雅培i2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀性能評(píng)價(jià)方法研究

[摘要] 目的 對(duì)雅培i2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的性能進(jìn)行了評(píng)價(jià)。方法 參考《YY/T 1155-2009全自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀》醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局頒布的有關(guān)醫(yī)療器械檢定校準(zhǔn)計(jì)量技術(shù)規(guī)范，闡述了準(zhǔn)確度、重復(fù)性、線性范圍、交叉污染等指標(biāo)的評(píng)價(jià)方法和選取理由。結(jié)果 準(zhǔn)確度：197 pmol/L胰島素標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定結(jié)果誤差為6 pmol/L，20 pmol/L胰島素標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定結(jié)果誤差為2 pmol/L；重復(fù)性：對(duì)20 pmol/L的胰島素標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)測(cè)定6次，6次測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2%；穩(wěn)定性：開機(jī)4 h后和8 h后的相對(duì)偏差分別為3%和4%；線性范圍：20～197 pmol/L的胰島素范圍內(nèi)，其線性相關(guān)系數(shù)可達(dá)到0.997；交叉污染：從低到高交叉污染率為1%，從高到低交叉污染率為0.2%。結(jié)論 提出的方法可用于日常全自動(dòng)免疫分析儀性能的評(píng)價(jià)和校準(zhǔn)，有助于檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確和可比。

[關(guān)鍵詞] 全自動(dòng)免疫分析儀；評(píng)價(jià)；校準(zhǔn)；準(zhǔn)確度；重復(fù)性；線性范圍；交叉污染

[中圖分類號(hào)] TP23 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616（2013）07-75-03

全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀是一種利用化學(xué)發(fā)光原理結(jié)合免疫技術(shù)對(duì)樣本中痕量物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的儀器，它結(jié)合了化學(xué)發(fā)光和免疫兩方面的優(yōu)勢(shì)，從而具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高、特異性好、背景干擾小的優(yōu)點(diǎn)，近幾年在臨床檢驗(yàn)和食品安全等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用[1-2]。儀器的準(zhǔn)確可靠是獲得良好數(shù)據(jù)的前提和基礎(chǔ)，為了保證全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的準(zhǔn)確，國家制定了《YY/T 1155-2009全自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀》行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，但是該標(biāo)準(zhǔn)主要用于儀器的注冊(cè)檢驗(yàn)，用于日常的計(jì)量校準(zhǔn)則較為嚴(yán)格和繁瑣。本研究在該標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上[3- 4]，參考國家頒布的《半自動(dòng)生化分析儀》等醫(yī)療器械檢定規(guī)程中類似指標(biāo)的計(jì)量方法

以及相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上[5-7]，對(duì)雅培i2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的準(zhǔn)確度、重復(fù)性、線性范圍、交叉污染等進(jìn)行了評(píng)價(jià)。此方法可用于日常全自動(dòng)免疫分析儀性能的評(píng)價(jià)和校準(zhǔn)，有助于檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確和可比。

1 儀器與試劑

全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（美國雅培i2000）；試劑為胰島素測(cè)定試劑盒及定標(biāo)液（美國雅培）；質(zhì)控品來自美國雅培公司；采用系列胰島素標(biāo)準(zhǔn)溶液作為樣本（中國計(jì)量科學(xué)研究院）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

首先采用廠家提供的檢測(cè)試劑盒和胰島素定標(biāo)液對(duì)雅培i2000儀器進(jìn)行定標(biāo)，定標(biāo)通過后測(cè)定質(zhì)控，當(dāng)質(zhì)控符合要求后進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)。

雅培i2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光

免疫分析儀性能評(píng)價(jià)方法研究

郭 楠 房亞哲 楊 琦 李寶萍 楊曦明▲

北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院檢驗(yàn)科，北京 100700

[摘要] 目的 對(duì)雅培i2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的性能進(jìn)行了評(píng)價(jià)。方法 參考《YY/T 1155-2009全自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀》醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局頒布的有關(guān)醫(yī)療器械檢定校準(zhǔn)計(jì)量技術(shù)規(guī)范，闡述了準(zhǔn)確度、重復(fù)性、線性范圍、交叉污染等指標(biāo)的評(píng)價(jià)方法和選取理由。結(jié)果 準(zhǔn)確度：197 pmol/L胰島素標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定結(jié)果誤差為6 pmol/L，20 pmol/L胰島素標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定結(jié)果誤差為2 pmol/L；重復(fù)性：對(duì)20 pmol/L的胰島素標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)測(cè)定6次，6次測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2%；穩(wěn)定性：開機(jī)4 h后和8 h后的相對(duì)偏差分別為3%和4%；線性范圍：20～197 pmol/L的胰島素范圍內(nèi)，其線性相關(guān)系數(shù)可達(dá)到0.997；交叉污染：從低到高交叉污染率為1%，從高到低交叉污染率為0.2%。結(jié)論 提出的方法可用于日常全自動(dòng)免疫分析儀性能的評(píng)價(jià)和校準(zhǔn)，有助于檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確和可比。

