灰樹花多糖對高血壓大鼠的血壓及心臟、腎臟超微結構的影響

張立霞 楊 靜 倪艷波 李長城 邵一葉

(濱州醫學院，山東 煙臺 264003)

治療高血壓藥物的安全性及其副作用已成為重要問題。近年來，人們希望得到有效且安全、副作用小的抗高血壓藥物。灰樹花又名貝葉多孔菌，是一種珍惜的食藥兩用菌。灰樹花多糖的免疫增強功能已經獲得了廣泛的認可，據相關報道，灰樹花多糖還有抗HIV病毒，調節血糖、血脂、膽固醇水平〔1～4〕，抗氧化和防衰老的作用〔5，6〕，有的研究已經將其作為抗癌藥物應用于臨床〔7，8〕。可顯著抑制血壓、血脂和體重的增加，但后對于灰樹花對高血壓的影響的報道極少。本研究通過對高血壓大鼠血壓的檢測及其心臟、腎臟形態結構、超微結構的觀察，發現灰樹花多糖對高血壓導致的大鼠心臟、腎臟的損傷有保護作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 體重180～200 g的雌性SD大鼠，由濱州醫學院動物中心提供。

1.2 主要藥品及儀器 灰樹花多糖，由浙江方格藥業有限公司;硝苯地平，10 mg/片，由山西太原藥業有限公司提供;BP-6無創血壓測試儀，成都泰盟科技有限公司;BX51生物顯微鏡，奧林巴斯株式會社;JEM1400透射電子顯微鏡，日本電子。

1.3 動物模型的制備 參照文獻〔9〕方法，加以改進。取3周齡的SD大鼠(體重在180～200 g)，適應性喂養1 w后，除對照組外各組給予高鹽顆粒飼料(含8%氯化鈉)，飲用含0.85%氯化鈉的自來水，BP-6無創血壓測試儀2次/w進行血壓檢測飼養4 w后血壓明顯升高并穩定，血壓穩定1 w(成模后，正常飲食)開始實驗，灌胃給藥4 w，實驗過程中予以正常飲食。

1.4 實驗動物分組 實驗動物分為對照組(1 ml/100 g生理鹽水)、硝苯地平組(0.005 g/kg)、模型組、灰樹花多糖低(0.075 g/kg)、中(0.100 g/kg)、高劑量組(0.150 g/kg)，每組10只。

1.5 動物取材、觀察 實驗動物取材后多聚甲醛固定，石蠟包埋，切片，HE染色觀察心臟、腎臟形態學結構的變化;透射電子顯微鏡標本按照其要求取材、固定、包埋、切片、染色，觀察心臟、腎臟超微結構的變化。

1.6 統計學方法 采用SPSS13.0軟件進行t檢驗。

2 結果

2.1 灰樹花多糖對大鼠收縮壓的影響 高鹽飲食4 w后，除對照組外，各組收縮壓都顯著升高(P＜0.01)且穩定。灌胃給藥灰樹花多糖高、中、低劑量4 w后，與模型組相比，三組血壓顯著下降(P＜0.01);且灰樹花多糖高、中、低劑量組之間收縮壓下降水平無顯著性差異(P＞0.05);灌胃給藥硝苯地平4 w后與模型組相比，硝苯地平組血壓顯著下降(P＜0.01)，且其血壓下降水平與灰樹花高、中、低劑量組有差異，但不明顯(P＞0.05)。見表1。

表1 各組大鼠收縮壓變化，mmHg，n=10)

表1 各組大鼠收縮壓變化，mmHg，n=10)

與模型組比較:1)P＜0.01

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2.2 組織形態觀察 HE染色后觀察發現，模型組心臟、腎臟損傷嚴重。心臟中、小血管壁增厚，心肌細胞腫脹，部分區域可見炎性細胞浸潤;腎臟皮質部分腎小球腫脹，囊腔消失，腎小體失去正常結構，可見大片腎小體形態改變的區域性。灰樹花多糖各組及硝苯地平組心臟、腎臟在形態學損傷較模型組為輕，心臟亦可見心內中、小血管壁增厚，但增厚程度較模型組有所減輕，未見炎性細胞浸潤及心肌細胞腫脹區域;腎臟皮質部分損傷減輕，特別是灰樹花多糖高劑量組，腎皮質中未見成片損傷的腎小體。見圖1，圖2。

