，去蛋白后多糖干重產量為0.36 g，提取率為7.2%，該品種多糖產量為48.96 mg/100 mL。

由表6可知，靈芝8個品種中多糖產量最多的是品種G9，單個三角燒瓶 （液體培養基300 mL）可產生干菌絲體3.55 g，去蛋白后多糖干重產量為0.49 g，提取率為4.7%，該品種多糖產量為55.62 mg/100 mL。

4 結論

通過選取15個香菇品種和8個靈芝品種進行多糖含量檢測，得出其中香菇、靈芝多糖產量最高的品種是9 608和G9，多糖產量分別為48.96 mg/100 mL和55.62 mg/100 mL。

表5 香菇15個品種多糖提取數據表Tab.5 Polysaccharide extract data of 15 species of mushrooms

表6 靈芝8個品種多糖提取數據表Tab.6 Polysaccharide extraction data of 8 species of ganoderma lucidum

香菇和靈芝多糖含量差異在于相同培養條件下，靈芝液體培養產生菌絲稠密、量多，而香菇液體培養菌絲成球，量較靈芝少。以香菇9 608和靈芝G9為例，可以看出靈芝菌絲產量高于香菇，是香菇的1.74倍，而提取率卻為香菇的0.65倍，多糖產量是香菇的1.14倍，說明靈芝多糖產量高于香菇，而香菇多糖的純度較靈芝多糖的高。

】

［1］樂 濤，陳鳳曾，姬松山.六個香菇菌株液體菌種代料栽培的比較試驗［J］.食用菌，2006，8（2）:34 －37.

［2］郭曉蕾，朱思潮，翟旭峰，等.硫酸蒽酮法與硫酸苯酚法測定靈芝多糖含量比較［J］.中華中醫藥學刊，2010（9）:22－25.

［3］張素霞.香菇多糖提取工藝的比較研究［J］.長江蔬菜，2009（14）:52－55.