影響桃葉衛矛葉斑病病菌發生的環境條件

胡延生

（吉林農業科技學院，吉林 吉林 132101）

桃葉衛矛Euonymus bungeanusMaxim是衛矛科Celastraceae衛矛屬Euonymus植物，又名白杜、絲棉木、明開夜合等，落葉小喬木，高可達8 m，葉長一般為5～10 cm，呈橢圓形或橢圓狀披針形，葉柄細長，長為2.0～3.5 cm，類似桃樹葉片，因此稱其為桃葉衛矛。該樹為溫帶樹種，產于我國東北（小興安嶺以南）、華北、華中、華東等地區，自然生長于路旁、山坡林緣等地，由于其果實成熟后果瓣開裂，露出種子，種子紅色，假種皮橘紅色，非常美麗可觀，另外可宿存樹上1～2 個月，觀賞期長，是園林建設中重要的秋季觀果樹種[1]。2012年在對吉林市園林綠化樹木種類進行調查時發現了桃葉衛矛葉片起斑點的現象，該葉斑病影響了觀賞效果及其正常生長，經鑒定并確認其病原為葉點霉Phyllosticta chlorosporaMcAlp.[2-4]。葉點霉在瓜果、蔬菜類植物中比較常見，但在觀賞樹木中發生的報道比較少見，是吉林市園林綠化樹的新病害，以前未曾發現[5]。影響植物病原真菌生長的主要因素為環境因子，而環境因子中的溫度、pH值和光照條件起主要作用[6]。筆者通過探討不同溫度、pH值和光照條件對桃葉衛矛葉斑病的影響，以進一步了解桃葉衛矛葉斑病病菌的發生規律，為防控該種病菌奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

菌種來源：病葉采集于吉林農業科技學院校內，在實驗室進行了菌種的分離與提純，在無菌操作條件下，實施了組織分離和單孢子分離，純化菌種后低溫無菌保存以備用。

供試材料：桃葉衛矛葉斑病病菌、葡萄糖等，由本校實驗室提供。

PDA培養基的主要成分為馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂15～20 g、自來水1 000 mL培養基pH值為自然pH值。

1.2 試驗方法

1.2.1 不同溫度、pH值和光照條件對菌絲生長的影響

在無菌條件下，用打孔器取直徑為5 mm的病菌菌餅接種到PDA培養上，設置溫度分別為5、10、15、20、25、30、35 ℃共7 個處理，每處理重復5 次，分別置于7個處理溫度下的生化培養箱（SHP-1500）中黑暗培養5 d，測量菌落直徑。

在無菌條件下，用1 mol/L 氫氧化鈉和1 mol/L鹽酸在pH計下調節酸堿度,將PDA培養基質在50～60 ℃水浴條件下調成pH值分別為3、4、5、6、7、8、9、10、11的基質，待培養基凝固后，在無菌條件下將直徑為5 mm的病菌菌餅接種到PDA培養上，設置上述9個pH值共9 個處理，每處理重復5 次，培養條件及測量方法同上[7-8]。

在無菌條件下，將直徑為5 mm的病菌菌餅接種到PDA培養上，設置黑暗、光照與黑暗、全光照3 個處理，每處理重復5 次，設在（25±1）℃的生化培養箱（SHP-1500、GTOP-430D）中分別在黑暗（24 h）、光照與黑暗（12 h∶12 h）交替、全光照（24 h）條件下進行培養；測量方法同上。

1.2.2 不同溫度、pH值和光照條件對孢子萌發的影響

配制含葡萄糖的溶液：每1 000 mL溶液中填加葡萄糖5.000 g配成孢子懸浮液，置于生化培養箱（SHP-1500）中進行黑暗培養，設培養溫度為5～35 ℃，溫度間距為5 ℃，設置溫度分別為5、10、15、20、25、30、35 ℃ 共 7 個處理，定時記錄孢子萌發率,直至有一組萌發率達到或接近90%才結束試驗[9-11]。

