GSTM1基因多態性與老年高血壓患者肝臟耐降壓藥損害的相關性

陳秀紅 蘇 婭 吳 懇 吳超英 羊江鴻

(海南省干部療養院，海南 海口 571100)

老年高血壓患者在治療的過程中往往使用兩種或以上的降壓藥，而這些降壓藥可能會對老年患者的肝、腎等器官造成嚴重影響。藥物在肝臟的代謝與生物轉化酶類具有密切的關聯性，谷胱甘肽轉移酶(GSTM)1是肝臟生物轉化的重要酶類之一，該酶基因的多態性對酶的功能可產生影響，從而間接影響肝臟的生物轉化能力。硝苯地平和依那普利是臨床中經常用到的降壓藥〔1～3〕。本課題組對長期服用此兩類藥物進行降壓的患者進行比對研究，試圖了解此兩類藥物對老年患者肝臟的損害情況及GSTM1基因多態性與患者肝臟對以上兩類藥物所致損害的耐受性的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料及納入標準 納入2010～2012年在我院就診的老年原發性高血壓患者，所有患者均符合以下條件:年齡60～80歲，近5年主要使用硝苯地平(硝苯地平控釋片，20 mg)和依那普利(10 mg，2次/d)進行降壓，排除肝腎功能不全、心肌梗死等器質性疾病。

根據以上標準，選擇417例患者作為實驗組，其中男281例，女136例，平均年齡(75.6±6.4)歲。選擇同期在我院進行體檢的健康人群420例作為對照組，其中男285例，女135例，平均年齡(74.7±5.3)歲。兩組患者的基本資料經統計學分析顯示具有可比性(P＞0.05)。

1.2 方法

1.2.1 樣本的采集方法 實驗組和對照組患者均于清晨采集EDTA抗凝血和促凝血各2 ml，促凝血收集血清用于酶學測定，抗凝血用于基因檢測。

1.2.2 血清酶的測定方法 采用全自動生化分析儀測定所有患者的血清谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)及堿性磷酸酶(AKP)活性。

1.2.3 基因多態性的檢測 采集患者外周血，提取基因組DNA。利用PCR的方法擴增包括GSTM1多態性位點rs412502的區段。引物為:P1(ttctgtgggttgttacttcat)，P2(cgattatatctgagacctcaac)，擴增片段為220 bp。反應體系為:15μl反應體系中含有1 μl基因組 DNA，1.5 μl 10倍緩沖液，0.3 μl dNTP，0.15 μl引物混合物。反應條件:95℃預熱3 min;94℃ 15 s，60℃ 15 s，72℃ 30 s 循環 11 次;94℃ 15 s，54℃ 15 s，72℃ 30 s，循環 24次;72℃ 3 min。將PCR產物送上海捷瑞生物工程有限公司進行序列測定。

1.3 統計學方法 采用SPSS13.0軟件進行t和χ2檢驗。

2 結果

2.1 血清酶學檢測結果 實驗組中三種酶的活性均高于對照組，尤其是ALT和AKP的活性組間差異具有統計學意義(P＜0.05)。將ALT＞40 U/L或AKP活性＞128 U/L的病例判定為肝損害發生者，實驗組417例患者中有249例發生肝損害，168例未發生肝損害。見表1。

表1 實驗組與對照組血清酶活性的檢測結果

2.2 基因多態性檢測結果 rs412502多態位點可檢測出CC、CT、TT三種基因型，實驗組中以上三種基因型出現的頻率為25.18%、59.23%、15.59%，發生肝損害的頻率為 18.7%、34.53%、6.47%，未發生肝損害的比率為 6.47%、24.7%、9.11%。統計學分析結果顯示CC和TT基因型的發生率在肝損害組和未損害組間的差異均具有統計學意義(P＜0.05)。

3 討論

肝是體內生物轉化的主要器官，也是藥物代謝及排泄的重要轉化場所〔4〕。幾乎所有的藥物最終都要通過肝臟細胞的生物轉化作用后才能排出體外。在服用藥物的過程中，往往容易對肝造成一定的損傷，此即藥物性肝損傷。對身體機能已經衰退的老年人來說，肝損傷更容易發生。肝臟損害可影響到全身的代謝狀況，從而進一步引發其他組織器官的損害，惡化老年患者的身體狀況〔5，6〕。

老年高血壓的患病率較高，是影響老年人生命質量重要的因素之一。由于高血壓很難治愈，患者需要長期服用降壓藥。目前降壓藥種類很多，硝苯地平和依那普利是臨床中的常用藥。盡管關于硝苯地平的副作用已有相關的報道，但對于此兩類藥物聯用對肝臟造成的損傷研究尚少，AST、AST、AKP均存在于正常的血清中，而在全身的組織器官中，以上三種酶類含量最豐富的屬肝細胞。當肝臟受到損傷，部分肝細胞的破裂將會使血清中此三類酶活性發生很大的變化，因此血清中此三類酶的活性升高可反映肝臟的損傷情況。本研究結果說明長期服用硝苯地平和依那普利的確對老年患者的肝臟造成了損傷。

基因多態性對機體的代謝具有重要的影響，目前已經發現多種基因位點的SNP多態性可引起機體對藥物代謝的差異。GSTM是肝臟生物轉化Ⅱ相反應中的重要酶類，對藥物的代謝及排泄具有重要的意義〔7〕。截止到2012年底，該基因有153個SNP位點登陸NCBI數據庫，rs412502是位于GSTM1基因5'端非翻譯區的一個單核苷酸多態位點，該位點的基因型可能影響到基因的翻譯效率，從而影響機體相關的代謝途徑。本研究結果說明rs412502多態性與高血壓患者的肝損害耐受性有關，TT型可增強患者對硝苯地平和依那普利所致肝損害的耐受性，對肝臟起到一定的保護作用。

1 方寧遠，汪海婭.老年高血壓診治進展〔J〕.老年醫學與保健，2012;18(1):3-5.

2 中國居民營養與健康狀況調查技術執行組.中國居民2002年營養與健康狀況調查〔J〕.中華流行病學雜志，2005;26(7):478-84.

3 張 瑾.降壓藥臨床應用進展〔J〕.中國當代醫藥，2012;19(30):20-1.

4 蔡玉華，胥振國，杜 江，等.血脂檢測在脂肪肝診斷中應用價值〔J〕.蚌埠醫學院學報，2013;38(1):97-8.

5 過 瑞.老年慢性病患者急性藥物性肝損傷的臨床觀察〔J〕.中國老年保健醫學，2011;9(1):18.

6 張贛生，保志軍，鄒 健，等.老年藥物性肝損傷的臨床特點〔J〕.老年醫學與保健，2010;16(3):163-5.

7 聶立紅.谷胱甘肽硫轉移酶研究進展〔J〕.中國病理生理雜志，2000;16(11):1240-3.