當歸紅花湯對糖酵解供能條件下力竭性游泳訓練小鼠耐缺氧能力、抗疲勞能力的影響

蔣 麗 殷 勁

(成都體育學院運動醫學系，四川 成都 610041)

現階段中藥治療運動性疲勞多存在針對性不足的問題，未能根據疲勞產生的主要環節及不同運動項目給藥;且中藥治療運動性疲勞多用補益之法，然單純補益雖可消除疲勞，但往往使運動員感到口舌干燥、胸中憋悶等不良反應，故抗運動性疲勞中藥配伍組方應調理、補益并重。反復短時力竭性訓練所致的疲勞在糖無氧酵解供能為主的速度耐力性項目運動員身上多見，對運動員的身心健康和運動水平造成了嚴重的影響，如何提高機體耐缺氧能力，緩解機體在短時力竭訓練疲勞階段的缺血缺氧狀況，保護運動員內臟器官不受損傷就成為關鍵所在〔1〕。當歸紅花湯，由當歸、紅花兩味藥組成，具有很強的調理氣血、提高機體耐缺氧能力〔2～4〕。本研究探討當歸紅花湯對糖酵解供能條件下力竭性游泳訓練小鼠的影響。

1 實驗材料與方法

1.1 實驗儀器與實驗設備 當歸紅花湯制備:中藥回流提取裝置1套，調溫電烤箱1個;實驗中小鼠灌胃:12號針頭(針尖磨鈍)1個。

1.2 中藥組成與加工 當歸紅花湯復方，由當歸、紅花等為主要組方組成。實驗動物服用劑量按成人每公斤體重劑量的10倍計算。所有中藥均由成都同仁堂藥店購入。藥物制備:取紅花等味藥，精選、洗凈、烘干、切碎，得凈生藥。稱量配齊。先加8倍量的乙醇，用中藥回流提取裝置回流1 h，得提取液，過濾;再加5倍量的乙醇回流30 min，得提取液，過濾，合并兩次所得濾液，過濾得清液，25℃下減壓濃縮至相對密度為1.3～1.32的稠膏。在40℃～50℃下干燥為干粉。用時將干粉倒入少量溫開水中，使1 ml藥液中含生藥0.36 g，充分攪拌、搖勻。

1.3 實驗動物與分組 由成都中醫藥大學實驗動物中心提供昆明種健康小鼠63只，雌雄各半，年齡60～80歲，體重28～32 g，分籠飼養，予以標準顆粒飼料和自來水飼養，保持籠內通風干燥。

1.4 研究方法 將63只小鼠隨機分為三組:M組(服用當歸紅花湯，參加訓練，n=28)、C組(運動對照組，不服用當歸紅花湯，參加訓練，n=28)和R組(安靜對照組，不服用當歸紅花湯，不參加訓練，n=7);再將M組和C組各分為四個小組:C1組(過度訓練1 d組，n=7);C2組(過度訓練5 d組，n=7);C3組(過度訓練10 d組，n=7);C4組(過度訓練15 d組，n=7)和M1組(過度訓練1 d組，n=7);M2組(過度訓練5 d組，n=7);M3組(過度訓練10 d組，n=7);M4組(過度訓練15 d組，n=7)。將56小鼠進行模擬乳酸能代謝的短時負重劇烈游泳訓練，在力竭訓練游泳后即刻、5、10、15 d，分別測定血乳酸含量、CK、LDH總活性以及在光鏡下觀察肝臟和腎臟結構改變。訓練期間，每日測定小鼠的體重、游泳時間，觀察其精神、飲食狀況等。

1.5 統計學處理 采用SPSS9.0軟件進行獨立樣本t檢驗。

2 結果

2.1 一般情況和體重 實驗期前11 d，游泳訓練的各組小鼠活動力增強，游泳時間延長，眼睛鮮紅而有精神，被毛濃密有光澤，無松散毛，無豎毛現象，呼吸正常，食欲正常;對敲籠反應敏捷，大便正常，用藥組小鼠實驗期間體重呈正性增長，實驗后體重(35.1±1.9)g比實驗前體重(29.1±1.8)g有顯著增高，為19.59%，在第10天，用藥組小鼠體重達到最高峰(37.8±1.9)g;第12天起，用藥組小鼠活動力逐漸減弱，游泳時間逐漸變短，籠內休息聚團、少動、反應遲鈍、大便稍稀，但敲籠反應尚可，食欲較前有所下降，體重增長緩慢。

實驗期前9 d，對照組小鼠運動時間逐漸增加，但是增加幅度小于用藥組小鼠，逐漸表現出倦怠、少動等癥狀。對照組小鼠整個實驗期間體重有明顯下降，實驗后體重(26.7±1.5)g比實驗前體重(28.9±1.7)g下降7.61%。從第9天開始，過度訓練各組小鼠均出現納差、少動、籠內休息時間聚團、豎毛、大便稀溏、肛門可見稀便沾著。第13天起，籠內聚團休息、倦臥、不動、眼神暗淡，毛松散、無光澤、被毛有脫落現象，對敲籠反應遲鈍、大便稀溏、肛門口有稀便沾著、平靜時呼吸發出聲音，進食量下降，嗜睡。第14天，對照組小鼠體重明顯減輕、極度衰弱、游泳時間縮短。

