新型電噴霧萃取電離質譜法快速標靶分析氨基酸

1 引 言

隨著生命科學研究的深入，人們發現生物小分子不僅是基因和蛋白的底物和終端產物，同時也可作為指示和感受生物狀態變化的標記物，它們通過與細胞內各種生物分子的相互作用調控著各種生理病理過程＼[1～3＼]。在眾多生物小分子中，氨基酸是重要的成員之一。氨基酸是構成肽和蛋白質的基本單位，同時也在一些疾病的發生和發展中扮演著至關重要的角色＼[4，5＼]。Jain等＼[6＼]發現，最小的氨基酸（甘氨酸）是與腫瘤細胞增殖率相關的重要代謝產物。Asiago等＼[7＼]采用谷氨酸、組氨酸、脯氨酸、酪氨酸作為代謝標記物，成功地早期預測了乳腺癌的復發。因此，氨基酸的檢測能為生物學研究提供一定的前期基礎，并對一些疾病的風險評估具有重要的借鑒意義。

近年來，對氨基酸的測定方法有GCMS法＼[8＼]、LCMS法＼[9，10＼]、CE法等＼[11～14＼]。這些方法通常需要預處理，繁瑣而費時，難于實現對大量樣品的快速檢測。電噴霧萃取電離質譜（EESIMS）是一種新型的常壓環境電離質譜方法（Ambient mass spectrometry），它的最大優點在于能在無需預處理條件下對復雜基體樣品直接進行質譜檢測＼[15～17＼]。本研究首先改進了EESI電離源，采用半封閉長方體構造，使之具有專門的管道排出實驗中的廢液和廢氣，提高實驗的穩定性和安全性。不同極性氨基酸標準品被用來表征和優化EESIMS檢測平臺，利用此平臺直接進行復雜基體樣品（尿液）中氨基酸檢測。結果表明，EESIMS檢測氨基酸時具有分析速度快、靈敏度高、基體影響小等特點，適宜用于大量樣品的快速檢測。