雷 靜,萬 霖,李惠新
(蘭州大學1.第二臨床醫(yī)學院;2.第二醫(yī)院婦科,甘肅蘭州730000)
卵巢癌是臨床上死亡率最高、預后最差的婦科惡性腫瘤,其發(fā)病機制與原癌基因的激活及抑癌基因的突變、缺失等密切相關。研究發(fā)現(xiàn)染色體13q11-q12區(qū)域的基因雜合性損傷及缺失與多種原發(fā)性腫瘤的發(fā)生密切相關[1]。LATS2基因定位于13q11-q12,編碼絲/蘇氨基酸蛋白激酶,定位于中心體,主要負責積累γ-微管蛋白和紡錘體的形成,通過調(diào)控細胞周期而抑制腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[2-3]。隨著對LATS2基因的廣泛研究發(fā)現(xiàn)與人類多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預后密切相關。目前關于LATS2基因與卵巢癌關系的研究尚未見報道。上皮性卵巢癌是最常見的類型,為此我們收集上皮性卵巢癌組織,采用SYBR Green實時定量PCR和免疫組化法檢測上皮性卵巢癌組織中LATS2基因的mRNA和蛋白的表達情況,分析其與卵巢癌發(fā)生、發(fā)展的關系。
組織標本均來自于蘭州大學第二醫(yī)院婦產(chǎn)科(漿液性囊腺癌13例,黏液性囊腺癌7例,漿液性囊腺瘤10例,正常卵巢組織10例),并經(jīng)過患者及家屬的口頭知情同意。石蠟切片來源于蘭州大學第二醫(yī)院病理科,共110例(上皮性卵巢癌58例,漿、黏液性囊腺瘤共30例,正常組織22例),所有患者均未接受放、化療,臨床病例資料完整。
RNAiso Plus、cDNA和SYBR Green PCR試劑等(TaKaRa公司),引物(大連寶生物公司),LATS2引物序列:上游:5'-GCTTCATCCACCGAGACATCAA-3',下 游:5'-CGACAGTTAGACACATCATCCCAGA-3',擴增產(chǎn)物為198 bp;內(nèi)參基因β-actin引物序列:上游:5'-TGGCACCCAGCACAATGAA-3',下游:5'-CTAAGTCATAGTCCGCCTAGAAGCA-3',擴增產(chǎn)物為196 bp。兔抗人LATS2多克隆抗體(博奧森生物),免疫組化所需試劑(北京中杉金橋公司)。……