天津七里海野生葦蘑科屬研究

楊紅澎　黃亮　班立桐　王玉　董在成

摘 要：對采集于天津市寧河縣七里海地區蘆葦地的野生蘑菇葦蘑進行了形態學和rDNA ITS區段克隆測序及序列特征比較分析鑒定。 結果表明，采集的這種野生蘑菇為蠟傘科（Hygrophoropsidaceae）、擬蠟傘屬（Hygrophoropsis）蘑菇。

關鍵詞：葦蘑；蠟傘科；擬蠟傘屬

中圖分類號：S646.9 文獻標識碼：A DOI編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2013.05.014

天津市寧河縣七里海地區蘆葦地產葦蘑。每當盛夏溽暑綿雨過后，蘆林葦海中多年敗葉腐草厚積，形成難得的底質、濕度、溫度和光照，葦蘑便蒸郁而生。人們采集后，或鮮食，或曬干食用，味道極其鮮美，遠勝于其他蘑菇。在文獻調研中，筆者發現國內外關于葦蘑的報道廖廖無幾，而且天津七里海葦蘑與一些報道注明的種屬形態不是很一致[1-2]。鑒于此，從其形態特征和DNA測序的角度對其進行了鑒定。確定其為蠟傘科（Hygrophoropsidaceae）、擬蠟傘屬（Hygrophoropsis）蘑菇。

1 材料和方法

1.1 材 料

2012年7月22日采集子實體于天津市寧河縣七里海淮淀蘆葦地。選取形態完整、新鮮、菌肉肥厚、七八成熟、未被昆蟲啃食的子實體，用鏟連同基物一齊采下，詳細記錄子實體形態特征。掛上號牌，用吸水軟紙折成漏斗狀，菌柄向下包好，放入標本盒內，送往中國科學院微生物研究所進行科屬鑒定。實物標本保存在天津農學院菌物標本室和中國科學院微生物研究所菌物標本館。

1.2 方 法

1.2.1 形態特征描述 按常規方法觀察子實體的形態結構， 并測量菌蓋直徑以及菌柄長度、直徑等；菌褶徒手切片，在顯微鏡下觀察孢子的形態、色澤和大小。

1.2.2 基因組DNA提取 取測試菌株，外部清潔后，掰開子實體，取里面未受污染的部分，液氮研磨處理后分裝，-80 ℃超低溫冰箱保存備用[3-4]。取0.2 g左右研磨好的樣品，按參考文獻[3， 5-6]采用KI法對基因組DNA進行提取。然后將提取的DNA保存于-20 ℃備用。

1.2.3 rDNA ITS序列的擴增、克隆、測序及序列比較 采用通用引物LR0R和LR5擴增核糖體大亞基（nrDNA-LSU）D1～D2區段，測序、BLAST比較[7-9]。

LR0R： 5- ACCCGCTGAACTTAAGC -3

LR5： 5- TCCTGAGGGAAACTTCG -3

序列測定由北京諾賽基因組研究中心有限公司完成。

2 結果與分析

2.1 形態特征

子實體中等大，菌蓋直徑3.0～9.5 cm，幼時稍扁平，成熟后呈下凹狀，表面檸檬黃色，中部色稍深，邊緣內卷，光滑。菌肉黃色。菌褶黃色，稍稀，延生（圖1）。菌柄長2.5～6.0 cm，粗0.5～1.4 cm，圓柱形，向下稍粗，污黃色，內實。孢子無色，光滑，橢圓形，2.6～4.3 μm×5.1～7.7 μm。夏季群生或單生于蘆葦叢中地上。

2.2 rDNA ITS序列測序結果

包括核糖體大亞基D1～D2區的大部分序列。從核糖體大亞基D1～D2區序列比較分析，其序列與屬于黃擬蠟傘（Hygrophoropsis aurantiaca） 的28SrDNA（NCBI號碼AY586659.1）序列相似率為93%。

3 結論與討論

最早關于葦蘑的報道是新疆王秀云等[1]描述發現的葦蘑孢子為印褐色。2005年呂紹生[2]報道葦蘑這一蘑菇名稱，拉丁文為Agaricus Campestris。Agaricus Campestris為傘菌屬蘑菇[10-11]，孢子褐色， 光滑， 橢圓形[11]。筆者采集的葦蘑經顯微鑒別，發現孢子為無色，光滑，橢圓形。擬蠟傘屬黃擬蠟傘蘑菇子實體小型至中型。菌蓋初期邊緣內卷， 中央部位凹陷， 后期稍平展。表面平滑，橙黃色， 干后橙紅色，邊緣往往淺色。菌肉薄， 白色或黃白色， 有香味。菌褶橘黃色， 延生， 密， 窄， 有橫脈。菌柄淡褐色，基部有短絨毛，孢子無色，光滑，橢圓形，孢子印奶油色，未見囊狀體。菌絲具有鎖狀聯合[12-13]。結合標本形態特征發現其也具有上述類似特征。

從核糖體大亞基D1～D2區序列比較分析，并結合標本形態特征，鑒定其為擬蠟傘科（Hygrophoropsidaceae）、擬蠟傘屬（Hygrophoropsis）蘑菇。

致謝：葦蘑鑒定由中國科學院微生物研究所文華安研究員協助完成，特此表示感謝。

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