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ANA、DS-DNA抗體滴度與SLE活動(dòng)期的關(guān)系研究

2013-08-20 08:23:32阮汝明張學(xué)寧
中外醫(yī)療 2013年2期
關(guān)鍵詞:檢測(cè)

阮汝明張學(xué)寧

1.鶴慶縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,云南大理671500;2.昆明醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科,云南昆明650101

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)有多種自身抗體存在,一般認(rèn)為抗核抗體(ANA),抗ds-DNA抗體對(duì)SLE診斷有著重要的價(jià)值[1]。為進(jìn)一步探討ANA與抗ds-DNA抗體的滴度高低與SLE的活動(dòng)性的關(guān)系,該文報(bào)告了2007年6月—2012年6月21例SLE活動(dòng)期患者與47例SLE非活動(dòng)期患者的ANA與抗ds-DNA抗體的檢測(cè)結(jié)果,探討有關(guān)問(wèn)題如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

21例活動(dòng)期患者,全為女性。47例非活動(dòng)期患者,其中男性患者5例,女性患者42例。全組患者年齡介于12~64歲之間。

1.1.1 病例選擇標(biāo)準(zhǔn) 所選患者均為確診的SLE患者。其分期標(biāo)準(zhǔn)符合JiangX,Chen,F的標(biāo)準(zhǔn)[2],即ANA、抗ds-DNA、ENA三項(xiàng)抗體均為陽(yáng)性,且IgG>16.8 g/L,補(bǔ)體C3,C4降低的 患者為活動(dòng)期患者。凡有一條不符合以上條件的為非活動(dòng)期患者。

1.2 檢測(cè)方法及操作步驟

1.2.1 ANA的檢測(cè)方法及操作步驟 ①檢測(cè)方法:用間接免疫熒光法(IIF)檢測(cè)ANA。采用ANA檢測(cè)試劑盒,其每個(gè)反應(yīng)測(cè)試區(qū)都有人上皮細(xì)胞(HEP-2)和靈長(zhǎng)類肝冰凍組織切片。②操作步驟:將待測(cè)血清用 PBS-T ween緩沖液稀釋為 1:100、1:1000等不同稀釋度,然后加樣25 uL于反應(yīng)區(qū)上,在室溫下溫育30 min后,用PBS-T ween緩沖液沖洗并浸泡1 min以上,然后加20uL IgG熒光抗體至反應(yīng)區(qū)上,同前溫育及沖洗。最后滴加甘油-PBS封片,置于熒光顯微鏡下觀察。

1.2.2 抗ds-DNA抗體的檢測(cè)方法及操作步驟 ①檢測(cè)方法:用金標(biāo)免疫斑點(diǎn)法測(cè)抗ds-DNA抗體。采用抗ds-DNA抗體檢測(cè)試劑盒。②操作步驟:加TBS緩沖液2滴于反應(yīng)區(qū)→加樣品4滴→去除濾蓋→加膠體金標(biāo)記抗體3滴→加 TBS緩沖液1~2滴→觀察結(jié)果[3]。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果

2.1 ANA滴度與SLE活動(dòng)期和非活動(dòng)期的關(guān)系

21例活動(dòng)期患者均ANA陽(yáng)性,陽(yáng)性率為100%。47例非活動(dòng)期患者ANA陽(yáng)性為27例,陰性20例,陽(yáng)性率為57.4%。兩組比較活動(dòng)期陽(yáng)性率明顯高于非活動(dòng)期(P<0.05),而且活動(dòng)期患者抗體的滴度也明顯高于非活動(dòng)期患者,經(jīng)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表 1。

表1 ANA滴度與SLE活動(dòng)期、非活動(dòng)期的關(guān)系

2.2 抗dsDNA抗體滴度與活動(dòng)期與非活動(dòng)期的關(guān)系

21例活動(dòng)期患者抗ds-DNA抗體陽(yáng)性為21例,陽(yáng)性率為100%。47例非活動(dòng)期患者抗ds-DNA抗體陽(yáng)性為27例,陽(yáng)性率為57.4%。兩組比較活動(dòng)期陽(yáng)性率明顯高于非活動(dòng)期 (P<0.05),而且活動(dòng)期患者抗體的滴度也明顯高于非活動(dòng)期患者,兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),見表 2。

表2 抗ds-DNA抗體滴度與SLE活動(dòng)期、非活動(dòng)期的關(guān)系

3 討論

ANA是自身對(duì)各種細(xì)胞核成分產(chǎn)生相應(yīng)抗體的總稱,常見于SLE,類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病和干燥綜合癥等,在SLE中包含有抗糖蛋白抗體、抗脫氧核糖核酸(DNA)抗體和抗鹽水可提取性核抗原(ENA)抗體。目前診斷SLE和觀察SLE病情的常見檢測(cè)為間接免疫熒光法測(cè)定ANA,ANA陽(yáng)性率及陰性率,在活動(dòng)期患者與非活動(dòng)期患者之間有著明顯的差異,且滴度變化也存在明顯的差異[4]。故對(duì)患者ANA及抗ds-DNA滴度的檢測(cè)可估計(jì)SLE患者的病情。但據(jù)謝紅付等的報(bào)道[5],憑借單純的ANA陰性既不能排除SLE的診斷,也不能否定病情的活動(dòng)性。

抗ds-DNA抗體變化與ANA試驗(yàn)結(jié)果在一些方面存在一致性,但也不完全等同。抗ds-DNA陽(yáng)性患者,ANA也為陽(yáng)性,而抗ds-DNA陰性者,ANA可能為陽(yáng)性[6]。該研究表明,SLE活動(dòng)期組患者的抗體滴度顯著大于非活動(dòng)期組患者,同樣也能用于估計(jì)患者的病情及預(yù)后。而徐世正等的報(bào)道[7]也指出了ANA、抗ds-DNA的消長(zhǎng)同臨床活動(dòng)有著非常密切的聯(lián)系,因而定期檢查患者抗ds-DNA、ANA等,對(duì)于監(jiān)察患者的病情變化,預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)和指導(dǎo)治療,提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。

[1] 葉任高,陸再英.內(nèi)科學(xué)[M].5版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2000:909-915.

[2] Jiang X,Chen F.Clin Immunol and Immunol pathology[J].American Journd of patndogy,1992.63(1):152.

[3] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:655-660.

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[5] 謝紅付,劉稚然,朱武.抗核抗體對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷與活動(dòng)性的研究[J].湖南醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),1997,22(2):177-178.

[6] 林海青,龔燕,張紅逵,等.抗核抗體測(cè)定診斷SLE的臨床意義[J]山東醫(yī)藥,1991,31(5):29-91.

[7] 徐世正,李洪迥,王惠珍.抗雙鏈DNA抗體、抗核抗體的消長(zhǎng)同SLE臨床表現(xiàn)的關(guān)系[J].中華皮膚科雜志,1983,16(3):138-142.

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