胱抑素C在狼瘡腎炎診斷中的應用

劉冬葉

（湖南省邵陽縣第二人民醫院檢驗科 湖南 邵陽 422100）

1 研究背景

系統性紅斑狼瘡（Systemic lupus erythematosus，SLE）是一病因不明的好發于育齡女性的慢性炎癥性自身免疫性疾病.病程和預后多樣，常反復惡化與緩解.通常累及肌肉骨骼系統和皮膚，也可引起腎，肺，心和中樞神經系統炎癥性改變［1］。狼瘡腎炎（l upus nephritis，LN）是SLE中最常見且嚴重的并發癥之一，約50%-70%的SLE伴有LN，表現為高發病率和高死亡率，狼瘡腎炎的五年生存率比較低狼瘡腎炎［2］。然而，若能早期診斷出狼瘡腎炎并及時的給予治療，將顯著的改變腎臟的病理進程并延長患者的生存率［3］。因此，對狼瘡腎炎的早期檢測和診斷具有重要的臨床意義。胱抑素C（cystatin C，Cys C）是近年來報道的反應腎小球濾過率（GFR）最敏感的指標之一，可早期反映腎小球濾過膜通透性的變化及早期腎小管的損傷變化，對早期腎損傷有著較為敏感的檢出率［4］。本文通過檢測89例SLE患者和60例健康者血清及尿中的Cys C和24h尿微量清蛋白（24h UmAlb）的水平，探討Cys C在狼瘡腎炎中的變化及應用價值。

2 實驗方法

2.1 標本的采集

2.1.1 健康對照組及疾病組納入標準：

健康對照組：為隨機抽取本院門診經體檢確認無自身免疫病和其他軀體疾病者（病史、查體、心電圖、胸片、B超、血液常規及生化檢查等均正常者）40例，年齡28～67歲，平均（34.3±17.8）歲，其中男10例，平均（33.2±15.5）歲，女30例，平均（31.2±17.3）歲。近1個月內無重大生活事件。

疾病組：選擇2011年1月～2012年12月我院收治的SLE患者89例，男8例，女81例，平均年齡（31.58±14.22）歲。診斷符合美國風濕病學會（ACR）2010年修訂的診斷標準［5］。患者無并發糖尿病、高血壓及其他引起腎功能改變的疾病。

2.1.2 血清樣品和尿液標本收集：研究對象于上午8～9時采集空腹靜脈血3 mL，置于潔凈的促凝管內，在常溫下以3000 r／min的速率離心5 min，以EP管分離血清置于-80℃冰箱內保存。同時囑患者早上8點排尿棄去，開始留取24小時全部尿量（包括次日凌晨8點）收集在一個帶蓋的干凈容器內，于第一次采集尿后加入1 mL甲苯作為防腐劑，混勻后測量并記錄總尿量，再取混勻尿2～3 ml置于-80℃冰箱內保存。

2.2 檢測方法

2.2.1 所有標本都均在日立7600生化分析儀上測定。先以標準品定標，再以高低二水平質控物做質控，確認儀器及工作狀態良好后，再行標本檢測。Cys C檢測為增強免疫比濁法，Urea為酶活力分析法，Cr用堿性苦味酸二點時間法，24h尿微量白蛋白以免疫比濁法檢測，β2-微球蛋白以顆粒增強免疫比濁法進行檢測。

2.2.2 分組依據：以24h UmAlb為依據，將SLE）患者分為24h UmAl b＜20 mg／L的SLE組（無腎病）和24h UmAlb＞20 mg／L LN組（有腎病），LN組又再依據24h UmAl b為20-200 mg／L的LN1組（早期LN）和24h UmAlb＞200 mg／L的LN2組（臨床LN）。

表1 各組間Urea、Cr、β2-MG和Cys C水平比較（）

表1 各組間Urea、Cr、β2-MG和Cys C水平比較（）

注：與正常對照組比較＃P＜0.05，與SLE組比較＊P＜0.05，與LN1組比較￥P＜0.05。

0.14±0.09 SLE組 24 4.98±2.13 74.12±18.12 2.72±0.65＃ 1.65±0.28＃ 0.28±0.14＃LN1組 33 5.34±3.09 73.15±24.54 4.35±2.38＃＊ 2.65±1.12＃＊ 0.48±0.16＃＊LN2組 32 9.46±6.45＃＊￥156.43±112.18＃＊￥7.12±6.02＃＊￥ 4.34±1.89＃＊￥ 0.99±0.21＃＊￥sC對照組 40 5.12±1.12 76.57±24.34 2.0±1.02 0.98±0.16組別 例數 Urea Cr β2-MG 血CysC 尿Cy

3.2 血清Urea、Cr、β2-MG和Cys C對SLE腎損害診斷效能的比較：用ROC（receiver operating characteristic）曲線分析各指標對SLE腎損害診斷的準確性（如圖1），結果顯示Cys C和β2-MG的AUC（area under the curve）相當，分別為0.977和0.965，Urea、Cr的AUC分別為0.781和0.851（P＜0.05），這個結果顯示Cys C和β2-微球蛋白在對系統性紅斑狼瘡的腎損害的診斷上明顯優于Urea、Cr。

