進入高原低氧6個月后精子濃度與血清抑制素B水平變化及其關系研究

萬 霖，王養民，藍 天，張 斌，宋靈敏，張玉英

持續暴露在高原低氧環境下可對精液質量產生一定的負面影響[1-2]，且這種負面影響隨著海拔高度的增加而加重[3]。目前，國內外研究結果多認為導致精子濃度降低可能與精子生成減少、精子DNA損傷升高及性激素水平變化等密切相關[4-8]，精子生成減少與性激素水平改變及睪丸組織損傷有關[4，7-8]。血清抑制素B(inhibin B，INHB)由睪丸支持細胞分泌，直接反映Sertoli細胞的功能，是精子發生的血清學標志物，反映睪丸生精功能，為進一步睪丸活檢提供相關依據[9]，是臨床評價生育能力的重要指標。雖然血清INHB在評價男性生育功能及睪丸生精功能方面起著非常重要的作用，但目前尚未有相關文獻報道進入高原低氧環境后人血清INHB水平的變化及意義。因此，本研究擬通過檢測生活在海拔1 500 m的健康男性與進入高原低氧環境6個月后的健康男性的精子濃度與血清INHB水平，了解進入高原低氧環境后睪丸功能的變化。

1　資料與方法

1.1一般資料選取2010年11月—2012年5月42例進入高原低氧環境(海拔3 200 m)生活6個月后健康男性作為試驗組，30例生活在海拔1 500 m的健康男性作為對照組。對照組精液質量均符合世界衛生組織(WHO)男性精液質量正常標準。兩組受試者年齡為20～38歲。排除泌尿生殖系統炎癥、精索靜脈曲張、前列腺炎及隱睪癥等影響男性精液質量的疾病。

1.2方法

1.2.1主要試劑和儀器人血清INHB ELISA試劑盒(蘭州科美特生物有限公司)；WLJY-9000精子分析儀；低速離心機；37 ℃恒溫水浴箱；酶標儀。

1.2.2標本的采集及處理采集兩組受試者血液及精液標本。于早晨9：00～9：30抽取空腹外周靜脈血約3 ml，注入血清分離管，室溫自然凝固10～20 min，離心半徑13.5 cm，3 000 r/min離心20 min后收集血清，4 ℃保存待檢。精液收集采取手淫方式(禁欲5～7 d后，每日15時采集)，其中試驗組在進入高原低氧環境6個月后采集。精液采集后，37 ℃溫育30 min，待完全液化后檢測精子濃度。

1.2.3檢測方法按WHO男性精液質量標準檢測兩組受檢者的排精量及精子濃度。采用雙抗體夾心法測定標本中人血清INHB水平，試驗過程嚴格按照說明書進行。加樣完畢后，用酶標儀在450 nm波長測吸光度值。根據標準孔吸光度計算出兩組受檢者的血清INHB水平。

2　結果

2.1兩組精子指標及血清INHB水平檢測結果試驗組精子濃度符合WHO男性精液質量正常標準者19例，精子濃度降低者23例。兩組受檢者排精量比較，差異無統計學意義(P>0.05)；而精子濃度及血清INHB水平比較，差異均有統計學意義(P<0.05，見表1)。

Table1Comparison of sperm indicators and serum INHB between two groups

組別例數排精量(ml)精子濃度(×109/L)血清INHB水平(ng/L)對照組303.22±0.1174±11197±21試驗組423.01±0.0837±7156±15t值4.352.345.51P值>0.05<0.05<0.05

注：INHB=抑制素B

2.2兩組血清INHB水平與精子濃度的關系兩組受檢者血清INHB水平與精子濃度均呈正相關(對照組：r=0.82，P<0.05；實驗組：r=0.87，P<0.05)。

3　討論

男性生殖系統內分泌腺包括下丘腦、垂體和睪丸，3者組成下丘腦-垂體-性腺軸，共同調節生殖器官的生長發育和維持正常生殖功能[4]。下丘腦分泌促性腺激素釋放激素(GnRH)，調控垂體促性腺激素黃體生成素(LH)和促卵泡激素(FSH)的分泌；LH作用于睪丸的間質細胞，促進間質細胞增生，分泌雄激素；FSH作用于睪丸的支持細胞，促進精子的形成。對男性及動物血清性激素水平的檢測結果多表明長期暴露在高原低氧環境下，血清睪酮水平呈下降趨勢[4]，移居高原低氧環境生活20 d后，垂體促皮質激素與促性腺激素增多，而靶腺激素卻未相應升高[10]。而睪丸組織損傷目前多采用動物實驗的方法，均提示睪丸生精上皮及間質形態結構發生改變。但目前關于人睪丸組織損傷情況相關文獻報道較少。血清INHB由睪丸支持細胞分泌，是下丘腦-垂體-性腺軸的重要組成成員[11]。FSH刺激睪丸產生血清INHB，而血清INHB則通過負反饋抑制垂體分泌FSH。血清INHB與血清FSH呈負相關，與精子濃度、睪丸體積及生精上皮呈正相關[12]。

本研究通過對30例海拔1 500 m健康男性及42例進入高原低氧環境6個月后健康男性的精子濃度及血清INHB水平檢測，結果顯示進入高原低氧環境下6個月后健康男性精子濃度及血清INHB水平較海拔1 500 m健康男性降低，提示進入高原低氧環境導致男性精子濃度降低，可能與高原低氧環境下睪丸生精功能受損，特別是睪丸支持細胞的損傷，引起睪丸生精功能降低，從而導致精子濃度降低。但是目前進入高原低氧環境后對睪丸支持細胞和生殖細胞影響的先后次序及具體機制報道較少。目前，臨床中精液質量常規檢測結果、體格檢查及彩色多普勒超生檢查并不能準確評估睪丸的生精功能以及預測患者生精功能的改善情況。血清INHB作為睪丸支持細胞的產物，可以作為精子發生的精確指標，是精子發生的血清學標志物，可以用于臨床男性不育的評估，在男性生殖功能的調節中起著非常重要的作用。對男性血清INHB水平的檢測有助于了解進入高原低氧環境后男性精液濃度的變化及睪丸生精功能的損傷程度，為下一步改善高原低氧環境對男性生育能力的影響提供可靠依據。

進入高原低氧環境后引起男性精液質量下降及睪丸細胞損傷，導致精子發生降低的確切機制至今尚無統一定論。國內外動物實驗結果多認為曲細精管和間質細胞受損的程度越嚴重，對精液質量及生育能力的影響就會越大[13]。本研究觀察到進入高原低氧環境6個月后，血清INHB水平與精子濃度呈正相關，精子濃度降低，血清INHB水平亦降低，說明睪丸生精功能受損。但目前尚不能明確進入高原低氧環境后對睪丸功能的損傷是否為不可逆性，若為可逆性損傷，睪丸功能需多長時間可基本恢復原先水平，有待進一步研究。但作為直接反映支持細胞功能的血清標志物，血清INHB水平可以作為進入高原低氧環境后男性生精功能的狀態及離開高原低氧環境后男性生精功能的恢復程度提供有價值的實驗室依據。

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