過硫酸氫鉀復合物粉對口蹄疫病毒殺滅效果試驗

喬莉萍 黃銀君 薛飛群 張強 周衛(wèi) 馬全鴻 牟克斌 劉學榮

摘要：以過硫酸氫鉀復合物粉對口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus， FMDV）的殺滅效果進行了研究。將過硫酸氫鉀復合物粉以不同比例稀釋后對小白鼠、成年鼠、白兔分別進行皮下注射、灌服、斑貼試驗進行消毒劑安全性試驗，對病毒懸液進行了消毒劑滅活病毒效果試驗。結(jié)果表明，過硫酸氫鉀復合物粉1∶100倍及以上稀釋對小白鼠、成年鼠及白兔安全；消毒劑100%殺滅口蹄疫病毒的最高稀釋度為1∶1 200。過硫酸氫鉀復合物粉對口蹄疫病毒有良好的殺滅效果。

關鍵詞：口蹄疫病毒；過硫酸氫鉀復合物粉；殺滅效果

中圖分類號：S855.3 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）08-1877-03

口蹄疫（Foot and mouth disease，F(xiàn)MD）是由口蹄疫病毒（Foot and mouth disease virus，F(xiàn)MDV）所引起的偶蹄動物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病[1]。注射疫苗是控制口蹄疫的有效手段，但對畜舍的定期消毒及口蹄疫疫情發(fā)生后的消毒仍是重要的工作。強堿是一種對口蹄疫病毒有良好殺滅作用的消毒劑，但這種消毒劑對人和動物有較大的毒害作用，現(xiàn)在已經(jīng)較少使用。隨著消毒劑研制方法的改進，過硫酸氫鉀復合物粉逐漸受到人們的關注[2]。為觀察驗證其對口蹄疫病毒殺滅效果，本試驗對過硫酸氫鉀復合物粉的消毒作用進行了探討，以期為有效控制口蹄疫提供理論支撐。

1 材料與方法

1.1 材料

過硫酸氫鉀復合物粉（有效氯含量不低于10.0%，由甘肅臨洮威特藥業(yè)有限公司提供，文中簡稱消毒劑）。試驗用病毒為O型口蹄疫乳鼠組織毒（LD50=10-8.0），由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所提供。試驗用動物為4日齡小白鼠、成年鼠、2月齡新西蘭白兔，由中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所實驗動物場提供。

1.2 口蹄疫病毒懸液的制備

口蹄疫病毒懸液的制備按照參考文獻[1、2]進行。將O型口蹄疫小白鼠組織毒（LD50=10-8.0）用0.04 mol/L的磷酸鹽緩沖液（pH 7.6）稀釋成1∶10倍病毒懸液，備用。

1.3 消毒劑安全性試驗

用滅菌水將消毒劑按質(zhì)量體積比（m∶V，g/mL）稀釋成（1∶50、1∶100、1∶200、1∶400、1∶800、1∶1 000）后分別背部皮下注射4日齡小白鼠，每個濃度試驗組注射5只，每只注射0.2 mL；設陰性對照組，每只小白鼠注射0.2 mL滅菌水。注射后連續(xù)觀察7 d。2次重復。

用滅菌水將消毒劑按質(zhì)量體積比（m∶V，g/mL）稀釋成（1∶100、1∶200、1∶400、1∶800、1∶1 000）后分別灌服成年鼠，每個濃度試驗組灌服5只，每只灌服0.2 mL；陰性對照組，每只成年鼠灌服0.2 mL滅菌水。灌服后觀察7 d，2次重復。

用滅菌水將消毒劑按質(zhì)量體積比（m∶V，g/mL）稀釋成（1∶100、1∶200、1∶400），將5只白兔背部毛剪去，每個濃度試驗組的消毒劑溶液1 mL均勻滴在白兔去毛皮膚表面；設陰性對照組，對照組白兔在去毛皮膚處滴1 mL滅菌水。觀察7 d，2次重復。