[關(guān)鍵詞] 全自動(dòng)免疫分析儀；評(píng)價(jià)；校準(zhǔn)；準(zhǔn)確度；重復(fù)性；線性范圍；交叉污染

[中圖分類號(hào)] TP23 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616（2013）07-75-03

Study on the performance evaluation of ARCHITECT i2000 automatic chemiluminescence immunoassay analyzer

GUO Nan FANG Yazhe YANG Qi LI Baoping YANG Ximing

Department of Clinical Laboratory，Dongzhimen Hospital Affiliated to Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100700，China

[Abstract] Objective To evaluate the performance of ARCHITECT i2000 automatic chemiluminescence immunoassay analyzer. Methods With refer to the YY/T 1155-2009 automatic chemiluminescence immunoassay analyzer and related regulations published by the State Administration of Quality Supervision， Inspection and Quarantine， the protocols for accuracy， reproducibility， linear range， cross-contamination and so on were described in detail. Results Accuracy： the bias was 6pmol/L for 197pmol/L insulin sample and 2 pmol/L for 20 pmol/Linsulin sanple. Reproducibility： the standard deviation was 2% for 6 times analyses of 20 pmol/Linsulin sample. Stability： the relative bias was 3% and 4%， respectively， after 4 and 8 hours from power on. Linear range： the linear coefficient factor was 0.997 from 20 to 197pmol/L of insulin. cross-contamination： 1% from low level to high level and 0.2% from high level to low level. Conclusion The proposed protocols can be used for routine performance evaluation of automatic chemiluminescence immunoassay analyzer and can benefit the accuracy and comparability of clinical diagnostic results.

[Key words] Automatic chemiluminescence immunoassay analyzer；Evaluation；Calibration；Accuracy；Reproducibility；Linear range；Cross-contamination

全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀是一種利用化學(xué)發(fā)光原理結(jié)合免疫技術(shù)對(duì)樣本中痕量物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的儀器，它結(jié)合了化學(xué)發(fā)光和免疫兩方面的優(yōu)勢(shì)，從而具有靈敏度高、準(zhǔn)確度高、特異性好、背景干擾小的優(yōu)點(diǎn)，近幾年在臨床檢驗(yàn)和食品安全等領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用[1-2]。儀器的準(zhǔn)確可靠是獲得良好數(shù)據(jù)的前提和基礎(chǔ)，為了保證全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的準(zhǔn)確，國家制定了《YY/T 1155-2009全自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀》行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，但是該標(biāo)準(zhǔn)主要用于儀器的注冊(cè)檢驗(yàn)，用于日常的計(jì)量校準(zhǔn)則較為嚴(yán)格和繁瑣。本研究在該標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上[3- 4]，參考國家頒布的《半自動(dòng)生化分析儀》等醫(yī)療器械檢定規(guī)程中類似指標(biāo)的計(jì)量方法

以及相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上[5-7]，對(duì)雅培i2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的準(zhǔn)確度、重復(fù)性、線性范圍、交叉污染等進(jìn)行了評(píng)價(jià)。此方法可用于日常全自動(dòng)免疫分析儀性能的評(píng)價(jià)和校準(zhǔn)，有助于檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確和可比。

1 儀器與試劑

全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（美國雅培i2000）；試劑為胰島素測(cè)定試劑盒及定標(biāo)液（美國雅培）；質(zhì)控品來自美國雅培公司；采用系列胰島素標(biāo)準(zhǔn)溶液作為樣本（中國計(jì)量科學(xué)研究院）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

首先采用廠家提供的檢測(cè)試劑盒和胰島素定標(biāo)液對(duì)雅培i2000儀器進(jìn)行定標(biāo)，定標(biāo)通過后測(cè)定質(zhì)控，當(dāng)質(zhì)控符合要求后進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)。

2.1 準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)

分別采用雅培i2000對(duì)標(biāo)準(zhǔn)值為197 pmol/L和20 pmol/L的胰島素標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，每個(gè)水平的標(biāo)準(zhǔn)品分別測(cè)定3次取其平均值作為測(cè)定結(jié)果。根據(jù)下面的公式計(jì)算測(cè)量誤差，作為準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)指標(biāo)。

