鮮姜汁對大腸桿菌及巨大芽孢桿菌的抑制作用研究

摘要：將新鮮生姜研磨過濾獲得100%鮮姜汁，稀釋成75%、50%、25% 3個梯度濃度，以無菌水作為對照，以大腸桿菌（Escherichia coli）、巨大芽孢桿菌（Bacillus magaterium）為試驗菌，采用濾紙貼片法測定抑菌作用，比較不同濃度姜汁的抑菌活性。結果表明，隨著姜汁濃度的增大，抑菌作用增強。

關鍵詞：姜汁；抑制作用；大腸桿菌；巨大芽孢桿菌

中圖分類號：R285，TS264 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）06-1315-02

生姜是姜屬植物姜（Zinggiber ofcinale Rosc）的根莖。姜是熱帶、亞熱帶地區(qū)的一種重要栽培植物，在中國的中部、東南部、西南部廣為栽培。生姜作為藥食兩用的植物在中國具有悠久的種植和食用的歷史。在中醫(yī)藥用性能上，生姜味辛、性溫，有開胃止嘔、化痰止咳、發(fā)熱解汗等作用，適用于外感風寒、咳嗽、胃寒嘔吐或吐清水，也可用于增進血行、驅散寒氣、益胃氣、助發(fā)汗。生姜中含有揮發(fā)性油，主要成分有姜醇、姜烯、甲基庚烯酮、姜辣素等[1]。醫(yī)學研究表明生姜對細菌有抑制作用，對陰道滴蟲有殺滅作用；有明顯的抗?jié)儭⒖咕⒅委熜呐K血管疾病等藥用保健功能[2，3]。其所含成分被證明有降血脂等功能[8，9]。生姜是一種天然的抗氧化劑，具有較好的保鮮作用，對食品工業(yè)和人體健康具有重要意義[4]。生姜在食品工業(yè)中作為抗氧化劑及防腐劑添加[5-7]。

現(xiàn)代科學研究證實，生姜有消炎抗菌的作用。生姜的水浸劑對傷寒桿菌、鏈球菌、沙門氏菌、肺炎球菌有明顯的抑制作用，可用于治療痢疾和腹瀉。鮮姜汁對大腸桿菌、啤酒酵母、青霉菌有較明顯的抑菌作用。付愛華等[10]報道，生姜提取物用液態(tài)沙堡瓊脂培養(yǎng)基稀釋為0.062 5%～0.250 0%對培養(yǎng)基中的皮膚癬菌、紅色毛癬菌、犬小孢子菌、須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌有極為顯著的抑菌、殺菌作用。陳碰玉等[11]研究發(fā)現(xiàn)，新鮮生姜對幽門螺桿菌具有較好的抑菌作用。

試驗以人體腸道常見微生物大腸桿菌（Escherichia coli）和巨大芽孢桿菌（Bacillus magaterium）為材料，利用濾紙片法測定抑菌圈，明確姜汁的抑菌作用，為生姜的開發(fā)利用奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 生物材料 生姜：鮮品，購買于超市；供試菌種：大腸桿菌、巨大芽孢桿菌菌種均為商丘師范學院生命科學學院微生物學實驗室提供。

1.1.2 儀器 電磁爐、電子天平、高壓蒸汽滅菌鍋、電熱恒溫培養(yǎng)箱、超凈工作臺等。

1.2 試驗方法

1.2.1 姜汁的制備 將姜洗凈，晾干，放在紫外燈下照射20 min消毒[12]后放入無菌的研缽，在無菌操作臺上加入少許石英砂研磨，用4層紗布過濾得到鮮姜汁，定這時濃度為100%，用無菌水稀釋（V/V）到75%、50%、25%，即得到4個濃度的姜汁。

1.2.2 培養(yǎng)基的制備 稱取牛肉膏5 g、蛋白胨10 g、氯化鈉5 g、瓊脂20 g，量取1 000 mL蒸餾水，混合加熱至完全溶解，調節(jié)pH至7.0～7.4后分裝于250 mL三角瓶中，同時制試管斜面，滅菌[13]。

1.2.3 菌種的活化 將大腸桿菌和巨大芽孢桿菌按照無菌操作規(guī)程分別接入試管斜面， 37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。

1.2.4 菌懸液的制備 用接種環(huán)挑取一定量的活化后的大腸桿菌和巨大芽孢桿菌菌苔，放入裝有10 mL無菌水的試管中，振蕩5 min，使菌體充分散開，制成2種菌的菌懸液。

1.2.5 抑菌試驗 采用濾紙片法[14]，取直徑6 mm的滅菌濾紙片放入各濃度的姜汁中浸泡30 min，對照濾紙片用無菌水浸泡。將待試菌懸液各1 mL加于平板培養(yǎng)基后用無菌涂布棒涂布均勻制成含菌平板，平板靜置30 min后用無菌鑷子把濾紙片貼在含菌平板上，每個平板放4片同種濾紙片，每個濃度4個重復，每組1個對照。平板于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中倒置培養(yǎng)48 h，取出測定并記錄抑菌圈直徑，比較不同濃度姜汁的抑菌效果。

2 結果與分析

抑菌圈測量結果見表1、表2。由表1、表2可見，姜汁濃度越大，抑菌效果越強，抑菌圈直徑越大。空白對照均未出現(xiàn)抑菌圈，說明濾紙片對兩種受試菌均無抑菌活性。

3 小結與討論

實驗以大腸桿菌和巨大芽孢桿菌作為受試菌種，研究鮮姜汁的抑菌活性，證明姜汁對2種細菌具有明顯的抑菌作用，與鄭俏然等[15]用乙醇提取法進行的試驗結果相比較，抑菌圈直徑明顯較小，可能是由于多種因素影響導致結果的不同。生姜中揮發(fā)油的化學提取工藝有索氏法、超臨界CO2流體萃取法、水蒸氣蒸餾法、共水回流冷凝法等[16]。本試驗采用的是鮮姜直接研磨提取，并且未進行濃縮處理，結果的差異可能是由于提取工藝的差別造成的。鮮姜汁對巨大芽孢桿菌的抑菌研究尚未有相關的報道，本試驗證明鮮姜汁對巨大芽孢桿菌有抑菌作用。

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