1.4 消毒劑對口蹄疫病毒殺滅效果試驗

根據(jù)安全性試驗的結(jié)果，在安全濃度范圍內(nèi)將消毒劑做濃度梯度稀釋（1∶800、1∶1 000、1∶1 200、1∶1 400、1∶1 600）后，與口蹄疫病毒懸液混勻，使病毒的終濃度達到1∶1 000，室溫作用30 min后，皮下注射3日齡小白鼠。試驗組每只小白鼠背部皮下注射0.2 mL；陽性對照組，每組注射0.2 mL的1∶1 000的病毒懸液；陰性對照組，每組注射0.2 mL的滅菌水。每組5只小白鼠，注射后觀察7 d，重復2次。

1.5 結(jié)果判斷

1.5.1 消毒劑的安全性判定 試驗組小白鼠全部健活或無不良反應，判為安全，反之為不安全。

1.5.2 消毒劑對口蹄疫病毒殺滅效果的評價 陰性對照組小白鼠在觀察期間無異常表現(xiàn)，全部健活，同時陽性對照組小白鼠在接種病毒后全部發(fā)病死亡，并從小白鼠體內(nèi)檢測到口蹄疫病毒，試驗成立。在試驗成立的情況下，試驗組小白鼠在觀察期間無異常表現(xiàn)，全部健活，判定該濃度下消毒劑有效；若試驗組有小白鼠死亡，并從小白鼠體內(nèi)檢測到口蹄疫病毒，判定該濃度下消毒劑無效。

2 結(jié)果與分析

2.1 消毒劑的安全性試驗結(jié)果

試驗表明（表1、表2、表3），過硫酸氫鉀復合物粉1∶100倍及以上稀釋對小白鼠、成年鼠及白兔安全，并且注射部位的皮膚無炎癥。

2.2 對口蹄疫病毒殺滅效果

由表4可知，消毒劑100%殺滅口蹄疫病毒的最高稀釋度為1∶1 200。

3 討論

口蹄疫病毒屬于小RNA病毒科口蹄疫病毒屬，其結(jié)構(gòu)簡單，由單股的核糖核酸和蛋白質(zhì)組成[3]。口蹄疫具有高度接觸性和快速遠距離傳播的特點，因此加強環(huán)境消毒是防治口蹄疫的重要工作。

在傳統(tǒng)的口蹄疫病毒消毒過程中使用強堿類消毒產(chǎn)品，這類消毒劑能快速殺滅口蹄疫病毒，但對人和動物的毒害作用較大。目前的口蹄疫防控多用新型、復合型消毒劑。過硫酸氫鉀復合物粉是一種基于酸性氧化體系的新型過氧化物消毒劑，以過硫酸氫鉀復合鹽為主要成分，輔以氯化鈉、表面活性劑等[4]。近年來，過硫酸氫鉀復合物粉作為一種廣譜、高效、低毒的獸用復方消毒劑被廣泛關注。過硫酸氫鉀復合物粉是美國環(huán)保局（EPA）批準注冊的第一個惟一用于預防口蹄疫的獸用消毒劑。美國農(nóng)業(yè)部（USDA）已將其作為機場出入境消毒的常用消毒劑之一，來控制外來病原的入侵[5-7]。該消毒劑具有很強的氧化系統(tǒng)，溶解后產(chǎn)生各種高能量、高活性的小分子自由基、活性氧等衍生物，通過鏈式反應系統(tǒng)破壞微生物細胞膜的通透性，干擾病原體的DNA和RNA合成，從而殺滅病原微生物[8]。過硫酸氫鉀復合物粉還具有強酸性（pH 2.2～2.6），可以殺滅各種病原微生物，并不受有機物影響，其代謝產(chǎn)物不會對人、動物和環(huán)境帶來影響。過硫酸氫鉀復合物粉用于水體消毒時幾乎不產(chǎn)生三氯甲烷等有毒產(chǎn)物；與含氯消毒劑相比，當pH≥6.5時殺菌效率高于氯系列消毒劑；與過氧化氫、過氧乙酸等消毒劑相比，性狀穩(wěn)定，易于保管儲藏而且運輸方便；可現(xiàn)場配制，溶解迅速，其對水質(zhì)無嚴格要求。

試驗研究表明，過硫酸氫鉀復合物粉對口蹄疫病毒具有明顯的殺滅作用，是一種安全、有效的非氯氧化型消毒劑，值得在口蹄疫防治中應用推廣。

參考文獻：

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