轉(zhuǎn)基因大豆GTS 40-3-2基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)聯(lián)合定值研究及不確定度分析

劉瑛穎 隋志偉 王 晶 傅博強(qiáng)

(中國計(jì)量科學(xué)研究院，北京 100013)

0 引言

近年來，全球農(nóng)業(yè)生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)取得了巨大發(fā)展，轉(zhuǎn)基因作物種植面積逐年上升。轉(zhuǎn)基因大豆為主要種植的轉(zhuǎn)基因作物，2009 年種植面積達(dá)到6920萬公頃，占全世界轉(zhuǎn)基因作物種植面積的52%[1]。

大豆品系GTS 40-3-2是由加拿大孟山都公司(Monsanto)開發(fā)的，它使得在大豆種植中可以選用草甘膦做除草劑。GTS40-3-2抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆是通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)方法，將矮牽牛Ti 質(zhì)粒(CaMy)中35S啟動子控制epsps 基因?qū)氲酱蠖怪仓?，培育成的新大豆品種，其含有的4個(gè)來源于土壤細(xì)菌(Agrobacteriumspp.CP4)的5-烯醇丙酮莽草酸-3-膦酸合成酶(epsps)基因，是草甘膦抗性的主要來源[2]。

轉(zhuǎn)基因大豆在全球范圍的迅猛發(fā)展也使其食用安全和環(huán)境安全問題引起了各國政府和相關(guān)國際組織的高度重視，紛紛出臺了轉(zhuǎn)基因生物安全管理相應(yīng)的法規(guī)，對轉(zhuǎn)基因植物檢測技術(shù)的靈敏度和準(zhǔn)確性提出了高標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)要求。目前農(nóng)業(yè)部已經(jīng)頒布了轉(zhuǎn)基因大豆定性PCR檢測方法的國家標(biāo)準(zhǔn)，而我國卻缺乏轉(zhuǎn)基因大豆產(chǎn)品的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，這就要求加快對轉(zhuǎn)基因大豆GTS40-3-2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制。轉(zhuǎn)基因大豆GTS40-3-2標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的研制可用于轉(zhuǎn)基因大豆檢測和安全評價(jià)、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制、轉(zhuǎn)基因大豆GTS40-3-2的定量檢測等領(lǐng)域。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

主要試劑：Taqman PCR master mix試劑盒(美國ABI)，內(nèi)標(biāo)基因引物、外源基因引物和TaqMan 探針(上海英峻)，植物基因組提取試劑盒(天根生物)。3個(gè)水平的轉(zhuǎn)基因大豆GTS40-3-2基體標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和純陽性材料由上海交通大學(xué)提供?！?br>