圖1 各組大鼠心臟組織形態觀察(HE，×400)

圖2 各組大鼠腎臟組織形態觀察(HE，×400)

2.3 電子顯微鏡觀察 電子顯微鏡觀察發現，模型組心臟、腎臟超微結構損害較重。心臟超微結構可見，模型組線粒體排列不規則，部分區域線粒體增多，聚集。灰樹花多糖各組及硝苯地平對照組線粒體增生情況較模型組輕，線粒體與肌纖維的排列也較規則。模型組的腎臟超微觀察可見，腎小球部分區域可見基底膜增厚，厚薄不均勻，足突融合，系膜插入-系膜細胞增生，插入至血管內皮細胞與基底膜之間。灰樹花多糖各組及硝苯地平對照組亦可見少量的基底膜厚薄不均勻，及足突融合，但其程度及范圍均較模型組有所減輕。見圖3，圖4。

圖3 各組大鼠心臟超微結構

圖4 各組大鼠腎臟超微結構

3 討論

高血壓是一種以動脈血壓持續升高為主要表現的慢性疾病，常引起心臟、腦、腎臟等重要器官的病變并出現相應的后果。本研究發現經過長達4 w的高鹽飲食可以導致大鼠血壓升高并穩定，引起心臟、腎臟的器質性病變。灰樹花多糖可以對高血壓心臟、腎臟的病理學變化起到一定的保護作用，其效果與陽性對照組藥物相似，甚至在對腎臟的保護作用上，大劑量的灰樹花多糖組優于硝苯地平對照藥物組。

心臟在高血壓的早期變化主要為心內中、小血管的管壁增厚。研究發現灰樹花多糖可以使心臟損傷情況得到改善。

腎臟對高血壓極為敏感，其損傷較重，部分腎小體失去其正常的生理結構，這些損傷的腎小體呈局域性出現，部分區域的腎小體結構仍為正常的。本研究結果提示灰樹花多糖在超微結構上看其對高血壓大鼠腎臟損傷的保護作用優于硝苯地平。較大劑量的灰樹花多糖對高血壓心臟、腎臟的保護作用有可能因為其可以較好的降低血壓，以致因高血壓引起的心臟腎臟損傷不再加重;亦有可能因為其能改善心臟、腎臟因高血壓引起的損害，以達到保護心臟、腎臟的作用，具體機制有待進一步研究。

1 Fan Y，Wu X，Zhang M，et al.Physical characteristics and antioxidant effect of polysaccharides extracted by boiling water and enzymolysis from Grifola frondosa〔J〕.Int J Biol Macromol，2011;48(5):798-803.

2 Masuda Y，Ito K，Konishi M，et al.A polysaccharide extracted from Grifola frondosa enhances the anti-tumor activity of bone marrow-derived dendritic cell-based immunotherapy against murine colon cancer〔J〕.Cancer Immunol Immunother，2010;59(10):1531-41.

3 Kodama LH，de Stanchina E，Zhou XK，et al.Maitake beta-glucan promotes recovery of leukocytes and myeloid cell function in peripheral blood from paclitaxel hematotoxicity〔J〕.Cancer Immunol Immunother，2010;59(6):885-97.

4 Kodama N，Komuta K，Sakai N，et al.Effect s of D-Fraction，a polysaccharide from Grifola frondosa on tumor growth involve activation of NK cells〔J〕.Biol Pharm Bull，2002;39:1647-70.

5 雷學軍.抗氧自由基的天然藥物〔J〕.日用化學工業，1997;27(5):35-9.

6 邊 杉，葉波平，吳梧桐.灰樹花多糖的研究進展〔J〕.藥物生物技術，2004;11(1):60-3.

7 徐錚奎.灰樹花多糖抗癌作用及相關產品開發進展〔J〕.上海醫藥，2010;31(11):496-7.

8 劉 安，臧立華，孫慶濟.灰樹花多糖抗腫瘤作用的臨床觀察〔J〕.山東輕工業學院學報，2008;22(2):43-5.

9 Ohno N，Suzuki I，Oikawa S，et al.Antitumor activity and structural characterization of gluons extract from cultured fruit bodies of Grifola frondosa〔J〕.Chem Pharm Bull，1984;32(3):1142-51.