Δx=x-x0

其中，x為三次測(cè)量平均；x0為相應(yīng)濃度水平的標(biāo)準(zhǔn)值。

2.2 重復(fù)性評(píng)價(jià)

采用雅培i2000對(duì)標(biāo)準(zhǔn)值為20 pmol/L的胰島素標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，重復(fù)測(cè)定6次，計(jì)算測(cè)定結(jié)果平均值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差作為重復(fù)性指標(biāo)的評(píng)價(jià)。

2.3 穩(wěn)定性評(píng)價(jià)

采用雅培i2000對(duì)標(biāo)準(zhǔn)值為20 pmol/L的胰島素標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，重復(fù)測(cè)定3次取平均值；4 h和8 h以后重復(fù)此過程，分別計(jì)算相對(duì)起始時(shí)刻的相對(duì)偏差作為穩(wěn)定性的評(píng)價(jià)。

其中，x為4或8 h后測(cè)定結(jié)果的平均；x0為起始時(shí)刻測(cè)定結(jié)果的平均值。

2.4 線性范圍評(píng)價(jià)

采用雅培i2000對(duì)標(biāo)準(zhǔn)值分別為20、59、97、137、177、197 pmol/L的胰島素標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測(cè)定，每個(gè)濃度水平的平行測(cè)定3次取平均值作為測(cè)量結(jié)果，對(duì)濃度水平和測(cè)定結(jié)果進(jìn)行線性擬合并計(jì)算線性相關(guān)系數(shù)r2作為線性范圍的評(píng)價(jià)。

2.5 交叉污染率評(píng)價(jià)

采用雅培i2000對(duì)標(biāo)準(zhǔn)值為20 pmol/L的胰島素標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)測(cè)定4次，然后對(duì)197 mol/L的胰島素標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)測(cè)定4次。按照上述方法依次循環(huán)對(duì)20 pmol/L和197 pmol/L的測(cè)定，測(cè)得4組低濃度值與3組高濃度值，然后按照下面公式將每相鄰兩組數(shù)值進(jìn)行計(jì)算，得到3個(gè)低濃度到高濃度的交叉污染率和3個(gè)從高濃度到低濃度的交叉污染率，以各自的最大值報(bào)告評(píng)價(jià)結(jié)果。

其，為從低濃度到高濃度的交叉污染率；

為從高濃度到低濃度的交叉污染率

L1，L2，L3，L4為每組低濃度的測(cè)量值

H1，H2，H3，H4為每組高濃度的測(cè)量值。

3 結(jié)果

依據(jù)上述實(shí)驗(yàn)方法對(duì)雅培i2000全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀準(zhǔn)確度、重復(fù)性、穩(wěn)定性、線性范圍和交叉污染指標(biāo)進(jìn)行評(píng)定，結(jié)果如下。

準(zhǔn)確度：197 pmol/L胰島素標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定結(jié)果誤差為6 pmol/L，20 pmol/L胰島素標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定結(jié)果誤差為2 pmol/L；

重復(fù)性：對(duì)20 pmol/L的胰島素標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)測(cè)定6次，6次測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2%。

穩(wěn)定性：開機(jī)4 h后和8 h后的相對(duì)偏差分別為3%和4%。

線性范圍：20～197 pmol/L的胰島素范圍內(nèi)，其線性相關(guān)系數(shù)可達(dá)到0.997。

交叉污染：從低到高交叉污染率為1%，從高到低交叉污染率為0.2%。

4 討論

4.1 準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)

測(cè)量?jī)x器的準(zhǔn)確度是指測(cè)量?jī)x器給出接近于真值的響應(yīng)能力。《YY/T 1155-2009全自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀》中沒有對(duì)全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的準(zhǔn)確度進(jìn)行評(píng)價(jià)，可能主要是因?yàn)闇y(cè)量過程中采用相對(duì)測(cè)定方法，通過標(biāo)準(zhǔn)品定標(biāo)實(shí)現(xiàn)未知樣品的測(cè)定，測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度在很大程度上取決于試劑盒定標(biāo)液的準(zhǔn)確與否。但是在實(shí)際使用過程中也希望了解儀器的準(zhǔn)確度，通過對(duì)已知濃度標(biāo)準(zhǔn)品的測(cè)定可以間接反應(yīng)出儀器的準(zhǔn)確度，測(cè)定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)值之間的誤差可以作為準(zhǔn)確度的表征。測(cè)試項(xiàng)目原則上應(yīng)當(dāng)選取結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、有可用于免疫測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或標(biāo)準(zhǔn)品的分析對(duì)象。在本項(xiàng)研究中，我們采用的是中國計(jì)量科學(xué)研究院提供的胰島素標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)高值和低值標(biāo)準(zhǔn)品分別測(cè)定并計(jì)算誤差作為準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)指標(biāo)，其中高值胰島素標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定結(jié)果誤差為6 pmol/L，低值胰島素標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)定結(jié)果誤差為2 pmol/L。

