毛大丁草葉醇提物對大鼠離體子宮的作用

柳斌，郭美仙，劉勇，陸翠芬，劉光明，陳光勇

（大理學院藥學與化學學院，云南大理671000）

毛大丁草葉醇提物對大鼠離體子宮的作用

柳斌，郭美仙，劉勇，陸翠芬，劉光明，陳光勇*

（大理學院藥學與化學學院，云南大理671000）

目的：研究毛大丁草葉醇提物對大鼠離體子宮的作用。方法：取成熟雌性未孕大鼠，用擊打法處死，取子宮角制備大鼠離體子宮段，采用BL-420E+生物機能系統記錄子宮張力信號，觀察毛大丁草葉醇提物對大鼠離體子宮自發收縮和催產素誘發收縮的影響。結果：毛大丁草葉醇提物可以使大鼠離體子宮收縮頻率減慢、強度減小和活動力減弱。結論：毛大丁草葉醇提物對大鼠離體子宮自發收縮和催產素誘發收縮均具有明顯的抑制作用。

毛大丁草葉；醇提物；大鼠；離體子宮

毛大丁草Gerbera piloselloides（L.）為菊科帚菊木族大丁草屬植物，是多年生被毛草本植物。在我國分布于西藏、云南、四川、貴州、廣西、廣東、湖南、湖北、江西等地〔1〕，又名兔耳風和毛耳風〔2〕。毛大丁草全草入藥，全草包括葉、花、根、根莖，主治傷風感冒、咳嗽痰多、扁桃腺炎、水腫、胃及十二指腸潰瘍、胃腸炎、毒蛇咬傷等〔3〕。具有清熱解毒、理氣和血的功效，治癰腫、乳蛾、痄腮、瘰疬結核、胸肋痞氣、疝氣、下血〔4-5〕。相關研究表明毛大丁草具有鎮咳、祛痰、平喘等作用〔4，6-7〕。還有研究表明，毛大丁草有良好的抗菌作用〔8〕。目前，國內尚未見毛大丁草葉對動物離體子宮作用的研究報道，為此我們對毛大丁草葉醇提物對大鼠離體子宮的作用進行了研究，為更好地開發利用毛大丁草提供一定的科學依據。

1 材料

1.1 動物清潔級SD大鼠，成熟雌性未孕，體重（240±10）g，由昆明醫科大學實驗動物中心提供，合格證號：SCXK（滇）2011-0004。

1.2 試劑己烯雌酚（批號：950710111，廠家：上海第九制藥廠）；催產素注射液（批號：060405，廠家：上海第一生化藥業有限公司）；營養液（g/L）：NaCl 9.0，KCl 0.42，CaCl20.06，NaHCO30.5，葡萄糖0.5，通氧30 min。

1.3 樣品毛大丁草采自云南省大理市下關鎮，經大理學院生藥學周濃副教授鑒定為菊科大丁草屬植物毛大丁草。將葉粉碎后，取葉粉600 g，無水乙醇回流提取3次，每次2 h。合并提取液，用旋轉蒸發器濃縮成浸膏240 g。臨用時用蒸餾水配制成560 mg/mL的毛大丁草葉醇提物混懸液（GPC）。

1.4 儀器FW135中藥粉碎機（天津市泰斯特儀器有限公司），SHZ-D循環水式真空泵（鞏義市予華儀器有限責任公司），RE-200旋轉蒸發器（上海亞榮生化儀器廠），YP3001N電子天平（上海精密科學儀器有限公司），HW-400S恒溫平滑肌槽（成都泰盟科技有限公司），BL-420E+生物機能實驗系統（成都泰盟科技有限公司）。

2 方法

2.1 分組及標本制備取大鼠，于實驗前48 h，肌肉注射1次0.1%己烯雌酚0.1 mL/100 g，人工促使大鼠處于動情期或動情前期，以提高子宮平滑肌對藥物的敏感性。實驗時將大鼠隨機分為2組。用擊打法處死大鼠，剖腹取出子宮，立即置于盛有冷營養液的培養皿中，剝離附著于子宮角的結締組織和脂肪組織。將子宮角剪成長約1.5~2 cm子宮段，一端穿線固定于通氣鉤，另一端通過蛙心夾與張力換能器相連，將標本轉入盛有營養液的肌槽中。每個肌槽中分別盛有19.5 mL營養液，恒溫（32±0.5）℃，通予95% O2+5%CO2的混合氣體，每個子宮段負荷1 g，每10 min更換一次新鮮的營養液（32℃），穩定20 min，待收縮頻率和張力規則后開始試驗〔9-12〕。

2.2 給藥及記錄每加入一種試劑并描記10 min，換液5次，穩定20 min。描記10 min離體子宮段的自發收縮活動，依次分別加入生理鹽水、0.01 U/mL催產素、560 mg/mL毛大丁草葉醇提物各0.5 mL，為自發收縮實驗組；描記10 min離體子宮段的自發收縮活動，依次分別加入生理鹽水、0.01 U/mL催產素、560 mg/mL毛大丁草葉醇提物+0.01 U/mL催產素，為誘發收縮實驗組。

2.3 數據統計用區間測量方法測量：給藥后10 min的平均收縮頻率；平均收縮強度（最大收縮張力）；計算子宮活動力（強度*頻率）。數據以均數±標準差（）表示，采用SPSS 17.0統計軟件進行組間t檢驗。

