聯(lián)萘酚在涂敷型淀粉衍生物手性固定相上拆分中的吸熱保留及對映體洗脫順序反轉

摘要：在正相條件下，探討了手性化合物聯(lián)萘酚、聯(lián)萘酚二醋酸酯、聯(lián)萘酚二磺酸酯、二溴代聯(lián)萘酚、氫化安息香以及萘普生在涂敷型淀粉衍生物手性固定相LuxAmylose2上的拆分，考察了流動相中極性醇添加劑的種類及含量、柱溫等對手性拆分及對映體洗脫順序的影響。氫化安息香獲得理想的拆分，分離度可達1776；聯(lián)萘酚二醋酸酯、聯(lián)萘酚二磺酸酯和二溴代聯(lián)萘酚得到基線或部分分離，分離度分別為、26和17；萘普生未得到拆分。聯(lián)萘酚拆分中觀察到溶劑誘導及溫度誘導對映異構體洗脫順序反轉的現(xiàn)象，R聯(lián)萘酚表現(xiàn)出少見的吸熱保留特征。結合這些現(xiàn)象對手性識別機理進行了探討。

關鍵詞：液相色譜；淀粉；手性固定相；聯(lián)萘酚；洗脫順序；對映體分離

1引言

近年來，液相色譜手性拆分取得了較快的進展，然而人們還未能完全認知相關的手性識別機理。“試錯法常被用于手性拆分色譜條件的優(yōu)化，對映體拆分效果及洗脫順序的預測仍很困難。在液相色譜手性拆分中，對給定的拆分體系（手性主體和拆分底物固定），人們觀察到類對映異構體洗脫順序反轉的情況：第一類是柱溫導致的洗脫順序反轉，基于Van′toff方程，Koppenh和ayer等預測了這種反轉，由于液相色譜可操作的柱溫范圍較窄，觀察到的佐證例子較少；第二類是流動相組成導致的洗脫順序反轉，流動相中修飾劑的種類及含量都可能導致對映異構體洗脫順序反轉，該類反轉的報道多應用多糖類手性固定相；第三類是進樣量導致的對映異構體洗脫順序反轉，目前僅觀察到一例。對映異構體洗脫順序反轉的現(xiàn)象觸及手性識別機理的核心，也是預測手性拆分過程洗脫順序的關鍵。因此，研究洗脫順序反轉的本質(zhì)原因具有重要意義[14]。

本研究對比了幾種手性化合物在涂敷型淀粉衍生物手性固定相上的拆分，考察了色譜條件對手性拆分效果及對映體洗脫順序的影響，觀察到聯(lián)萘酚在該手性固定相上洗脫順序反轉的現(xiàn)象，首次觀察到因對映體吸熱保留導致的洗脫順序反轉，進一步深入探討了手性識別機理。2實驗部分

21儀器與試劑

Agilent12高效液相色譜儀（美國Agilent公司），含高壓二元泵、二極管陣列檢測器、化學工作站；LuxAmylose2手性色譜柱（美國Phenomenex公司，2cm×6mmμm），涂敷淀粉三（氯2甲基苯基氨基甲酸酯）；正己烷、甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇（色譜純，edia公司）；正戊醇（色譜純，阿拉丁試劑公司）；冰醋酸（分析純）；R和聯(lián)萘酚（1），購自北京春甫應用技術研究中心；聯(lián)萘酚二醋酸酯（2）、聯(lián)萘酚二磺酸酯、二溴代聯(lián)萘酚、RR和氫化安息香、和消旋萘普生（6），購自Acros公司；R聯(lián)萘酚二醋酸酯為實驗室自合成。化合物1～6結構如圖1所示。

22實驗方法

色譜拆分在正相條件下進行，流動相含正己烷和極性添加劑，使用前超聲脫氣。流速設為1mLmin，檢測波長設為2、21和28nm，進樣體積為1μL。除溫度實驗外，柱溫設為℃。由基線的初始波動記錄死時間。當采用新的色譜條件時，色譜柱至少平衡1h后進樣。樣品均溶解在甲醇中，濃度為gL。以不同比例的異構體混合物進樣確定出峰順序，其中聯(lián)萘酚、聯(lián)萘酚二醋酸酯溶液中R構型和構型，以及氫化安息香溶液中RR構型和構型的比例均為2∶1。

圖1底物（1～6）結構圖ig1tructuresofprobesolutes（1-6）

1聯(lián)萘酚inaphthol）；2聯(lián)萘酚二醋酸酯（inaphtholdiacetate）；聯(lián)萘酚二磺酸酯（inaphtholdisulfonate）；二溴代聯(lián)萘酚（ibromobinaphthol）；氫化安息香（ydrobenzoin）；6萘普生（Naproxen）。

結果與討論

1流動相中極性添加劑對手性拆分的影響

LuxAmylose2手性色譜柱含淀粉三（氯2甲基苯基氨基甲酸酯）。當采用正己烷異丙醇為流動相時，聯(lián)萘酚（1）峰拖尾嚴重，僅有微弱拆分。乙醇作為極性添加劑時，峰形略微改善。采用正己烷異丙醇醋酸為流動相時，聯(lián)萘酚峰形明顯改善，拆分良好，異丙醇含量對手性拆分的影響不顯著。

對聯(lián)萘酚二醋酸酯（2），乙醇作為極性添加劑時峰形良好，可獲得基線分離，添加醋酸峰形無明顯改善。醇的種類（乙醇、異丙醇、正丙醇、正丁醇及正戊醇）對聯(lián)萘酚二醋酸酯拆分的影響較小，且構型總是出峰在前。對聯(lián)萘酚二磺酸酯和二溴代聯(lián)萘酚，流動相中異丙醇含量提高到2%時仍難以洗脫，使用乙醇且添加少量醋酸有利于其洗脫，當以正己烷乙醇醋酸（77∶22∶VV）為流動相時，聯(lián)萘酚二磺酸酯在min內(nèi)洗脫，可獲得基線分離；二溴代聯(lián)萘酚可獲得部分分離。