4.2 重復(fù)性評(píng)價(jià)

測(cè)量?jī)x器的重復(fù)性是指測(cè)量?jī)x器在相同的測(cè)量條件下為相同的被測(cè)物的重復(fù)應(yīng)用提供非常近似示值的能力。《YY/T 1155-2009全自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀》的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定重復(fù)性評(píng)價(jià)至少應(yīng)當(dāng)對(duì)同一份樣品重復(fù)測(cè)定20次，這是一個(gè)較為嚴(yán)格的要求，在日常校準(zhǔn)評(píng)價(jià)中重復(fù)測(cè)定20次帶來的時(shí)間、試劑消耗太高。在國家頒布的檢定規(guī)程、校準(zhǔn)規(guī)范等計(jì)量技術(shù)規(guī)范中，重復(fù)性實(shí)驗(yàn)往往不超過10次。實(shí)驗(yàn)中，采用雅培i2000對(duì)20 pmol/L的胰島素標(biāo)準(zhǔn)品重復(fù)測(cè)定6次，6次測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2%，可作為重復(fù)性評(píng)價(jià)的結(jié)果。

4.3 穩(wěn)定性評(píng)價(jià)

測(cè)量?jī)x器的穩(wěn)定性是指測(cè)量?jī)x器保持其計(jì)量特性隨時(shí)間恒定的能力，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)上參照了《YY/T 1155-2009全自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀》中穩(wěn)定性評(píng)價(jià)方法。開機(jī)4 h后和8 h后的相對(duì)偏差分別為3%和4%，都達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)的要求。

4.4 線性范圍評(píng)價(jià)

一般檢測(cè)結(jié)果的正常范圍跨度超不過一個(gè)數(shù)量級(jí)，因此評(píng)價(jià)中我們重點(diǎn)對(duì)一個(gè)數(shù)量級(jí)跨度的線性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，從而保證正常和異常狀態(tài)能夠準(zhǔn)確區(qū)分。臨床上正常人空腹基礎(chǔ)血漿胰島素水平為35～145 pmol/L，因此實(shí)驗(yàn)中我們對(duì)20、59、97、137、177、197 pmol/L的胰島素標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行測(cè)定，其線性相關(guān)系數(shù)可達(dá)到0.997，證明儀器在一個(gè)數(shù)量級(jí)信號(hào)跨度范圍內(nèi)線性良好。

4.5 交叉污染評(píng)價(jià)

交叉污染率，即攜帶污染率主要反映了加樣系統(tǒng)在吸取高低值不同的樣品時(shí)由于吸附等引起的樣品沾污導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏離真值的情況。為了真實(shí)的反映出交叉污染率，必須使用同一根加樣針吸取樣品，所以在配置有多組加樣針的系統(tǒng)中應(yīng)當(dāng)禁止使用其他加樣針，一只一只分別做測(cè)試。在交

叉污染率評(píng)價(jià)方法選擇上，參考比較了《YY/T 1155-2009全自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀》醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和《JJG 464-2011 半自動(dòng)生化分析儀》檢定規(guī)程中交叉污染率的評(píng)定方法。《JJG 464-2011 半自動(dòng)生化分析儀》的評(píng)價(jià)方法與《YY/T 1155-2009全自動(dòng)發(fā)光免疫分析儀》中的評(píng)價(jià)方法相比簡(jiǎn)單易行，能夠滿足日常情況下儀器評(píng)價(jià)校準(zhǔn)的用途，所以實(shí)驗(yàn)過程中對(duì)雅培i2000交叉污染率的評(píng)價(jià)按照《JJG 464-2011 半自動(dòng)生化分析儀》中的評(píng)價(jià)方法進(jìn)行。經(jīng)實(shí)驗(yàn)，雅培i2000從低到高交叉污染率為1%，從高到低交叉污染率為0.2%。

本文闡述了全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀準(zhǔn)確度、重復(fù)性、線性范圍、交叉污染等指標(biāo)的評(píng)價(jià)方法和選取理由，提出的方法可用于日常全自動(dòng)免疫分析儀性能的評(píng)價(jià)和校準(zhǔn)，有助于檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確和可比。

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（收稿日期：2013-03-19）