銀杏胞質抗壞血酸過氧化物酶基因（APX）克隆及表達特性分析

程華 李琳玲等

摘 要： 【目的】分離和克隆銀杏細胞質抗壞血酸過氧化物酶基因GbAPX1 （GenBank 登錄號為 FJ555021），了解其在銀杏正常組織發育以及響應環境脅迫和逆境相關激素誘導的表達情況。【方法】利用同源克隆及RACE技術從銀杏葉片細胞質中分離得到GbAPX1全長cDNA序列，用生物信息學方法對獲得的cDNA序列及推測的氨基酸序列進行分析，并用實時定量PCR方法研究GbAPX1在不同組織、不同激素和脅迫處理下的表達模式。【結果】克隆GbAPX1基因全長cDNA序列為965 bp，包含一個759 bp的最大讀碼框，編碼252個氨基酸；預測該基因編碼蛋白質分子量為27.6 kDa，其等電點為5.81。系統進化樹分析表明， GbAPX1和其他裸子植物同源性較高并聚為一類。qRT-PCR分析結果顯示，GbAPX1表達具有組織和發育時期差異性，在成熟葉片和雄蕊中具有最高表達水平，在莖和嫩葉中表達水平較低。誘導表達分析表明，GbAPX1受到激素和環境壓力誘導。其中，脫落酸、水楊酸、茉莉酸甲酯和紫外輻射均能誘導其轉錄上升，而乙烯利和傷害處理對GbAPX1轉錄水平無顯著影響。【結論】確認獲得序列為GbAPX1基因cDNA序列；GbAPX1不僅參與了銀杏正常的組織生長發育，還與一些環境脅迫和逆境相關激素誘導表達有關。

關鍵詞： 銀杏； 胞質APX1； 脅迫和激素； 調控

中圖分類號：S664.3 文獻標志碼：A 文章編號：1009-9980