超高效液相色譜—串聯質譜法測定玉米中硝磺草酮及其代謝物殘留量

摘要：建立了超高效液相色譜串聯質譜法測定玉米中硝磺草酮及其代謝物（MNBA）的殘留分析方法。樣品用乙腈水溶液提取，取適量提取液用甲酸酸化至p 2，過LB固相萃取柱進行凈化，用甲醇乙醚（7∶，VV）洗脫，洗脫液用氮氣吹至近干，用 mmolL醋酸銨乙腈（2∶7，VV）定容后進行質譜分析，利用基質校正曲線對其準確定量。硝磺草酮和MNBA在～2 μgL濃度范圍內呈線性關系，相關系數均大于99，在添加濃度～ μgkg范圍內，硝磺草酮及其代謝物MNBA的平均回收率為88%～%，相對標準偏差在%～28%之間，硝磺草酮和代謝物MNBA定量限分別為 和2 μgkg。

關鍵詞：硝磺草酮； 液相色譜串聯質譜； 玉米； 代謝物

引言

硝磺草酮（Mesotrione）是由瑞士先正達公司（yngenta）開發的新型三酮類除草劑，通過抑制對羥苯基丙酮酸雙加氧酶（PP）的活性而最終降低類胡蘿卜素的合成，使植物“白化而死亡，主要用來防治玉米田闊葉雜草和部分禾本科雜草。22年8月，硝磺草酮在我國的行政保護期到期，它將在我國大規模生產和推廣應用，同時，也會對農產品安全、后茬作物及其它非靶標生物帶來潛在的危害。我國規定硝磺草酮在玉米中的最大允許限量（MRL）值為 mgkg，歐盟規定硝磺草酮及其代謝物（Methylsulfonyl2nitrobenzoic acid，MNBA）在玉米中MRL值為 mgkg。

硝磺草酮為難揮發性化合物，對熱不穩定，無法進行氣相色譜分析。目前，檢測硝磺草酮的主要方法是高效液相色譜法和液相色譜質譜聯用法。22年，Alfemes等報道了硝磺草酮及其2個代謝物（MNBA和AMBA（2aminomethylsulfonylbenzoic acid））在玉米、土壤和水中的高效液相色譜熒光分析方法，樣品需通過液相色譜餾分收集器凈化，收集的凈化液再經衍生生成AMBA，再通過熒光檢測器測定，該方法前處理繁瑣，衍生不穩定，耗時長，不利于大批量樣品的測試工作。盡管文獻采用液相色譜質譜聯用法測定了食品中硝磺草酮的殘留量，但均未涉及到硝磺草酮代謝物MNBA檢測方法。本研究采用LB固相萃取柱實現了兩種化合物的同時凈化，并優化了色譜質譜條件和定容液比例，建立了能夠同時測定玉米中硝磺草酮及其代謝物MNBA的超高效液相色譜電噴霧串聯質譜（UPLEIMM）的分析方法。本方法對硝磺草酮和MNBA定量限分別為和2 μgkg，能夠滿足國際殘留限量測定的需要。

2實驗部分

2儀器與試劑

AUI Ultra Performance L超高效液相色譜系統（美國Waters 公司）；Micromass uattro Ultima P 三重四級桿串聯質譜儀，配帶電噴霧離子源（EI）及Masslynx 工作站 Version ；2 Basic高速分散勻漿機（德國IA公司）； Laborata 型旋轉蒸發儀（德國eidolph公司）； N NEVAPM2型氮吹儀（美國Organomation 公司）；Oasis LB artridge固相萃取小柱（PE， mg6 mL，美國Waters公司）。

硝磺草酮及代謝物MNBA標準品（德國rEhrenstorfer公司）；Nal、乙醚、氨水（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）；甲酸（色譜純，阿沙埃莎（天津）化學有限公司）；甲醇、乙腈（色譜純，美國飛世爾科技公司）。

22色譜質譜條件

色譜條件：AUI UPL BE Amide色譜柱（ mm×2 mm×7 μm）；柱溫 ℃；樣品室溫度 ℃；進樣體積 μL；流動相A為%氨水乙腈，流動相B為 mmolL 醋酸銨含 %氨水）；流速 mLmin；梯度洗脫程序：～ min，% A；～2 min，%～6% A；2～ min， 6%～% A。

質譜條件：EI源，負離子模式；多反應監測掃描（MRM）；毛細管電壓 kV；錐孔電壓 V；離子源溫度 ℃；脫溶劑氣溫度 ℃；錐孔反吹氮氣流量 Lh；脫溶劑氣流量 6 Lh；光電倍增器電壓 6 V；碰撞室真空度76 Pa。其它條件參數見表。