高效液相色譜法分析內(nèi)生真菌草酸青霉的代謝產(chǎn)物黑麥酮酸A

1 引 言

黑麥酮酸（Secalonic acids）屬于麥角色素類（Ergochrome）次生代謝產(chǎn)物，是一類真菌色素，是一組氧雜蒽酮二聚物的同分異構(gòu)體。自從Stoll等在1952年從真菌中分離得到黑麥酮酸A（Secalonic acid A）之后＼[1＼]，該系列的化合物黑麥酮酸（A， B， C， D， E， F， G）不斷地被發(fā)現(xiàn)＼[2＼]。由于黑麥酮酸類化合物具有各種不同的生理活性而成為眾多化學(xué)家及藥理學(xué)家的研究熱點(diǎn)＼[3～8＼]。其中黑麥酮酸A不僅存在于普通真菌中，植物內(nèi)生真菌中也可分離得到＼[9＼]。研究表明，黑麥酮酸A具有很強(qiáng)的抗腫瘤及抗炎、抗細(xì)菌和抗真菌活性＼[10～13＼]，對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞也有較強(qiáng)的保護(hù)作用＼[14＼]，在醫(yī)藥及科學(xué)研究領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。建立黑麥酮酸A的快速定量分析方法，對(duì)內(nèi)生真菌的發(fā)酵優(yōu)化及代謝產(chǎn)物的篩選等科學(xué)研究及應(yīng)用具有重要意義。

本課題組在前期研究中已從中藥材溫郁金中分離得到內(nèi)生真菌草酸青霉 Penicillium oxalicum Currie Thom，并從其發(fā)酵代謝產(chǎn)物中分離純化了大黃酚、大黃素、黑麥酮酸A 和β谷甾醇等單體化合物＼[15，16＼]，其中占主要含量的代謝產(chǎn)物黑麥酮酸A （圖1）。目前，對(duì)于黑麥酮酸類化合物的研究多集中于分離、純化方面＼[17～19＼]，而對(duì)于檢測(cè)分析技術(shù)則報(bào)道較少，僅見(jiàn)1982年Ehrlich等首次從谷物倉(cāng)庫(kù)的灰塵中用反相高效液相色譜檢測(cè)到了黑麥酮酸D；1986年，Neucere建立了用酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)方法來(lái)檢測(cè)黑麥酮酸D＼[20，21＼]。

本研究在前期對(duì)黑麥酮酸A提取分離的工作基礎(chǔ)上＼[16＼]，進(jìn)一步對(duì)黑麥酮酸A的高效液相色譜分析方法進(jìn)行了研究，通過(guò)對(duì)比采用不同色譜分析條件，進(jìn)一步優(yōu)化了內(nèi)生真菌草酸青霉代謝產(chǎn)物發(fā)酵過(guò)程中的檢測(cè)技術(shù)，為黑麥酮酸A的提取分離及檢測(cè)提供了理論依據(jù)。本方法具有通用性廣、分析時(shí)間短、靈敏度高、測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)。[TS（][HT5”SS] 圖1 化合物黑麥酮酸A的