2.2 血乳酸含量，LDH總活性和CK總活性測定結果 用藥組小鼠過度訓練第1、5、15天最大血乳酸含量與相同時間對照組過度訓練小鼠相比，并無顯著差異(P＞0.05);用藥組小鼠在過度訓練第10天最大血乳酸含量較對照組小鼠明顯降低(P＜0.01)。用藥組小鼠過度訓練第1天LDH總活性測定值與對照組過度訓練第1天小鼠相比，并無顯著差異(P＞0.05);用藥組小鼠過度訓練第5天LDH總活性測定值與對照組相比有差異(P＜0.05);用藥組小鼠在過度訓練10、15 d的LDH測定值較相同時間過度訓練的對照組有較明顯升高(P＜0.01)。用藥組小鼠過度訓練1 d CK總活性測定值與對照組相比，無顯著差異(P＞0.05);用藥組小鼠在過度訓練5、10、15 d的CK總活性測定值較相同時間過度訓練的對照組有較明顯升高(P＜0.01)。見表1。

表1 用藥組、對照組小鼠血乳酸含量，LDH和CK測定值比較

表1 用藥組、對照組小鼠血乳酸含量，LDH和CK測定值比較

與對照組相比:1)P＜0.05，2)P＜0.01

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2.3 肝臟和腎臟光鏡觀察結果 未服用當歸紅花湯過度訓練15 d組7例小鼠的肝右葉在光鏡下HE片均顯示肝細胞廣泛、彌漫性水變性，肝細胞明顯腫大，胞漿疏松、半透明;肝細胞索排列紊亂、擁擠、肝竇受壓變窄甚至消失，核變小，深染，匯管區及小葉間血管擴張淤血，間質有局灶性中性粒細胞浸潤。服用當歸紅花湯過度訓練15 d組7例小鼠的肝右葉在光鏡下HE片顯示有程度不等的肝細胞水變性，有5例小鼠為少量肝細胞水變性，其余2例范圍稍大，但多為正常肝細胞，細胞質嗜酸性，HE染色較紅，含有粒狀或小塊狀的嗜堿性物質;肝索整齊明顯，無炎癥反應，此組有5例小鼠在光鏡下可見肝細胞出現明顯再生，再生的肝細胞體積較大，核大而染色較深，可見雙核，胞漿略呈嗜堿性。未服用當歸紅花湯過度訓練15 d組7例小鼠的腎臟皮質部分在光鏡下HE片均顯示腎近曲小管、遠曲小管上皮細胞水變性較嚴重，細胞體積變大，胞質變得較透明、淡染;腎小球周圍、間質及血管有炎癥反應，系小灶性淋巴細胞浸潤，部分腎小管里有管型。服用當歸紅花湯過度訓練15 d組4例小鼠的腎臟在光鏡下HE片顯示腎小球及腎小管結構正常，胞質嗜酸性較強，游離面可見刷狀緣，皮質血管有輕微淤血、擴張;有3例小鼠腎近曲小管、腎遠曲小管上皮細胞輕度水變性，腎小球結構正常。

3 討論

當歸Angelica sinensis(Oliv.)Diels.(Chinese Angelica)為傘形科多年生草本植物的根。甘，辛，溫，歸心，肝，脾經;補血，活血，止痛，潤腸，通補兼施，有血中圣藥之稱，酒制能加強活血的功效;其藥理作用:破惡血，養新血《日華子本草》;治頭痛，和血補血《本草綱目》;潤燥滑腸《本草備要》。紅花Carthamus tinctorious L.(Safflower)為菊科2年生草本植物的干燥花，辛，溫，歸心，肝經;活血，散瘀止痛，《開寶本草》認為酒煮服，亦主盅毒下血;《本草綱目》有活血潤燥，止痛散腫之說〔3～6〕。按中醫理論，以當歸、紅花兩味藥為主要組方的當歸紅花湯復方應具有很強的活血、養血、補血的功效，《素問.至真要大論》指出當歸、紅花等活血藥可以發揮“疏其血氣，令其調達，而至和平”的作用，而良好的血供不僅回收運動所致的局部代謝產物堆積，也帶來了運動所急需的氧及其他營養物質，有效改善機體缺氧的狀況，改善機體的血液循環，增強機體抗疲勞、耐缺氧的能力，促進過度訓練后機體疲勞的恢復〔7～9〕。

短時力竭游泳訓練模型，在無氧運動的疲勞階段，整個機體處于一種極度缺氧狀態，運動負荷與機體機能過分相適應，以致疲勞連續積累引起一系列功能紊亂和病理狀態;由于缺氧，使肝臟組織和細胞受到中等程度損傷，導致腎小管缺血缺氧性損傷，心肌細胞也由于缺血缺氧而產生損傷，免疫機能及運動能力下降等癥狀〔10～18〕。

當歸紅花湯能有效改善小鼠糖酵解供能條件下力竭性游泳訓練所致疲勞及肝腎病理改變，并對糖酵解供能條件下力竭性游泳訓練小鼠的耐缺氧、抗疲勞和無氧運動能力有提高作用。

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