圖1 血清Cys C和Urea、Cr、β2-MG對LN的ROC曲線

3 實驗結果

3.1 各組血清Urea、Cr、β2-MG、Cys C及24h UmAlb的比較

對所有資料行正態性和方差齊性分析，各組資料均為正態分布且為方差齊性資料，所以用單因素方差分析對各指標進行統計學分析，SLE

4 討論

SLE是多因素參與的病因尚不明了的自身免疫性疾病，其臨床表現復雜多樣，病程遷延反復，血清中存在大量自身抗體，全身多臟器可受累，腎臟是最常見累及器官之一［6］。LN為SLE常見且最嚴重的并發癥之一。目前認為患者免疫耐受機制破壞，細胞免疫和體液免疫功能失調，補體旁路途徑激活，造成大量自身抗體產生，并在腎臟沉積是導致LN發病的基本環節［7］。LN有著很高的患病率和死亡率，有報道在上世紀九十年代狼瘡腎炎患者5年和10年的存活率分別為83%-92%和74-84%［8］。盡管在近二十年來，對SLE的診療有了很大的改善，LN的預后依然不理想，約有25%的病人在發現有腎損害的10年后惡化為終未期腎衰竭［9］。LN以交替的發作和緩解為特點，這就要求對其進行長期的跟蹤和監測以便隨時更改治療方案。LN腎病早期除腎小球病變外還較普遍的存在腎小管間質的損傷。因此，及時的了解腎小球和腎小管的損害程度對LN的早期診斷，采取及時的干預措施對延緩腎臟疾病的發展具有重要的臨床意義［10］。

Cys C是由122個氨基酸殘基組成，分子量為13.3KD，帶正電荷，等電點為9.3堿性非糖化蛋白質，是半胱氨酸蛋白酶抑制劑家族的成員之一。編碼Cys C的基因位于20號染色體短臂，長約615kb，由三個外顯子和二個內含子組成，屬于“管家基因”，能在幾乎所有的有核細胞表達，無組織學特異性，故機體Cys C產生率相當恒定［11，12］。Cys C屬分泌性蛋白質，廣泛存在于各種體液中，其中精液和腦脊液中濃度最高、尿液中最低，可經腎小球自由濾過，在近曲小管被重吸收并降解。腎臟是清除循環中Cys C的惟一器官，GFR是決定血清Cys C濃度的主要因素［13］。當腎功能受損時，Cys C能敏感的反應其受損的狀況及其受損的部位，若是腎小球的病變，血清中的Cys就會顯著升高；若是腎小管的病變，經腎小球濾過的Cys C在腎小管不能被完全分解代謝，尿液中的Cys C就會升高。

本文通過對89例SLE患者不同臨床分期的血清及尿液胱抑素C的檢測結果分析，發現隨著SLE腎損傷的病程發展，血清及尿Cys C隨著24h UmAlb的增加明顯的呈現逐漸增高的趨勢。實驗結果顯示，LN2組的血清及尿Cys C水平均顯著高于LN1組、SLE組及對照組（p＜0.05）；LN1組顯著高于SLE組和對照組（p＜0.05）；SLE組也顯著高于對照組。這與SLE患者腎功能的受損常同時累及腎小球和腎小管是相一致的，此前已有相關研究表明血清中的Cys C能較傳統的腎功能指標更為敏感的反映腎小球濾過率的變化，尿液中的Cys C能敏感的反映腎小管的受損狀況。用ROC曲線分析結果顯示Cys C和β2-MG的AUC（area under the curve）相當，分別為0.977和0.965，Urea、Cr的AUC分別為0.781和0.851（P＜0.05），這個結果顯示Cys C和β2-微球蛋白在對系統性紅斑狼瘡的腎損害的診斷上明顯優于Urea、Cr。本實驗結果證實了Cys C能敏感地反映腎小球和腎小管的功能，可作為SLE早期腎功能損傷評價的指標。

［1］周江紅，劉南田，and朱海萍.系統性紅斑狼瘡.國外醫學：護理學分冊，2005.24（1）：p.23-24

［2］張鳳山，et al.來氟米特治療31例狼瘡腎炎的臨床研究.中華風濕病學雜志，2002.6（4）：p.282-284

［3］余學清and陳楠.狼瘡腎炎治療現狀及應注意的幾個問題.中華腎臟病雜志，2002.18（1）：p.7-8

［4］俸家富，羅軍，and李少林.胱抑素C-腎小球濾過率肌酐替代標記物 ［J］.國外醫學：臨床生物化學與檢驗學分冊，2005.26（3）：p.168-172

［5］王國春，et al.2010年美國風濕病學會年會會議紀要 ［J］.中華風濕病學雜志，2011.15（1）：p.46-48