外周血淋巴細胞亞群及其細胞因子在反復自然流產患者的變化及臨床意義

何育英 蔡巧青

1.深圳市鹽田區鹽田街道計生中心,廣東深圳518000;

2.深圳市北京大學醫院婦產科,廣東深圳518000

反復自然流產(RSA)是婦產科常見病,約40%～60%不明原因,指連續2次及以上的自然流產.目前多數研究表明,母體免疫系統能否識別并耐受胚胎抗原是關鍵.大量研究結果顯示,正常妊娠中母體對胚胎的免疫反應以Th2體液免疫為主,而Th1細胞免疫過強極有可能導致流產.為探討研究外周血淋巴細胞亞群Th1/Th2的水平及其細胞因子德變化和臨床意義,輔助臨床治療.現回顧性分析該院2010年10月-2011年10月收治的60例婦女的臨床資料,將結果報道如下.

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在深圳市鹽田區計生中心經過婦檢,B超,尿HCG都正常無不孕,無死胎或流產史,要求人流的婦女30例為正常早孕組.同期經我中心排除因遺傳,感染及血型不合,抗精子抗體陽性等因素,確診為RSA的婦女30例為病例組.見表1.

表1 兩組婦女臨床資料比較

1.2 設備及試劑

采用BeckmanCoulter FC500及其原裝試劑,利用表面分子將其分類細胞.ELISA試劑盒購自美國GBD公司.

1.3 標本收集

分析前收集RSA組和對照組孕婦空腹取靜脈血5 mL,注入5.0 mL于EDTA.K2管,空腹靜脈血4 mL,分離血清,-20℃保存待檢測.嚴格按照操作程序.

1.4 統計方法

采用SPSS13.0統計學處理軟件包進行數據分析,計量資料采用均值±標準差(±s)表示,進行t檢驗.

2 結果

2.1 病例組與對照組資料比較

表2 對照組與病例組比較

表3 對照組與病例組外周血IFN-γ、IL-10水平的檢測(pg/mL)

3 討論

大多認為早期妊娠母體對胚胎的免疫耐受主要有以下:①妊娠期對母體免疫反應的抑制.②胎盆的屏障作用可將胚胎抗原封閉,避免與母體免疫接觸,同時將母體抗體及其免疫因子進入胎兒導致免疫反應隔離.Greco等[1]分別把妊娠與產婦,男性與未孕的女性的外周血淋巴細胞在體外與胎盤生物制劑進行MLC培養,發現前者可令淋巴細胞轉化而后者不能,證實了早孕期間的免疫耐受是動態的.相關研究結果顯示:"免疫細胞分泌的細胞因子影響胚胎的著床、發育,生殖的神經內分泌以及胎盤功能,以維持正常妊娠活動".

Th1細胞分泌IL-2,TNF-α,IFN-γ等,引起局部炎癥反應和遲發細胞免疫反應,Th2細胞分泌IL-4,IL-5,IL-6,IL-10等,引起體液免疫促進B細胞增殖和抗體形成.Piccinni等[2]報道,孕鼠胎盤IL-4比血中高5-10倍.而流產鼠胎盤IL-4等濃度相對低,但IL-2,TNF-α,IFN-γ等濃度高.Makhseed等[3]對流產傾的婦女進行實驗研究,發現其成功懷孕組以Th2型的細胞因子為主,而失敗的以Th1型的細胞因子為主.Th1型細胞因子通過直接或間接激活NK、細胞毒性T淋巴細胞(CTLs)、巨噬細胞等多種毒性細胞妨礙妊娠.Th2型細胞因子主要是通過抑制Th1型細胞因子的產生及其作用來維持妊娠,大部分反復自然流產均是由于患者機體不能產生足夠的Th2型細胞因子來抑制Th1型細胞因子所致.國內劉慶之等[4]對此亦有論述.

大量研究表明Th2淋巴細胞有利于妊娠,而Th1則相反.但需注意適量的Th1型細胞是有利于促進胎兒生長和母體抗感染能力.Haynes等[5]認為,對妊娠來說,Th1與Th2的平衡更應該考慮.現已證實,Th2型細胞因子對維持正常妊娠起重要作用,而Th1型細胞因子則不利于妊娠的正常進行[6];兩種細胞因子之間的平衡對維持正常妊娠發揮重要作用.正常妊娠時Th1/Th2的比值下降,母體免疫反應偏離Th1型而偏向Th2型.在RSA中Th1/Th2比值上升,母體免疫反應呈相反變化.可見,細胞因子自身、與妊娠有關的激素、感染等因素均對兩型因子間平衡起重要調節作用

該研究主要從淋巴細胞的表面分子和淋巴細胞因子進行實驗研究,發現RSA的患者和IFN-γ相對正常妊娠婦女表達增強,而,和IL-10表達相對較弱.提示正常妊娠為一種特殊的Th2現象,Th1受到抑制.陳巧兒[7]等報道,RSA患者經過免疫治療后,促進機體向Th2淋巴細胞轉化,利于妊娠成功.綜上所述,利用流式細胞儀對RSA快速診斷,結合運用淋巴細胞免疫治療[8]或者給予細胞因子如Th2類因子制劑或抗Th1類因子制劑,調節優勢應答的類型,達到早預防,早治療,達到妊娠成功的目標.

[1]Greco CR,Koncurat MA.Different responsen of lymphocyte to huaman placenta conditioned medium in vitro[J].J Investig Clin Immumol,1998,8(1):42-45.

[2]Piccinni MP,Romagnana S.Regulation of fetal allograft survival byhormone-controlled[J].Th1-and Th2-type cytokines immonol Res,1996,15(2):141-150.

[3]Makhseed M,Raughupathy R,Azizieh F,et al.Th1 and Th2cytoline profiles in recurren aborters nwith successful pregnancy and with subsequent abortions[J].Hum Reprod,2001,16(10):2219-2226

[4]劉慶芝,黃山鷹姚吉龍,等.反復自然流產患者外周血中Th1/Th2型細胞因子的表達及其意義[J].東南大學學報,2011,30(4):565-568.

[5]Haynes MK,Smith JB.Can Th1-like immune responses esplain the immuno-pathology of recuurent miscarriage[J].Reprod Immunol,1997,35(1):65-71.

[6]Rezaei A,Dabbagh A.T-helper(1)cytokines increase during early pregnancy in women with a history of recurrent spontaneous abortion[J].Med Sci Monit,2002,8(8):607-610.

[7]陳巧兒,秦衛兵,楊寧,等.免疫治療原因不明反復自然流產后Th1/Th2型細胞因子和NK細胞的變化[J].中國婦幼保健,2005,20(20):2637-2639.

[8]廖丹,李鳳英,譚秋慧,等.淋巴細胞免疫治療反復早期自然流產53例[J].臨床醫學,2009,29(1):75-76.