李曙光 ,李 偉 ,王明偉 ,陳 健 ,劉益飛
(1南通市第三人民醫院放療科,江蘇 226006;2南通大學附屬醫院病理科)
腦膠質瘤是最常見的顱內原發性腫瘤,國內報道占顱內腫瘤的35%~60%[1]。收集南通大學附屬醫院神經外科2005年12月—2009年12月手術切除腦膠質瘤60例標本,采用免疫組織化學S-P法,檢測膠質瘤60例組織中的血小板衍生生長因子(platelet-derived growth factor,PDGF)、血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白的表達,分析PDGF、VEGF表達及與膠質瘤病理分級、臨床病理特征的關系,探討其在腦膠質瘤發生、發展和侵襲中的意義。
1.1 材料 腦膠質瘤60例中男33例,女27例,年齡14~80歲,平均46.75歲,腫瘤≥3厘米29例,<3厘米31例;幕上28例,幕下32例。按WHO 2000年神經系統腫瘤病理學和遺傳學分級標準進行分類分級:彌漫性星形細胞瘤(WHOⅡ級)34例,間變性星形細胞瘤 (WHOⅢ級)20例,多形性膠質母細胞瘤(WHOⅣ級)6例。均為首發病例,術前未經放療、化療及生物治療。
1.2 方法 (1)標本處理:腫瘤組織經4%多聚甲醛固定,石蠟包埋,連續切片厚4μm,分別作HE染色和PDGF及VEGF免疫組化染色。PDGF以皮膚鱗癌標本作為陽性對照,VEGF選取血管平滑肌脂肪組織作為陽性對照。PBS溶液代替一抗作為陰性對照。(2)結果測定:PDGF和VEGF均定位于腫瘤細胞胞漿,以出現淡黃色至棕褐色顆粒且染色強度高于背景特異性著色者為陽性細胞。光鏡下半定量結果判斷參照許良忠的方法[2],綜合考慮染色強度和陽性細胞數。染色強度分數標準:棕褐色3分;棕黃色2分;淡黃色1分;無著色0分。同樣物鏡下計數陽性細胞數:一個視野內著色細胞>75%4分;51%~75%3分;11%~50%2分;≤10%1分;陰性0分。2項得分相乘:0~3分為陰性表達“-”;……