配制含葡萄糖的溶液：每1 000 mL溶液中填加葡萄糖5.000 g，用1 mol/L 氫氧化鈉和1 mol/L鹽酸在pH計下調節酸堿度, 配成孢子懸浮液，設置pH值分別為3、4、5、6、7、8、9、10、11共9個處理，培養條件及測量方法同上[12]。

配制含葡萄糖的溶液：每1 000 mL溶液中填加葡萄糖5.000 g，配成孢子懸浮液，設置黑暗、光照與黑暗、全光照3個處理，設在生化培養箱（SHP-1500、GTOP-430D）中分別在黑暗（24 h）、光照與黑暗（12 h∶12 h）交替、全光照（24 h）條件下進行培養；其他培養條件及測量方法同上[13-14]。

2 結果與分析

2.1 不同溫度、PH值、光照條件對菌絲生長的影響

對不同溫度、pH值和光照處理中的菌落直徑（D）進行測量，計算各處理的平均直徑，然后進行方差分析，結果見表1。由表1可知，30 ℃與其它溫度處理的菌落直徑間差異極顯著，說明30 ℃的溫度條件最適宜菌絲生長；不同溫度處理的菌落直徑排序為D30℃＞D25℃＞D20℃＞D15℃＞D10℃＞D35℃＞D5℃，由此可見，最適宜菌絲生長的溫度為30 ℃。pH值分別為10、9、11、8、7的各處理的菌落直徑間差異不顯著，說明菌絲在偏堿性條件下生長相當；pH值分別為6、5、4、3的各處理的菌落直徑間差異極顯著，說明菌絲不宜在偏酸條件下生長，由此可知，菌絲適宜在pH為7～10的偏堿性條件下生長。全光、全暗和半光各條件下菌落直徑之間差異均極顯著，各處理的菌落直徑排序為D全光＞D半光＞D全暗，由此可知，全光條件為最適宜菌絲生長的光照條件。

表1 不同溫度、pH值、光照條件對菌絲生長的影響?Table 1 Effects of different temperature, pH value and light condition on mycelium growth

2.2 不同溫度、PH值、光照對孢子萌發的影響

對不同溫度、pH值和光照處理后的孢子萌發率（S）進行統計計算，然后進行方差分析，結果如表2所示。由表2可以看出，孢子萌發率在30 ℃、35 ℃、25 ℃之間差異不顯著，說明孢子在以上處理間比較適宜。不同溫度條件下孢子萌發率的排序為：S30℃＞S35℃＞S25℃＞S20℃＞S10℃＞S15℃＞S5℃，說明最適宜孢子萌發的溫度為25～35 ℃；在pH值分別為5和6時孢子萌發率的差異不顯著，其他pH值處理間的差異極顯著，各pH值處理后孢子萌發率的排序為：SpH=6＞SpH=5＞SpH=4＞SpH=7＞SpH=8＞SpH=9＞SpH=10＞SpH=3＞SpH=11，說明在pH值為4～7之間的偏酸條件下更適宜孢子萌發；全光處理與全暗處理之間差異極顯著，全暗與半光之間差異不顯著，由孢子萌發率排序為S全光＞S半光＞S全暗，說明光照可以提高孢子的萌發率，最適于孢子萌發的條件是全光照。

表2 不同溫度、pH值、光照對孢子萌發的影響Table 2 Effects of different temperatures, pH values and light conditions on spore germination

3 結論與討論

試驗結果表明，桃葉衛矛葉斑病病菌菌絲適宜在pH值為7～10之間的偏堿性條件下生長；最適宜菌絲生長的溫度為30 ℃；最適宜菌絲生長的光照條件是全光照。

在pH值為4～7之間的偏酸條件下則更適宜于桃葉衛矛葉斑病病原孢子的萌發；最適宜孢子萌發的溫度為25～35 ℃；最適于孢子萌發的條件是全光照。

本研究探討了環境因子中溫度、pH值、光照對桃葉衛矛葉斑病病菌的影響，對于不同的碳、氮源對桃葉衛矛葉斑病病菌的影響在其它文獻中已有記述[15-16]，對于其它因子對該病的影響，有待于進一步研究，本研究對于桃葉衛矛葉斑病病菌的發生規律等具有一定的指導意義。

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