3 結果

3.1 毛大丁草葉醇提物對大鼠離體子宮自發收縮的影響表1顯示：與正常比較，催產素使大鼠離體子宮平滑肌自發收縮的頻率加快（P<0.01）；強度增大（P<0.01）；子宮活動力增強（P<0.01），表明離體子宮標本具有活性。與正常比較，毛大丁草葉醇提物使大鼠離體子宮平滑肌自發收縮的頻率減慢，但差異無統計學意義；收縮強度減小（P<0.01）；子宮活動力減弱（P<0.05），表明毛大丁草葉醇提物對大鼠離體子宮平滑肌的自發收縮有抑制作用。

表1 毛大丁草葉醇提物對大鼠離體子宮自發收縮的影響（，n=10）

表1 毛大丁草葉醇提物對大鼠離體子宮自發收縮的影響（，n=10）

注：與正常比較：*P<0.05，**P<0.01。

3.2 毛大丁草葉醇提物對大鼠離體子宮催產素誘發收縮的影響表2顯示：與正常比較，催產素使大鼠正常離體子宮平滑肌收縮的頻率加快（P<0.01）；強度增大（P<0.01）；子宮活動力增強（P<0.01），表明離體子宮標本具有活性。與催產素比較，毛大丁草葉醇提物使大鼠離體子宮平滑肌催產素誘發收縮的頻率減慢（P<0.01）；強度減小（P<0.01）；子宮活動力減弱（P<0.01），表明毛大丁草葉醇提物對大鼠離體子宮平滑肌的催產素誘發收縮有抑制作用。

表2 毛大丁草葉醇提物對大鼠離體子宮催產素誘發收縮的影響（x±s，n=10）

4 討論

非孕期和非病理情況下女性是感覺不到子宮收縮的，只有當懷孕或是子宮異常時才能感覺到。孕期的病理性子宮收縮見于流產或早產，故均為有痛性收縮；非孕期有強度較大的子宮收縮，屬于異常收縮。由子宮收縮引起的疼痛是一種特殊的疼痛，臨床上的鎮痛藥種類很多，但不是對其療效不明顯，就是毒副作用較多，而中藥則有很好的鎮痛作用，同時毒副作用較少。

本試驗采用BL-420E+生物機能系統記錄子宮張力信號，觀察大鼠離體子宮在加入受試物后的張力變化。結果發現，毛大丁草葉醇提物可抑制大鼠離體子宮的自發收縮和催產素誘發收縮，表現為收縮頻率減慢、強度減小和活動力減弱，從而證實毛大丁草葉醇提物能抑制大鼠離體子宮平滑肌的收縮功能。但其作用機制，尚需進行進一步的實驗研究。

〔1〕程用謙.中國植物志〔M〕.北京：科學出版社，1996：94-96.

〔2〕劉善述，李文虎，孫西.草木便方〔M〕.重慶：重慶出版社，1989：97.

〔3〕魏珠生，吳天開，鄭中楷，等.福建藥物志〔M〕.福州：福建科學技術出版社，1994：351-352.

〔4〕江蘇新醫學院.中藥大辭典：上冊〔M〕.上海：上海科學技術出版社，1977：446-448.

〔5〕藥理學組.毛大丁草鎮咳、祛痰作用的實驗研究〔J〕.醫藥科技資料，1977（1）：31.

〔6〕唐小江，黃華容，方鐵錚，等.毛大丁草根止咳化痰活性成分的研究〔J〕.中國中藥雜志，2003，28（5）：426-428.

〔7〕張世武，劉國雄.毛大丁草“平喘”作用的實驗觀察〔J〕.遵義醫學院學報，1980，4（1）：7.

〔8〕唐小江，張援，黃華容，等.毛大丁草不同部位揮發油成分的比較〔J〕.中山大學學報：自然科版，2003，42（2）：124-125.

〔9〕陳奇.中藥藥理研究方法學〔M〕.北京：人民衛生出版社，2006：463-464.

〔10〕Karsli B，Kayacan N，Kucukyavuz Z，et al.Efects of local an esthetics on pregnant uterine muscles〔J〕.Pol J Pharmacol，2003，55（1）：51-56.

〔11〕劉麗芬，柴天川，崔文華.引產餐醇提取物對大鼠子宮的影響〔J〕.時珍國醫國藥，2008，19（4）：820-821.

〔12〕謝燕，玄振玉，于莉，等.舒經克痛軟膠囊對大鼠子宮活動的影響〔J〕.中國中藥雜志，2008，33（12）：1466-1469.

（責任編輯 李楊）

In Vitro Study of the Effect of Gerbera piloselloides Ethanol Extract on the Uterus of Rat

LIU Bin,GUO Meixian,LIU Yong,LU Cuifen,LIU Guangming，CHEN Guangyong*
（College of Pharmacy and Chemistry,Dali University,Dali,Yunnan 671000,China）

Objective:To investigate the effect of ethanol extract from leaves of Gerbera piloselloides on the uterus of rat in vitro. Methods:Ten mature female but not pregnant SD rats were executed by strike,and uterine horns were used for the rat uterus segment in vitro.BL-420E+Biological Functional System was used to record uterine tension,the effect of Gerbera piloselloides Ethanol Extract on spontaneous contraction and oxytocin-induced contraction of uterus were recorded.Results:The extract could slow down the uterine contraction frequency and decrease the contraction intensity,and weaken the uterine motility as well. Conclusion:The ethanol extract of Gerbera piloselloides has significant inhibitive effect on the spontaneous contraction and oxytocininduced contraction of rat uterus in vitro.

Gerbera piloselloides;ethanol extract;rat;uterus in vitro

R285.5

A

1672-2345（2013）06-0090-03

10.3969/j.issn.1672-2345.2013.06.026

大理州科技局科研基金資助項目（2060402）；大理學院大學生科研基金資助項目（DXSKYY201123）

2012-08-30

2013-04-29

柳斌，藥學專業2009級本科生. *通信作者：陳光勇，副教授.